Virosaine A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在升高白細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開一種Virosaine A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在升高白細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用,本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域,具體涉及組合物、制備方法及其在制備升高白細(xì)胞藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,本發(fā)明的組合物具有升高白細(xì)胞的作用,具有開發(fā)升高白細(xì)胞藥物的價(jià)值。
【專利說明】
Vi rosa i ne A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在升高 白細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域,具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 白細(xì)胞減少癥是由于原因不明和繼發(fā)于其他疾病之后而引起的疾病,分為原發(fā)性 和繼發(fā)性兩大類。原發(fā)性者原因不明;繼發(fā)性者認(rèn)為其病因可由急性感染,物理、化學(xué)因素, 血液系統(tǒng)疾病,伴脾腫大的疾病,結(jié)締組織疾病,過敏性疾病,遺傳性疾病等,獲得性或原因 不明性粒細(xì)胞減少等。
[0003] 白細(xì)胞減少的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題,從天然產(chǎn)物中 尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物,從而得到高效低毒的潛在藥物有 重要價(jià)值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2012年發(fā)表(Bing-Xin Zhao et al ., 2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的化合物,我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾,獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化 合物IV,并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對(duì)該組合物升高白細(xì)胞活性進(jìn)行了評(píng) 價(jià),其具有升高白細(xì)胞活性。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物,該組合物由化合物III和化合物IV組成,該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為70%和30%。
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物在制備升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明組合物可以 顯著升高失血和化學(xué)物品引起的白細(xì)胞降低。
[0009]以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明,但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制,而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 實(shí)施例1化合物Virosaine A的制備
[0011] 化合物Virosaine A(I)的制備方法參照Bing-Xin Zhao等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Bing-Xin Zhao et al.,2012.Virosaines A and B, Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的方法。
[0013] 實(shí)施例2 Virosaine A的ο-溴乙基衍生物(II)的合成
[0014] 將化合物I(235mg,1.00mmol)溶于20mL苯,向溶液中加入四丁基溴化銨(ΤΒΑΒ) (0.08 8),1,2-二溴乙烷(3.76(^,20.00臟〇1)和51^的50%氫氧化鈉溶液?;旌衔镌?5攝氏 度攪拌Shdh之后將反應(yīng)液倒入冰水中,立即用二氯甲烷萃取兩次,合并有機(jī)相溶液。然后 對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次,再用無水硫酸鈉干燥,最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:1. 〇,v/V),收 集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(26lmg,78% )。
[0015] 4 MMR(500MHz,DMS0-d6)S5.91(s,lH),4.07(s,lH),3.81(s,2H),3.59(s,lH), 3.43(s,2H),3.33(s,lH),2.26(s,lH),1.58(d,J=9.8Hz,3H),1.41(s,2H).
[0016] 13C 匪R(125MHz,DMS0-d6)Sl71.81(s),106.71(s),79.95(s),74.33(s),69.81 (s),66.68(s),44.21(s),35.56(s),33.28(s),25.85(s),21.88(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci4Hi7BrN〇4:342.0341 ;found 342.0343.
[0019] 實(shí)施例3 Virosaine A的0_(四氫吡咯基)乙基衍生物(III)的合成
[0020] 將化合物II(17lmg,0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當(dāng)中,向其中加入無水碳酸鉀(345mg, 2.5mmo 1),碘化鉀(84mg,0.5mmo 1)和吡略燒(1420mg,20mmo 1),混合物加熱回流lh。反應(yīng)結(jié) 束后將反應(yīng)液倒入冰水中,用等量二氯甲烷萃取2次,合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽水 洗滌合并之后的有機(jī)相,再用無水硫酸鈉干燥,減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品 用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:1.5,v/v),收集淡黃色集中洗脫帶即得 到Virosaine A的0-(四氫吡咯基)乙基衍生物(III)的淡黃色膠狀固體(111.6mg,67% )。
[0021] 4 MMR(500MHz,DMS0-d6)S5.92(s,lH),4.11(s,lH),3.66(s,lH),3.53(s,2H), 3.45(d,J=66.9Hz,lH),2.64(s,2H),2.52(s,4H),2.29(s,lH),1.71(s,4H),1.64(s,2H), 1.61(s,lH),1.50(s,2H).
[0022] 13C NMR( 125MHz,DMS0-d6)Sl71.83(s), 106.73(s),79.97(s),74.35(s),66.72((1, J = 9.2Hz),54.42(d ,J = 17.1Hz),44.23(s),35.58(s),25.86(s),25.23(s),21.90(s).
[0023] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Ci8H25N2〇4:333.1814;found:333.1811。
[0025] 實(shí)施例4 Virosaine A的0_(嗎啉基)乙基衍生物的合成
[0026] 將化合物II(17lmg,0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當(dāng)中,向其中加入無水碳酸鉀(345mg, 2 · 5mmo 1),碘化鉀(84mg,0 · 5mmo 1)和嗎啉(1742mg,20mmo 1),混合物加熱回流lh。反應(yīng)結(jié)束 后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中,用等量二氯甲烷萃取三次,合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機(jī)相,再用無水硫酸鈉干燥,減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100: l.〇,v/v),收集黃色集中洗脫帶即得 到Virosaine A的0-(嗎啉基)乙基衍生物的黃色固體(IV) (125.3mg,72% )。
[0027] 咕 MMR(500MHz,DMS0-d6)S5.95(s,lH),4· 12(s,lH),3.68(s,lH),3.63((1, J = 8·4Ηζ,1Η),3.61(s,4H),3.57-3.26(m,3H),2.61(s,2H),2.56(s,2H),2.51-2.03(m,5H), 1.70(d ,J = 3.1Hz,lH),1.65(d ,J = 25.6Hz,lH),1.52(s,2H).
[0028] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)Sl71.85(s),106.73(s),79.95(s),74.34(s),66.75(t, J=4.6Hz),54.46(s),52.93(s),44.22(s),35.55(s),25.88(s),21.89(s).
[0029] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Ci8H25N2〇5:349.1763;found:349.1761。
[0031]實(shí)施例5組合物升高白細(xì)胞活性 [0032] 一、組合物對(duì)失血小鼠的治療作用
[0033] 對(duì)失血小鼠的影響ICR小鼠50只,罕d各半,均分成5組(η = 10)。除生理鹽水組外, 其它組每只小鼠從眼眶靜脈放血0.5ml,24h后再取血測全部各組白細(xì)胞指標(biāo),然后連續(xù)灌 胃給藥1周,末次給藥lh后,從眼眶靜脈叢取血用F-800全血小板分析儀測白細(xì)胞指標(biāo)。 [0034] 組合物的制備:將研磨之后過200目網(wǎng)的70mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的30mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合物, 使用時(shí)用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0035]表1組合物對(duì)因失血所致白細(xì)胞減少的治療作用(109/L)
[0037] 與模型組比較:*ρ〈0·05
[0038] 結(jié)果表明,放血小鼠經(jīng)服用組合物治療7天后,組合物給藥組與模型組比較,白細(xì) 胞顯著高于模型組,接近生理鹽水組。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0039] 二、組合物對(duì)環(huán)磷酰胺致白細(xì)胞減少的治療作用
[0040] 對(duì)小鼠骨髓造血功能損傷的防治作用ICR小鼠50只,??用,均分成5組(η=10), 即生理鹽水組、造模組、組合物1.2mg/kg組、化合物III 1.2mg/kg組和化合物IV 1.2mg/kg 組,口服給藥,每天1次。第0、5、10日除生理鹽水組外,其它各組小鼠分別腹腔注射環(huán)磷酸胺 80mg/kg,然后繼續(xù)給藥3天。于末次給藥后lh,從眼眶靜脈叢取血,測白細(xì)胞。
[0041] 表2組合物對(duì)環(huán)磷酰胺所致白細(xì)胞減少的治療作用(109/L)
[0042]
[0043] 與模型組比較:*ρ〈0·05
[0044] 結(jié)果表明,與生理鹽水組比較,環(huán)磷酸胺能使小鼠骨髓損傷,造成外周血細(xì)胞下 降,組合物組與模型組比較,均可明顯對(duì)抗環(huán)磷酸胺所致小鼠白細(xì)胞下降。而化合物III和 化合物IV不具有此活性。
[0045]三、組合物對(duì)苯所致白細(xì)胞減少的治療作用
[0046] 對(duì)再生障礙性貧血小鼠的影響:昆明種小鼠50只,罕c?兼用,均分成5組(η = 10),除 生理鹽水組外,其它組小鼠皮下注射苯0.5ml/kg,連續(xù)12天,造模的當(dāng)日,同時(shí)口服給藥,每 天1次,共18天,末次給藥后lh,眼眶靜脈叢取血,測白細(xì)胞。
[0047] 表3組合物對(duì)苯所致血細(xì)胞減少的治療作用(109/L)
[0048]
[0049] 與模型組比較:*p〈0.05
[0050] 結(jié)果表明,組合物組與模型組比較,可明顯對(duì)抗苯所致再生障礙性貧血小鼠白細(xì) 胞的下降。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0051] 結(jié)論:組合物能夠顯著升高白細(xì)胞,可以用來制備抗白細(xì)胞降低藥物。而化合物 III和化合物IV不具有顯著升高白細(xì)胞的活性,不可以用來制備抗白細(xì)胞降低藥物。
[0052] 實(shí)施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0053] 取2克組合物,加入制備片劑的常規(guī)輔料18克,混勻,常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0054] 實(shí)施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0055] 取2克組合物,加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克,混勻,裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物,其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成,該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為70%和30%,2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法,其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為70%和30%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述組合物升 高失血所致白細(xì)胞的降低。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述組合物升 高化學(xué)品所致白細(xì)胞的降低。6. 如權(quán)利要求5所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述化學(xué)品為 環(huán)憐酷胺。7. 如權(quán)利要求5所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述化學(xué)品為 苯D
【文檔編號(hào)】A61P7/00GK105832742SQ201610277881
【公開日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2016年4月28日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請(qǐng)人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司