金銀復(fù)合納米粒子溶液、制備工藝及檢測(cè)三聚氰胺的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液、制備工藝，涉及三聚氰胺的檢測(cè)領(lǐng)域，此制備工藝首先制備金納米粒子溶液，然后采用金納米粒子做晶種，硝酸銀和抗壞血酸做成長(zhǎng)溶液，制備金銀復(fù)合納米粒子溶液，此制備工藝簡(jiǎn)單，制得的金銀復(fù)合納米粒子的粒度均勻，其中的金銀復(fù)合納米粒子在三聚氰胺的作用下聚集，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)三聚氰胺的快速、簡(jiǎn)便檢測(cè)，具有較好的靈敏度和選擇性。本發(fā)明還提供一種檢測(cè)三聚氰胺的方法，該方法使用金銀復(fù)合納米粒子溶液，可快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)三聚氰胺。
【專利說(shuō)明】
金銀復(fù)合納米粒子溶液、制備工藝及檢測(cè)三聚氰胺的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及三聚氰胺的檢測(cè)領(lǐng)域，且特別涉及一種金銀復(fù)合納米粒子溶液、制備工藝及檢測(cè)三聚氰胺的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]三聚氰胺(MeIamine)，俗稱密胺、蛋白精，是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物，為純白色單斜棱晶體。食品工業(yè)上通常采用凱氏定氮法，通過(guò)測(cè)定氮含量來(lái)推算蛋白質(zhì)含量，三聚氰胺的含氮量為66 %，常被不法分子違法添加到食品中，以造成蛋白質(zhì)含量達(dá)標(biāo)的假象。
[0003]三聚氰胺具有較強(qiáng)的黏性，進(jìn)入人體后水解生成三聚氰胺，容易在體內(nèi)吸附形成結(jié)石的草酸、鞣酸及鈣等物質(zhì)，并沉淀在泌尿系統(tǒng)中。長(zhǎng)期攝入三聚氰胺會(huì)造成泌尿系統(tǒng)損害，會(huì)損害人體和動(dòng)物的生殖、泌尿系統(tǒng)，產(chǎn)生腎、膀胱結(jié)石。2008年10月7日，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)發(fā)布了原料乳和乳制品中三聚氰胺的檢測(cè)方法，包括液相色譜質(zhì)譜法、氣相色譜質(zhì)譜法、離子色譜紫外檢測(cè)法三種標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法。
[0004]液相色譜質(zhì)譜法是使奶粉樣品的蛋白質(zhì)部分沉淀，經(jīng)過(guò)純化、離心后用0.45μπι濾膜過(guò)濾，再用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(UPLC2MS2MS)分析測(cè)定。該方法可測(cè)定低含量的三聚氰胺，檢測(cè)靈敏、結(jié)果準(zhǔn)確，但使用的儀器昂貴。
[0005]氣相色譜質(zhì)譜法是將奶粉樣品沉淀離心后，凈化、氮?dú)獯蹈?、硅烷化衍生，再由氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)。氣相色譜質(zhì)譜法使用的試劑用量少，精確度高，安全可行，但必須經(jīng)過(guò)復(fù)雜的衍生步驟，操作繁瑣，工作效率低。
[0006]離子色譜紫外檢測(cè)法是用乙腈沉降蛋白，用1nPac CS17色譜柱進(jìn)行分離，配制三聚氰胺不同濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)其紫外光譜圖，用樣品的峰面積對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程即得樣品濃度。該方法精確度高，無(wú)色譜干擾，重現(xiàn)性良好，但試驗(yàn)成本較高，柱子易污染，操作較復(fù)雜。
[0007]除此之外，還可以使用酶聯(lián)免疫吸附法和比色法檢測(cè)原料乳和乳制品中的三聚氰胺。酶聯(lián)免疫吸附法是將樣品粉碎處理后，加入PBS溶液充分溶解，用三聚氰胺定量檢測(cè)試劑盒測(cè)量OD值。該方法選擇性好、靈敏度高、結(jié)果判斷客觀準(zhǔn)確、實(shí)用性強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)、安全，但不能夠同時(shí)分析多種成分。
[0008]比色法是通過(guò)金納米粒子與三聚氰胺結(jié)合形成復(fù)合物而發(fā)生團(tuán)聚，導(dǎo)致金納米粒子粒徑變大，顏色發(fā)生變化，從而反映待測(cè)樣品中三聚氰胺的含量。例如公開(kāi)號(hào)為CN101846631A的中國(guó)專利通過(guò)金納米粒子的制備、冠醚的衍生化、金納米粒子偶聯(lián)冠醚、運(yùn)用金納米粒子自組裝和分子識(shí)別檢測(cè)三聚氰胺。該方法前期制備過(guò)程復(fù)雜。
[0009]綜上所述，以上各種方法雖然都具有對(duì)三聚氰胺的檢測(cè)靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，但是它們都需要用到大型精密儀器，或者需要專業(yè)操作人員進(jìn)行復(fù)雜的樣品前處理，操作起來(lái)比較復(fù)雜，無(wú)法實(shí)現(xiàn)對(duì)三聚氰胺快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)，不能滿足我國(guó)對(duì)乳制品進(jìn)行批量檢測(cè)的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明的目的在于提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液，其中的金銀復(fù)合納米粒子在三聚氰胺的作用下聚集，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)三聚氰胺的快速、簡(jiǎn)便檢測(cè)，具有較好的靈敏度和選擇性。
[0011 ]本發(fā)明的另一目的在于提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，工藝簡(jiǎn)單，制得的溶液可用于快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)三聚氰胺。
[0012]本發(fā)明的另一目的在于提供一種檢測(cè)三聚氰胺的方法，可快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)三聚氰胺。
[0013]本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題是采用以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
[0014]—種金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其包括以下步驟:
[0015]稱取檸檬酸鈉和三水合四氯金酸溶解于水中，劇烈攪拌，得到第一溶液，稱取硼氫化鈉，用冰水配制成第二溶液，將第二溶液加入到第一溶液中，得到第三溶液；
[0016]稱取硝酸銀和檸檬酸鈉溶解于水中，得到第四溶液，將第三溶液在l-2s內(nèi)加入到第四溶液中，得到第五溶液;以及
[0017]量取抗壞血酸，將抗壞血酸在8_12min內(nèi)逐滴加入到第五溶液中，滴加完畢后繼續(xù)攪拌0.6-1.5h，得到金銀復(fù)合納米粒子溶液。
[0018]進(jìn)一步地，在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，上述第一溶液中檸檬酸鈉的濃度為0.07-0.077g/L，第一溶液中三水合四氯金酸的濃度為0.95-0.112g/L;第二溶液中硼氫化鈉的濃度為 0.08-0.12mol/L。
[0019]進(jìn)一步地，在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，上述第一溶液和第二溶液的體積比為80-120:1o
[0020]進(jìn)一步地，在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，配制第一溶液的方法是:稱取檸檬酸鈉和三水合四氯金酸溶解于水中，采用磁力攪拌器，在55-60轉(zhuǎn)/min的條件下攪拌20-30min。
[0021 ]進(jìn)一步地，在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，上述第四溶液中硝酸銀的濃度為0.1-0.3g/L，第四溶液中檸檬酸鈉的濃度為0.4-0.8g/L。
[0022]進(jìn)一步地，在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，上述第三溶液與第四溶液的體積比為2-4:50。
[0023]進(jìn)一步地，在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，上述抗壞血酸和第五溶液的體積比為10:50_56 ο
[0024]—種金銀復(fù)合納米粒子溶液，采取上述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝制得。
[0025]—種采用金銀復(fù)合納米粒子溶液檢測(cè)三聚氰胺的方法，其包括以下步驟:
[0026]按體積比1-5:10量取金銀復(fù)合納米粒子溶液和去離子水，混合得到檢測(cè)溶液；
[0027]將待測(cè)樣品加入檢測(cè)溶液中，混合均勻后，室溫下放置10_15min，得到待測(cè)溶液；以及
[0028]對(duì)待測(cè)溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試待測(cè)溶液在400nm的吸收值A(chǔ)4Q()，以及在636nm處的紫外光吸收值A(chǔ)636，根據(jù)A636/A4QQ值，對(duì)照A636/A4QQ對(duì)三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)濃度曲線圖，即可得到待測(cè)溶液中三聚氰胺的濃度。
[0029]進(jìn)一步地，在本發(fā)明較佳實(shí)施例中，上述方法還包括在檢測(cè)之前繪制A636/A4(X)對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖的步驟，步驟具體包括:
[0030]分別量取至少5份0.1-0.5mL的金銀復(fù)合納米粒子溶液，將每份金銀復(fù)合納米粒子溶液分別加入ImL去離子水中，并加入不同量的三聚氰胺，混合均勻后，靜置8-12分鐘，形成不同濃度的三聚氰胺溶液；以及
[0031]分別對(duì)不同濃度的三聚氰胺溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試不同濃度的三聚氰胺溶液在400nm的紫外光吸收值A(chǔ)4qq，以及在636nm的紫外光吸收值A(chǔ)636，計(jì)算不同濃度的三聚氰胺溶液對(duì)應(yīng)的A636/A400，根據(jù)不同濃度的三聚氰胺溶液的濃度與對(duì)應(yīng)的A636/A400，制得A636/A4(k)對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0032]本發(fā)明實(shí)施例的有益效果是:本發(fā)明實(shí)施例的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝首先制備金納米粒子溶液，然后采用金納米粒子做晶種，硝酸銀和抗壞血酸做成長(zhǎng)溶液，制備金銀復(fù)合納米粒子溶液，工藝簡(jiǎn)單，制得的金銀復(fù)合納米粒子的粒度均勾，其中的金銀復(fù)合納米粒子在三聚氰胺的作用下聚集，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)三聚氰胺的快速、簡(jiǎn)便檢測(cè)，具有較好的靈敏度和選擇性。本發(fā)明實(shí)施例的檢測(cè)三聚氰胺的方法使用金銀復(fù)合納米粒子溶液，可快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)三聚氰胺。
【附圖說(shuō)明】
[0033]為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，應(yīng)當(dāng)理解，以下附圖僅示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例，因此不應(yīng)被看作是對(duì)范圍的限定，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。
[0034]圖1為本發(fā)明實(shí)施例3制得的A636/A4(X)對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
【具體實(shí)施方式】
[0035]為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)市售購(gòu)買獲得的常規(guī)產(chǎn)品O
[0036]下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的金銀復(fù)合納米粒子溶液、制備工藝及檢測(cè)三聚氰胺的方法進(jìn)行具體說(shuō)明。
[0037]本發(fā)明實(shí)施例提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其包括以下步驟:
[0038]S1.稱取檸檬酸鈉和三水合四氯金酸(HAuCl4.3H20)溶解于水中，劇烈攪拌，得到第一溶液，第一溶液中檸檬酸鈉的濃度為0.07-0.077g/L，優(yōu)選為0.0735g/L;第一溶液中三水合四氯金酸的濃度為0.95-0.112g/L，優(yōu)選為0.0985g/L。其中配制第一溶液的具體方法是:稱取檸檬酸鈉和三水合四氯金酸溶解于水中，采用磁力攪拌器，在55-60轉(zhuǎn)/min的條件下攪拌20-30min，實(shí)現(xiàn)劇烈攪拌，得到第一溶液。
[O O3 9 ]稱取硼氫化鈉，用冰水配制成第二溶液，第二溶液中硼氫化鈉的濃度為0.0 8 -0.1211101/1，優(yōu)選為0.111101/1。
[0040]將第二溶液加入到第一溶液中，第一溶液和第二溶液的體積比為80-120:1，優(yōu)選為100:1，得到第三溶液，即金納米粒子溶液，第三溶液為棕紅色，表明Au NPs種子生成。
[0041]S2.稱取硝酸銀(AgNO3)和檸檬酸鈉溶解于水中，得到第四溶液，第四溶液中硝酸銀的濃度為0.1 -0.3g/L，優(yōu)選為0.2g/L，檸檬酸鈉的濃度為0.4-0.8g/L，優(yōu)選為0.6g/L。
[0042]將第三溶液在l-2s內(nèi)加入到量取的第四溶液中，得到第五溶液，第三溶液和第四溶液的體積比為2-4:50，優(yōu)選為3:50。
[0043]S3.量取抗壞血酸，并將抗壞血酸在8-12min內(nèi)逐滴加入到量取的第五溶液中，抗壞血酸和第五溶液的體積比為10: 50-56，優(yōu)選為10: 53，滴加完畢后繼續(xù)攪拌0.6-1.5h，優(yōu)選攪拌lh，得到棕黃色的金銀復(fù)合納米粒子溶液。
[0044]抗壞血酸加入第五溶液的速度與金銀復(fù)合納米粒子的均勻性有著密切關(guān)系，只有在10分鐘左右逐滴加入抗壞血酸，所得金銀復(fù)合納米粒子中的金銀復(fù)合納米粒子尺寸均勻，反之，若抗壞血酸一次性急速加入，則金銀復(fù)合納米粒子尺寸會(huì)不一。
[0045]本發(fā)明實(shí)施例還提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液，采取上述金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝制得。
[0046]本實(shí)施例中，采用紫外-可見(jiàn)分光光譜儀分別對(duì)第三溶液(金納米粒子溶液)和金銀復(fù)合納米粒子溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，發(fā)現(xiàn):第三溶液為棕紅色/酒紅色，在520nm處存在吸收峰；而金銀復(fù)合納米粒子溶液呈棕黃色/深黃色，在400nm處存在吸收峰，與純銀納米粒子溶液的吸收峰值相似。
[0047]另外，為了研究金銀復(fù)合納米粒子溶液中的金銀復(fù)合納米粒子的生長(zhǎng)過(guò)程，采用紫外-可見(jiàn)分光光譜儀對(duì)制備過(guò)程中的溶液的吸收光譜進(jìn)行監(jiān)測(cè)，結(jié)果表明，在抗壞血酸加入到第五溶液的瞬間，溶液在520nm處的吸收峰(第三溶液的特征峰)消失，而在400nm處出現(xiàn)新的吸收峰，表明其中有金銀復(fù)合納米粒子的生成。這是檸檬酸鈉作為表面保護(hù)劑，抗壞血酸為強(qiáng)還原劑，第三溶液中的金納米粒子做晶種，能迅速將硝酸銀的銀離子還原為納米銀，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，納米銀不斷長(zhǎng)大，直到形成金銀復(fù)合納米粒子，導(dǎo)致溶液在400nm的吸收峰值越來(lái)越高，在反應(yīng)Ih后達(dá)到最大值并不再變化，表明反應(yīng)已經(jīng)完全結(jié)束。
[0048]進(jìn)一步地，為了測(cè)試金銀復(fù)合納米粒子溶液對(duì)不同濃度的三聚氰胺的作用規(guī)律，首先量取0.2mL金銀復(fù)合納米粒子溶液，加入不同量的三聚氰胺，混合均勻后，靜置10分鐘，再加一定量的去離子水稀釋，形成不同濃度的三聚氰胺溶液，然后采用紫外-可見(jiàn)分光光譜儀分別對(duì)這些不同濃度的三聚氰胺溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜表征，以及采用透射電子顯微鏡觀察其中的粒子，結(jié)果如下:
[0049](I)將三聚氰胺加入到金銀復(fù)合納米粒子溶液后，溶液顏色發(fā)生了顯著改變，從最初的棕黃色變?yōu)樯铧S色，而且隨著三聚氰胺濃度的增大，顏色變?yōu)楹邳S色。
[0050](2)用金納米粒子做晶種的方法制備金銀復(fù)合納米粒子，第三溶液(金納米粒子溶液)中金納米粒子的尺寸約為4nm，金銀復(fù)合納米粒子溶液中的金銀復(fù)合納米粒子分布均勻，粒子尺寸約為13nm，大小均勻，球形規(guī)則，加入三聚氰胺后，金銀復(fù)合納米粒子發(fā)生聚集，且聚集程度很高，說(shuō)明三聚氰胺可導(dǎo)致了復(fù)合粒子的聚集。
[0051](3)隨著三聚氰胺的加入，金銀復(fù)合納米粒子溶液在400nm的吸收峰降低，并且隨著三聚氰胺溶液濃度的增大，在400nm的吸收峰逐漸降低，同時(shí)在636nm出現(xiàn)一個(gè)新的吸收峰。在400nm的吸收值A(chǔ)4qq代表單分散的金銀復(fù)合納米粒子，而636nm的吸收值A(chǔ)636代表聚集的金銀復(fù)合納米粒子，因此，A636/A4Q()代表聚集的納米粒子與單分散的納米粒子數(shù)目之比，而A636/A4(k)與三聚氰胺的濃度之間呈線性關(guān)系，可得到A636/A4(k)對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0052]在上述結(jié)論的基礎(chǔ)上，本發(fā)明實(shí)施例還提供一種采用上述金銀復(fù)合納米粒子溶液檢測(cè)三聚氰胺的方法，其包括以下步驟:
[0053]M、繪制A636/A4(X)對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖:
[0054]Ml、分別量取至少5份0.1-0.5mL的金銀復(fù)合納米粒子溶液，將每份金銀復(fù)合納米粒子溶液分別加入ImL去離子水中，并加入不同量的三聚氰胺，混合均勻后，靜置8-12分鐘，形成不同濃度的三聚氰胺溶液；
[0055]M2、采用紫外-可見(jiàn)分光光譜儀分別對(duì)不同濃度的三聚氰胺溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試不同濃度的三聚氰胺溶液在400nm的紫外光吸收值A(chǔ)400，在636nm的紫外光吸收值A(chǔ)636，計(jì)算不同濃度的三聚氰胺溶液對(duì)應(yīng)的Α636/Α40()，根據(jù)不同濃度的三聚氰胺溶液的濃度與對(duì)應(yīng)的Α636/Α400，制得Α636/A.對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0056]N、檢測(cè)三聚氰胺:
[0057]N1、按體積比1-5:10，量取金銀復(fù)合納米粒子溶液和去離子水，混合得到檢測(cè)溶液；
[0058]N2、將待測(cè)樣品加入檢測(cè)溶液中，混合均勻后，室溫下放置10-15min，得到待測(cè)溶液；以及
[0059]N3、采用紫外-可見(jiàn)分光光譜儀對(duì)待測(cè)溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試待測(cè)溶液在400nm的吸收值A(chǔ).，以及在636nm處的紫外光吸收值A(chǔ)636，根據(jù)A636/A4qq值，對(duì)照A636/A400對(duì)三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)濃度曲線圖，即可得到待測(cè)溶液中三聚氰胺的濃度。
[0060]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0061 ] 實(shí)施例1
[0062]本實(shí)施例提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液，按照以下方法制備得到。
[0063]步驟1、金納米粒子溶液的制備:
[0064]將1.4mg檸檬酸鈉和1.9mgHAuCl4.3H20溶解在20mL水中，劇烈攪拌，得到第一溶液;用冰水配制0.08mol/L的NaBH4溶液，即為第二溶液；
[0065]將0.25mL新鮮的第二溶液加入到上述第一溶液中，溶液變成棕紅色，表明Au NPs種子生成，得到金納米粒子溶液(第三溶液)。
[0066]步驟2、金銀復(fù)合納米粒子溶液:
[0067]將5mgAgN03和20mg檸檬酸鈉溶解于50mL水中，得到第四溶液；
[0068]將2mL金納米粒子溶液迅速加入到第四溶液中，得到第五溶液；
[0069]將10mL(30mg)抗壞血酸在8分鐘內(nèi)，逐滴加入到上述第五溶液中，加完后繼續(xù)攪拌lh，得到棕黃色的金銀復(fù)合納米粒子溶液。
[0070]實(shí)施例2
[0071]本實(shí)施例提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液，按照以下方法制備得到。
[0072]步驟1、金納米粒子溶液的制備:
[0073]將1.54mg檸檬酸鈉和2.24mgHAuCl4.3H20溶解在20mL水中，劇烈攪拌，得到第一溶液;用冰水配制0.12mol/L的NaBH4溶液，即為第二溶液；
[0074]將0.17mL新鮮的第二溶液加入到上述第一溶液中，溶液變成棕紅色，表明Au NPs種子生成，得到金納米粒子溶液(第三溶液)。
[0075]步驟2、金銀復(fù)合納米粒子溶液:
[0076]將15mgAgN03和40mg檸檬酸鈉溶解于50mL水中，得到第四溶液；
[0077]將4mL金納米粒子溶液迅速加入到第四溶液中，得到第五溶液；
[0078]將10mL(30mg)抗壞血酸在12分鐘內(nèi)，逐滴加入到上述第五溶液中，加完后繼續(xù)攪拌lh，得到棕黃色的金銀復(fù)合納米粒子溶液。
[0079]實(shí)施例3
[0080]本實(shí)施例提供一種金銀復(fù)合納米粒子溶液，按照以下方法制備得到，所用的玻璃儀器都經(jīng)過(guò)王水浸泡，超聲器清洗，烘干備用。
[0081]步驟1、金納米粒子溶液的制備:
[0082]將1.47mg檸檬酸鈉和1.97mgHAuCl4.3H20溶解在20mL水中，劇烈攪拌，得到第一溶液;用冰水配制0.lmol/L的NaBH4溶液，即為第二溶液；
[0083]將0.2mL新鮮的第二溶液加入到上述第一溶液中，溶液變成棕紅色，表明Au NPs種子生成，得到金納米粒子溶液(第三溶液)。
[0084]步驟2、金銀復(fù)合納米粒子溶液:
[0085]將1mgAgNO3和30mg檸檬酸鈉溶解于50mL水中，得到第四溶液；
[0086]將3mL金納米粒子溶液迅速加入到第四溶液中，得到第五溶液；
[0087]將10mL(30mg)抗壞血酸在10分鐘內(nèi)，逐滴加入到上述第五溶液中，加完后繼續(xù)攪拌lh，得到棕黃色的金銀復(fù)合納米粒子溶液。
[0088]采用本實(shí)施例的金銀復(fù)合納米粒子溶液檢測(cè)三聚氰胺，過(guò)程如下:
[0089]繪制A636/A4(X)對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖:
[0090]分別量取12份0.2mL的金銀復(fù)合納米粒子溶液，將每份金銀復(fù)合納米粒子溶液分別加入ImL去離子水中，并加入不同量的三聚氰胺，混合均勻后，靜置10分鐘，形成不同濃度的三聚氰胺溶液；
[0091]采用紫外-可見(jiàn)分光光譜儀分別對(duì)不同濃度的三聚氰胺溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試不同濃度的三聚氰胺溶液在400nm的紫外光吸收值A(chǔ)400，在636nm的紫外光吸收值A(chǔ)636 ,計(jì)算不同濃度的三聚氰胺溶液對(duì)應(yīng)的A636/A4(k)，根據(jù)不同濃度的三聚氰胺溶液的濃度與對(duì)應(yīng)的A636/A400，制得A636/A4QQ對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，如圖1所不，對(duì)三聚氰胺(Melamine)的檢測(cè)限為0.025mM(mmol/L)，檢測(cè)范圍為0.083mM_2.04mM，具有較好的選擇性。
[0092]檢測(cè)三聚氰胺:
[0093]量取ImL金銀復(fù)合納米粒子溶液和去離子水，混合得到檢測(cè)溶液，將0.1g待測(cè)樣品加入檢測(cè)溶液中，混合均勻后，室溫下放置13min，得到待測(cè)溶液；
[0094]采用紫外-可見(jiàn)分光光譜儀對(duì)待測(cè)溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試待測(cè)溶液在400nm的吸收值A(chǔ).，以及在636nm處的紫外光吸收值A(chǔ)636，根據(jù)A636/A4(X)值，對(duì)照三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)濃度曲線圖，即可得到待測(cè)溶液中三聚氰胺的濃度。
[0095]綜上所述，本發(fā)明實(shí)施例的金銀復(fù)合納米粒子溶液，其中的金銀復(fù)合納米粒子在三聚氰胺的作用下聚集，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)三聚氰胺的快速、簡(jiǎn)便檢測(cè)，具有較好的靈敏度和選擇性;本發(fā)明實(shí)施例的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，工藝簡(jiǎn)單，制得的金銀復(fù)合納米粒子粒度均勻，可用于快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)三聚氰胺;本發(fā)明實(shí)施例的的檢測(cè)三聚氰胺的方法，可快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)三聚氰胺，對(duì)于拓寬金銀復(fù)合納米粒子的制備途徑及其在傳感檢測(cè)方面的應(yīng)用范圍均具有理論和實(shí)際意義。
[0096]以上所描述的實(shí)施例是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。本發(fā)明的實(shí)施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍，而是僅僅表示本發(fā)明的選定實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其特征在于，其包括以下步驟: 稱取檸檬酸鈉和三水合四氯金酸溶解于水中，劇烈攪拌，得到第一溶液，稱取硼氫化鈉，用冰水配制成第二溶液，將所述第二溶液加入到所述第一溶液中，得到第三溶液； 稱取硝酸銀和檸檬酸鈉溶解于水中，得到第四溶液，將所述第三溶液在1-2S內(nèi)加入到所述第四溶液中，得到第五溶液;以及 量取抗壞血酸，將所述抗壞血酸在8-12min內(nèi)逐滴加入到所述第五溶液中，滴加完畢后繼續(xù)攪拌0.6-1.5h，得到金銀復(fù)合納米粒子溶液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其特征在于，所述第一溶液中所述檸檬酸鈉的濃度為0.07-0.077g/L，所述第一溶液中所述三水合四氯金酸的濃度為0.95-0.112g/L;所述第二溶液中所述硼氫化鈉的濃度為0.08-0.12mol/L。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其特征在于，所述第一溶液和所述第二溶液的體積比為80-120:1。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其特征在于，配制所述第一溶液的方法是:稱取檸檬酸鈉和三水合四氯金酸溶解于水中，采用磁力攪拌器，在55-60轉(zhuǎn)/min的條件下攪拌20-30min。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其特征在于，所述第四溶液中所述硝酸銀的濃度為0.1-0.3g/L，所述第四溶液中所述檸檬酸鈉的濃度為0.4-0.8g/L06.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其特征在于，所述第三溶液與所述第四溶液的體積比為2-4:50。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝，其特征在于，所述抗壞血酸和所述第五溶液的體積比為10:50-56。8.—種金銀復(fù)合納米粒子溶液，其特征在于，采取權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液的制備工藝制得。9.一種采用如權(quán)利要求8所述的金銀復(fù)合納米粒子溶液檢測(cè)三聚氰胺的方法，其特征在于，其包括以下步驟: 按體積比1-5:10量取所述金銀復(fù)合納米粒子溶液和去離子水，混合得到檢測(cè)溶液； 將待測(cè)樣品加入所述檢測(cè)溶液中，混合均勻后，室溫下放置10_15min，得到待測(cè)溶液；以及 對(duì)待測(cè)溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試所述待測(cè)溶液在400nm的吸收值A(chǔ)4QQ，以及在636nm處的紫外光吸收值A(chǔ)636，根據(jù)A636/A4QQ值，對(duì)照A636/A4QQ對(duì)三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)濃度曲線圖，即可得到待測(cè)溶液中三聚氰胺的濃度。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的檢測(cè)三聚氰胺的方法，其特征在于，所述方法還包括在檢測(cè)之前繪制A636/A4(k)對(duì)三聚氰胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖的步驟，所述步驟具體包括: 分別量取至少5份0.1-0.5mL的所述金銀復(fù)合納米粒子溶液，將每份所述金銀復(fù)合納米粒子溶液分別加入ImL去離子水中，并加入不同量的三聚氰胺，混合均勻后，靜置8-12分鐘，形成不同濃度的三聚氰胺溶液；以及 分別對(duì)不同濃度的所述三聚氰胺溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光譜分析，測(cè)試不同濃度的所述三聚氰胺溶液在400nm的紫外光吸收值A(chǔ)4qq，以及在636nm的紫外光吸收值A(chǔ)636，計(jì)算不同濃度的所述三聚氰胺溶液對(duì)應(yīng)的A636/A4Q()，根據(jù)不同濃度的所述三聚氰胺溶液的濃度與對(duì)應(yīng)的A636/A400，制得A636/A4QQ對(duì)二聚氛胺濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
【文檔編號(hào)】G01N1/38GK105911006SQ201610395826
【公開(kāi)日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年6月6日
【發(fā)明人】姜翠鳳, 吳銀杏, 羅駒華, 楊子潤(rùn), 宋娟
【申請(qǐng)人】鹽城工學(xué)院