一種檢測阿莫西林的試紙的制作方法
【技術領域】
[0001]本實用新型屬于食品安全診斷領域，具體涉及一種用于檢測阿莫西林的試紙。
【背景技術】
[0002]牛奶中阿莫西林(amoxicillin，AMX)的殘留，既導致敏感人群的過敏反應和細菌耐藥性的增強，也會影響奶制品的品質和產量，給乳品加工業(yè)帶來重大經濟損失。阿莫西林殘留是當前歐盟和北美等國家對進口動物性食品的必檢項目之一。歐盟要求在牛奶中阿莫西林的最高限量為4yg/kg。國內常用的方法是微生物法、高效液相色譜法、色/質聯用法、ELISA法等。但這些方法測定的時間、程序復雜且費用較高。
[0003]鑒于目前尚無快速的檢測方法，本實用新型的目的是提供一種可用于快速檢測阿莫西林的試紙以及一種可用于快速檢測阿莫西林的試紙盒，所述試紙和試紙盒具有方便快捷、操作簡單、結果準確等優(yōu)點。
【實用新型內容】
[0004]本實用新型的一個目的是提供一種快速檢測阿莫西林的試紙，本實用新型所述快速檢測阿莫西林的試紙具有方便快捷、操作簡單、結果準確等優(yōu)點，適于臨床快速診斷。
[0005]本實用新型的技術方案是:
[0006]—種用于檢測阿莫西林的試紙，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片I上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接吸水墊3，另一端上方層疊連接樣本墊片4，其特征在于，所述硝酸纖維素膜2中間部位設有檢測線5，所述檢測線5包被有阿莫西林抗原，檢測線5的一邊設有控制線6，所述控制線6包被有羊抗鼠抗體。
[0007]進一步地，上述試紙外還包括一外殼10，只露出樣本墊片4、硝酸纖維素膜2上的檢測線5和控制線6。
[0008]進一步地，所述檢測線5和控制線6為平行設置。
[0009]本實用新型所述試紙結合一酶標板微孔使用，所述微孔含有金標記的阿莫西林抗體，檢驗時將所述試紙的樣本墊片一端插入到所述微孔中，樣本中的阿莫西林抗原首先與微孔中的阿莫西林抗體發(fā)生免疫反應，形成免疫復合物。
[0010]本實用新型所述的試紙條具有高靈敏度和方便檢測的優(yōu)點。
[0011]本實用新型所述的快速檢測阿莫西林的試紙條的工作原理是:
[0012]采用免疫反應原理，通過間接競爭法制備而成。本實用新型所述試紙結合酶標板微孔使用，所述微孔含有金標記的阿莫西林抗體，檢驗時將試紙插入到所述微孔中，樣本中的阿莫西林抗原首先與微孔中的阿莫西林抗體發(fā)生免疫反應，形成免疫復合物。其后免疫復合物隨著樣本在硝基纖維素膜上層析流動，當免疫復合物層析至硝基纖維素膜上的檢測線(T檢測線)時，與預先包被在硝基纖維素膜上的抗阿莫西林抗原發(fā)生反應，如果牛奶中的阿莫西林越多，檢測線上的復合物越少，在能檢到的靈敏度范圍內檢測線不顯色，相反，如果牛奶中沒有阿莫西林，則抗體與檢測線反應，T線顯色。因控制線(C線)包被有羊抗鼠抗體，均會顯色。
[0013]當反應結束后，利用膠體金免疫分析儀(深圳華英生物技術有限公司)將控制線和檢測線的光密度進行分析，并將所分析得到的結果進行運算，從而得到相對光密度值(RI)。然后檢測儀根據已預先設置在檢測儀內的標準曲線對阿莫西林的濃度進行計算并顯示結果，以ng/mL為單位表示。
【附圖說明】
[0014]圖1是本實用新型所述快速檢測阿莫西林的試紙的一種優(yōu)選實施方式的結構示意圖。
[0015]其中，1:支撐墊片，2:硝酸纖維素膜，3:吸水墊，4:樣本墊片，5:檢測線，6:控制線。
[0016]圖2是本實用新型所述快速檢測阿莫西林的試紙盒的一種優(yōu)選實施方式的結構示意圖。
[0017]其中，10:外殼，4:樣本墊片，5:檢測線，6:控制線。
【具體實施方式】
[0018]以下結合附圖對本實用新型所述快速檢測阿莫西林的試紙進行詳細說明，不能理解為是對本實用新型的限制。以下實施例中所使用的材料和試劑除特別說明外，均為普通市售。
[0019]【實施例1】制備快速檢測阿莫西林的試紙
[0020]如圖1所示的試紙結構，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測線5包被有阿莫西林抗原，檢測線一邊設有控制線6，控制線包被有羊抗鼠抗體。
[0021]其中，硝酸纖維素膜2在試紙中用于固定包被抗原，同時也是免疫反應的發(fā)生處；檢測線5是將阿莫西林抗原使用0.01M*PBS、甲醇等緩沖液稀釋到lmg/ml的濃度，取0.7ul/cm劃線于所述硝酸纖維素膜2上，干燥即得；控制線6是將羊抗鼠抗體使用0.01M*PBS、甲醇等緩沖液稀釋到1.2mg/ml的濃度，取0.7ul/cm劃線于所述硝酸纖維素膜2上，干燥即得。
[0022]其中，所述樣品墊片4的原材料為濾血膜，不需要處理直接使用。
[0023]將上述各組成部件按圖1所示結構粘貼在支撐墊片I上，獲得快速檢測阿莫西林的試紙。
[0024]金標微孔的制作方法:
[0025]標記阿莫西林抗體:用0.0lM pH7.4PBS稀釋，將阿莫西林抗體稀釋到lmg/mL，同時加入0.2M碳酸鉀溶液調PH值，10% BSA標記膠體金，制成金標抗體。
[0026]金標微孔:上述取標記好的金標抗體Sul/孔，加入酶標微孔中，干燥即得。
[0027]【實施例2】用本實用新型所述試紙快速檢測阿莫西林
[0028]取本實用新型優(yōu)選的一種快速檢測阿莫西林的試紙，如圖1所示，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜2的另一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測線5包被有阿莫西林抗原，檢測線一邊設有控制線6，控制線包被有羊抗鼠抗體。按以下步驟進行檢測:
[0029]I)取出如實施例1中所述的金標微孔，將微孔放置于干凈桌面上，吸取待測樣品于微孔中充分混勻。
[0030]2)將試紙條(樣品墊一端)插入混勻后的微孔中反應。
[0031]3)判讀，將所述試紙置于膠體金免疫分析儀，(型號HYYQ-OOI，深圳華英生物技術有限公司)中判定結果
[0032]【實施例3】用本實用新型所述試紙盒快速檢測阿莫西林
[0033]取本實用新型優(yōu)選的一種快速檢測阿莫西林的試紙，如圖1所示，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜2的另一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測線5包被有阿莫西林抗原，檢測線一邊設有控制線6，控制線包被有羊抗鼠抗體；如圖2所示所述試紙外還包括一外殼10，只露出樣本墊片4、硝酸纖維素膜2上的檢測線5和控制線6。按以下步驟進行檢測:
[0034]I)取出如實施例1中所述的金標微孔，將微孔放置于干凈桌面上，吸取待測樣品于微孔中充分混勻。
[0035]2)將步驟I獲得的混合液吸到樣品墊上，反應。
[0036]3)判讀，將所述試紙置于膠體金免疫分析儀，(型號HYYQ-OOI，深圳華英生物技術有限公司)中判定結果。
【主權項】
1.一種用于檢測阿莫西林的試紙，包括支撐墊片(I)，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜(2)，所述硝酸纖維素膜(2)的一端上方層疊連接吸水墊(3)，另一端上方層疊連接樣本墊片(4)，其特征在于，所述硝酸纖維素膜(2)中間部位設有檢測線(5)，所述檢測線(5)包被有阿莫西林抗原，檢測線(5)的一邊設有控制線(6)，所述控制線(6)包被有羊抗鼠抗體。2.如權利要求1所述的試紙，其特征在于，所述試紙外還包括一外殼(10)，只露出樣本墊片(4)、硝酸纖維素膜(2)上的檢測線(5)和控制線(6)。3.如權利要求2所述的試紙，其特征在于，所述檢測線(5)與控制線(6)為平行設置。
【專利摘要】本實用新型公開了一種用于檢測阿莫西林的試紙，所述試紙包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測線5包被有阿莫西林抗原，檢測線5一邊設有控制線6，所述控制線6包被有羊抗鼠抗體。
【IPC分類】G01N33/558
【公開號】CN204882565
【申請?zhí)枴緾N201520459045
【發(fā)明人】漆傳鳳, 何詢, 張金超, 石代澤, 楊宏, 趙宇
【申請人】深圳華英生物技術有限公司
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2015年6月30日