硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法。該方法研究了硫酸新霉素與Cu2+絡(luò)合物形成的條件，建立了在酒石酸鉀鈉堿性介質(zhì)中，常溫下反應(yīng)10min～30min，生成藍(lán)色絡(luò)合物，其中631nm波長處有最大吸收。應(yīng)用本發(fā)明對硫酸新霉素原料和成品可溶性粉的回收率和含量測定，結(jié)果顯示，該方法通用性好、快捷，不受制劑中其它共存物的干擾，為醫(yī)藥工業(yè)提供了硫酸新霉素含量的快速檢測方法。本發(fā)明專屬性強，精密度好，操作簡單。
【專利說明】
硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及一種硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]硫酸新霉素可溶性粉是一種易溶于水，性質(zhì)穩(wěn)定，用途較廣的氨基糖苷類抗生素制劑，獸醫(yī)臨床上廣泛用于治療畜禽的葡萄球菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等感染引起的胃腸道感染。目前，中國藥典2010年版采用微生物檢定法測定含量。其操作復(fù)雜、測定周期長、試劑價格昂貴，影響因素較多，不過隨著新技術(shù)的發(fā)展，設(shè)備自動化程度的提高，此法準(zhǔn)確性也得到進一步改善，不過不適宜在生產(chǎn)過程中進行半成品的質(zhì)量控制，此法也將逐步被其他方法取代。由于硫酸新霉素結(jié)構(gòu)中缺乏強紫外吸收的基團，多采用衍生化處理后進行含量測定。當(dāng)前檢測新霉素的化學(xué)方法常用2，4 一二硝基氟苯(DNF B)、鄰苯二甲醛(0ΡΑ )、茚三酮-吡啶、乙酰丙酮-甲醛等為衍生試劑，因試驗中使用的多為有毒試劑和有機溶劑，增加了操作過程的危險性，給人身帶來不利的影響。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種安全簡便的硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法，包括以下步驟:
(1)精密稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品，配成20mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液；
(2)精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(3)精密稱取硫酸新霉素原粉或成品硫酸新霉素可溶性粉于容量瓶中，完全溶解后過濾；
(4)準(zhǔn)確移取濾液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度；
(5)充分搖勾后靜置10?30min，于最大吸收峰的波長下測定吸光度；
(6)以吸光度A對濃度C作線性回歸方程，將吸光度代入公式計算硫酸新霉素的含量。
[0005]作為優(yōu)選:
步驟(I)中稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.5g。
[0006]步驟(2 )中分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液ImL、2mL、3mL、4mL、5mL、7.5mL于容量瓶中，再分別加入2?5mL堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0007]步驟(3)中精密稱取硫酸新霉素原粉0.2?0.5g或成品硫酸新霉素可溶性粉I?2g于容量瓶中，完全溶解后過濾。
[0008]步驟(4)中，準(zhǔn)確移取濾液5mL于容量瓶中，加入2mL堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度。
[0009]本發(fā)明的有益效果是:
(I)使用堿性酒石酸銅試液作為反應(yīng)試劑，使用安全方便。
[0010](2)對待測樣品進行過濾，減少了對吸光度的影響。
[0011](3)反應(yīng)溫度和時間的優(yōu)化。
[0012]與微生物法相比，本發(fā)明的分光光度法檢測具有簡便、快速、易于操作等優(yōu)點，對試驗環(huán)境、儀器設(shè)備要求不高，適合一般生產(chǎn)企業(yè)使用。
【具體實施方式】
[0013]由于薄層色譜法、高效液相色譜法、分光光度法等方法中存在反應(yīng)時間較長或使用了較多的有機溶劑等問題。本實施例的目的是提供一個通用、快捷的藥物中硫酸新霉素含量檢測方法，滿足硫酸新霉素生產(chǎn)控制和制劑檢測的需要，以取代費時的藥典方法一微生物檢定法。
[0014]—種硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法，包括以下步驟:
(1)精密稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.5g，配成20mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液；
(2)分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液ImL、2mL、3mL、4mL、5mL、7.5mL于25mL容量瓶中，分別加入2?5mL堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(3)精密稱取硫酸新霉素原粉0.2?0.5g或成品硫酸新霉素可溶性粉I?2g于50mL容量瓶中，完全溶解后過濾；
(4)準(zhǔn)確移取濾液5mL于1mL容量瓶中，加入2mL堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度；
(5)充分搖勾后靜置10?30min，于最大吸收峰的波長下測定吸光度；
(6)以吸光度A對濃度C作線性回歸方程，將吸光度代入公式計算硫酸新霉素的含量。
[0015]本實施案例研究了硫酸新霉素與Cu2+絡(luò)合物形成的條件，建立了在酒石酸鉀鈉堿性介質(zhì)中，常溫下反應(yīng)1min?30min，生成藍(lán)色絡(luò)合物，其中631nm波長處有最大吸收。應(yīng)用本實施例對硫酸新霉素原料和成品硫酸新霉素可溶性粉的回收率和含量測定，結(jié)果顯示，該方法通用性好、快捷，不受制劑中其它共存物的干擾，為醫(yī)藥工業(yè)提供了硫酸新霉素含量的快速檢測方法。本方法專屬性強，精密度好，操作簡單。
[0016]對于成品硫酸新霉素可溶性粉來說，除了主成份外，還有賦形劑淀粉和葡萄糖等。這些共存物在水中溶解不完全，處理樣品時，經(jīng)過過濾可除去絕大部分，本實施例對其干擾問題作了探索，發(fā)現(xiàn)淀粉和低于10%的葡萄糖含量對硫酸新霉素的測定無影響。
[0017]以上所述的本發(fā)明實施方式，并不構(gòu)成對本發(fā)明保護范圍的限定。任何在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的權(quán)利要求保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.光光度計檢測方法，包括以下步驟: (1)精密稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品，配成20mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液； (2)精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線； (3)精密稱取硫酸新霉素原粉或成品硫酸新霉素可溶性粉于容量瓶中，完全溶解后過濾； (4)準(zhǔn)確移取濾液于容量瓶中，加入堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度； (5)充分搖勾后靜置10?30min，于最大吸收峰的波長下測定吸光度； (6)以吸光度A對濃度C作線性回歸方程，將吸光度代入公式計算硫酸新霉素的含量。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法，其特征在于，步驟(I)中稱取硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.5g。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法，其特征在于，步驟(2)中分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備液ImL、2mL、3mL、4mL、5mL、7.5mL于容量瓶中，再分別加入2?5mL堿性酒石酸銅試液，并用純水稀釋到刻度，制成濃度范圍為I?6mg/mL的硫酸新霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法，其特征在于，步驟(3)中精密稱取硫酸新霉素原粉0.2?0.5g或成品硫酸新霉素可溶性粉I?2g于容量瓶中，完全溶解后過濾。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸新霉素紫外分光光度計檢測方法，其特征在于，步驟(4)中，準(zhǔn)確移取濾液5mL于容量瓶中，加入2mL堿性酒石酸銅試液，用純水稀釋至刻度。
【文檔編號】G01N1/28GK106053374SQ201610695376
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年8月22日
【發(fā)明人】孟慶娟, 楊曉龍, 張廣志, 胡廣偉
【申請人】安徽華澳生物技術(shù)有限公司