一種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法。是將連翹花干燥，粉碎，以含水甲醇或含水乙醇為溶劑，采用微波輔助提取法制備樣品溶液；采用高效液相色譜法進(jìn)行化學(xué)成分的指紋圖譜分析，以乙腈為流動(dòng)相A，酸水為流動(dòng)相B，梯度洗脫；本發(fā)明采用優(yōu)化的微波輔助提取方法制備樣品，能在40min內(nèi)實(shí)現(xiàn)20種以上化學(xué)成分的有效分離。本方法是一種快速、高效分析連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的新方法，有利于連翹花化學(xué)成分分析及質(zhì)量控制水平的提高。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種天然產(chǎn)物質(zhì)量分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002]連翅(Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl)為木庫(kù)科(Oleaceae)連翅屬多年生落葉灌木。連翹的傳統(tǒng)用藥部位為果實(shí)，具有清熱解毒，消腫散結(jié)，疏散風(fēng)熱之功效，用于癰疽、瘰疬、乳癰、丹毒、風(fēng)熱感冒、溫病初起、溫?zé)崛霠I(yíng)、高熱煩渴、神魂發(fā)斑、熱淋澀痛等癥。連翹作為重要的中藥資源，在臨床和中成藥生產(chǎn)中需求量大。然而由于無(wú)序采收和缺乏人工培育，連翹的產(chǎn)量已不能滿足日益增長(zhǎng)的需要。尋找新的可替代資源是解決供需矛盾的途徑之一。藥用植物的不同部位可能會(huì)具有相似的生物活性和化學(xué)成分，因此連翹花也是潛在的藥物資源，值得研究開(kāi)發(fā)。連翹花初春開(kāi)放，并且存在花柱異型，授粉和結(jié)果率低，因此加強(qiáng)對(duì)連翹花化學(xué)成分的研究有利于促進(jìn)其開(kāi)發(fā)利用。目前已有研究將連翹花開(kāi)發(fā)為連翹花茶。但關(guān)于連翹花化學(xué)成分的提取和測(cè)定缺乏研究。微波輔助提取作為一種現(xiàn)代技術(shù)，具有快速、高效、避免成分降解、節(jié)能環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。在中藥有效成分的提取、質(zhì)量控制等方面具有廣闊的應(yīng)用前景?；瘜W(xué)成分指紋圖譜能全面反映中藥的內(nèi)在質(zhì)量，有利于中藥質(zhì)量控制水平的提高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法，該方法能在很短的時(shí)間內(nèi)將連翹花中的多種成分提取出來(lái)并完成化學(xué)成分指紋圖譜分析。
[0004]—種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法，包括以下步驟:
[0005]I)將新采集的連翹花曬干或烘干，粉碎，過(guò)60?120目篩，得到連翹花粉末。
[0006]2)以濃度為30 %?90 %甲醇或30 %-80 %乙醇水溶液作為溶劑，將連翹花粉末與所述溶劑按照質(zhì)量體積比1:10?40混合置于微波提取器中，設(shè)定微波功率400?1000W，溫度50?70°C，提取I?lOmin，取出，放至室溫，用所述溶劑補(bǔ)足至提取前連翹花粉末與溶劑的重量(即和提取前稱(chēng)定的重量一致)，搖勻，取續(xù)濾液，作為分析用樣品溶液。
[0007]3)采用反相高效液相色譜法進(jìn)行圖譜分析:色譜條件:色譜柱為C18鍵合硅膠柱，所述C18鍵合硅膠色譜柱的長(zhǎng)度為250mm，內(nèi)徑4.6mm，填料的粒徑為5μπι;柱溫為20?35°C;流速為1.0OmL/min;進(jìn)樣體積為10?20yL;檢測(cè)波長(zhǎng)為270?280nm;梯度洗脫40min，梯度洗脫條件如下:
[0008]Omin時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 13:87(體積比)
[0009]20min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 15:85(體積比)
[0010]30min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 30:70(體積比)
[0011]38min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 40:60(體積比)
[0012]40min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 100:0 (體積比)
[0013]所述流動(dòng)相A為乙腈，所述流動(dòng)相B為濃度0.05?0.1 % (體積比)的甲酸水溶液、濃度0.03?0.06% (體積比)的磷酸水溶液或濃度0.10?0.50% (體積比)的醋酸水溶液。
[0014]發(fā)明首次公開(kāi)了一種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法，該方法采用優(yōu)化的微波輔助提取法制備樣品，能在短時(shí)間內(nèi)完成;優(yōu)化的高效液相色譜法能在40min內(nèi)實(shí)現(xiàn)20種以上化學(xué)成分的分離。因此本方法是一種快速、高效分析連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的新方法，有利于連翹花化學(xué)成分分析及質(zhì)量控制水平的提高。
【附圖說(shuō)明】
[0015]圖1不同連翹花樣品的高效液相色譜指紋圖譜。
[0016]由圖1可以看出，在40min內(nèi)可以對(duì)連翹花中化學(xué)成分進(jìn)行有效分離，該發(fā)明建立的分析方法適合用于連翹花樣品的化學(xué)成分分析和指紋圖譜建立，分析時(shí)間短，方法穩(wěn)定性好。5份樣品的圖譜中發(fā)現(xiàn)20個(gè)共有色譜峰，各色譜峰峰面積的大小及相互間的比例反應(yīng)了不同連翹花樣品的質(zhì)量差異。相比測(cè)定一個(gè)或幾個(gè)化學(xué)成分的質(zhì)量分析方法，該化學(xué)成分圖譜更能全面反應(yīng)連翹花的質(zhì)量情況。
【具體實(shí)施方式】
[0017](I)將新采集的連翹花曬干或烘干，粉碎，過(guò)80目篩得到連翹花粉末。
[0018](2)精密稱(chēng)取連翹花粉末Ig置具塞圓底燒瓶中，加入30mL濃度為70%甲醇水溶液，具塞，精密稱(chēng)定。置微波輔助提取器中，設(shè)定微波功率400W，溫度600C，提取3min，取出，放至室溫，精密稱(chēng)定，用濃度為70 %的甲醇水溶液補(bǔ)足至提取前稱(chēng)定的連翹花粉末與甲醇溶液的總重量，搖勻，用0.45μπι微孔濾膜濾過(guò)(也可用濾紙濾過(guò))，續(xù)濾液作為分析用樣品溶液。
[0019](3)采用反相高效液相色譜法進(jìn)行分析，色譜條件:色譜柱為C18鍵合硅膠柱(250mm X 4.6mm，5μπι)，流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為含0.05 %甲酸(體積比)的水溶液，進(jìn)樣體積為10此，流速為1.0011117111；[11，檢測(cè)波長(zhǎng)為28011111，柱溫30<€。梯度洗脫40min，條件如下:
[0020]Omin時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 13:87(體積比)
[0021 ] 20min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 15:85(體積比)
[0022]30min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 30:70(體積比)
[0023]38min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 40:60(體積比)
[0024]40min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 100:0(體積比)
[0025](4)結(jié)果見(jiàn)圖1。圖1為分析得到的五個(gè)連翹花樣品的高效液相色譜指紋圖譜。由結(jié)果可以看出，在40min內(nèi)可以對(duì)連翹花中化學(xué)成分進(jìn)行有效分離。5份樣品的圖譜中發(fā)現(xiàn)20個(gè)共有色譜峰，各色譜峰峰面積的大小及相互間的比例反應(yīng)了不同連翹花樣品的質(zhì)量差異。相比測(cè)定一個(gè)或幾個(gè)化學(xué)成分的質(zhì)量分析方法，該化學(xué)成分圖譜更能全面反應(yīng)連翹花的質(zhì)量情況。
[0026]說(shuō)明該方法能對(duì)連翹花中的化學(xué)成分進(jìn)行有效分離，適合用于建立連翹花的化學(xué)指紋圖譜。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種連翹花化學(xué)成分指紋圖譜的快速分析方法，其特征在于步驟如下: 1)將新采集的連翹花曬干或烘干，粉碎，過(guò)60?120目篩，得到連翹花粉末； 2)以濃度為30%?90%甲醇或30%-80%乙醇水溶液作為溶劑，將連翹花粉末與所述溶劑按照質(zhì)量體積比1:10?40混合置于微波提取器中，設(shè)定微波功率400?1000W，溫度50?70°C，提取I?lOmin，取出，放至室溫；用所述溶劑補(bǔ)足至提取前連翹花粉末與溶劑的重量，搖勻，取續(xù)濾液，作為分析用樣品溶液； 3)采用反相高效液相色譜法進(jìn)行圖譜分析:色譜條件:色譜柱為C18鍵合硅膠柱，所述C18鍵合硅膠色譜柱的長(zhǎng)度為250mm，內(nèi)徑4.6mm，填料的粒徑為5μπι;柱溫為20?35°C;流速為1.0OmL/min;進(jìn)樣體積為10?20yL;檢測(cè)波長(zhǎng)為270?280nm;梯度洗脫40min，梯度洗脫條件如下: Omin時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B= 13: 87體積比 20min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B= 15: 85體積比 30min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 30: 70體積比 38min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B = 40: 60體積比 40min時(shí)，流動(dòng)相A:流動(dòng)相B= 100: O體積比 所述流動(dòng)相A為乙腈，所述流動(dòng)相B為濃度0.05?0.1 %的甲酸水溶液、濃度0.03?.0.06%的磷酸水溶液或濃度0.10?0.50%的醋酸水溶液。
【文檔編號(hào)】G01N30/89GK106053704SQ201610305487
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年5月9日
【發(fā)明人】房信勝, 王建華
【申請(qǐng)人】山東農(nóng)業(yè)大學(xué)