Virosaine A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在抗缺氧藥物中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域,具體涉及組合物及其在抗缺氧藥物上的用途。本發(fā)明公開(kāi)了一種組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,本發(fā)明的組合物具有抗缺氧作用,具有開(kāi)發(fā)抗缺氧藥物的價(jià)值。
【專利說(shuō)明】
Vi rosa i ne A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在抗缺 氧藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域,具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 氧是人類及許多生物賴以生存的重要條件。低氧(Hypoxia)是指機(jī)體生命活動(dòng)所 需的氧不能得到充足的供給。氧和低氧是生命活動(dòng)最重要的關(guān)鍵因素,是生命科學(xué)基本理 論的重要課題。低氧的形成可分為三類:第一類是外界環(huán)境氧含量降低,使正常生理活動(dòng)過(guò) 程不能攝取足夠氧,如高原和航空缺氧;第二類是指因疾病等導(dǎo)致外界正常氧量不能充分 到達(dá)機(jī)體內(nèi),造成心、腦和呼吸系統(tǒng)等的缺氧;第三類是機(jī)體活動(dòng)所需氧消耗量,超過(guò)了生 理動(dòng)員能力,造成相對(duì)氧供給不足,常見(jiàn)于劇烈運(yùn)動(dòng)和超限量勞動(dòng)。長(zhǎng)期低氧是危害人體健 康的重要隱患,嚴(yán)重者可危及生命。因此,低氧造成心、腦和呼吸系統(tǒng)等損傷已成為21世紀(jì) 醫(yī)學(xué)界急待解決的主要問(wèn)題之一。
[0003] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物,從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2012年發(fā)表(Bing-Xin Zhao et al ., 2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的化合物,我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾,獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化 合物IV,并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對(duì)該組合物的抗缺氧活性進(jìn)行了評(píng)價(jià), 其具有抗缺氧活性。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明公開(kāi)了一個(gè)新的組合物,該組合物由化合物III和化合物IV組成,該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為55%和45%。
[0007] 本發(fā)明公開(kāi)的化合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,本發(fā)明的組合物具有較好的抗缺氧作用。本發(fā)明的藥學(xué)上可接 受的鹽具有同樣的藥效。
[0009] 以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明,但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制,而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 實(shí)施例1化合物Virosaine A的制備
[0011] 化合物Virosaine A(I)的制備方法參照Bing-Xin Zhao等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Bing-Xin Zhao et al.,2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的方法 D
[0013] 實(shí)施例2 Virosaine A的0-溴乙基衍生物(II)的合成
[0014] 將化合物I(235mg,1.00mmol)溶于20mL苯,向溶液中加入四丁基溴化銨(TBAB) (0.088),1,2-二溴乙烷(3.76(^,20.00臟〇1)和51^的50%氫氧化鈉溶液?;旌衔镌?5攝氏 度攪拌Shdh之后將反應(yīng)液倒入冰水中,立即用二氯甲烷萃取兩次,合并有機(jī)相溶液。然后 對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次,再用無(wú)水硫酸鈉干燥,最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:1. 〇,v/V),收 集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(26lmg,78% )。
[0015] 4 MMR(500MHz,DMS0-d6)S5.91(s,lH),4.07(s,lH),3.81(s,2H),3.59(s,lH), 3.43(s,2H),3.33(s,lH),2.26(s,lH),1.58(d,J=9.8Hz,3H),1.41(s,2H).
[0016] 13C 匪R(125MHz,DMS0-d6)Sl71.81(s),106.71(s),79.95(s),74.33(s),69.81 (s),66.68(s),44.21(s),35.56(s),33.28(s),25.85(s),21.88(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci4Hi7BrN〇4:342.0341 ;found 342.0343.
[0019] 實(shí)施例3 Virosaine A的0_(四氫吡咯基)乙基衍生物(III)的合成
[0020] 將化合物II(17lmg,0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當(dāng)中,向其中加入無(wú)水碳酸鉀(345mg, 2.5mmo 1),碘化鉀(84mg,0.5mmo 1)和吡略燒(1420mg,20mmo 1),混合物加熱回流lh。反應(yīng)結(jié) 束后將反應(yīng)液倒入冰水中,用等量二氯甲烷萃取2次,合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽水 洗滌合并之后的有機(jī)相,再用無(wú)水硫酸鈉干燥,減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品 用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:1.5,v/v),收集淡黃色集中洗脫帶即得 到Virosaine A的0-(四氫吡咯基)乙基衍生物(III)的淡黃色膠狀固體(111.6mg,67% )。
[0021] MMR(500MHz,DMS0-d6)S5.92(s,lH),4.11(s,lH),3.66(s,lH),3.53(s,2H), 3.45(d,J=66.9Hz,lH),2.64(s,2H),2.52(s,4H),2.29(s,lH),1.71(s,4H),1.64(s,2H), 1.61(s,lH),1.50(s,2H).
[0022] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)Sl71.83(s),106.73(s),79.97(s),74.35(s),66.72(d, J = 9.2Hz),54.42(d ,J = 17.1Hz),44.23(s),35.58(s),25.86(s),25.23(s),21.90(s).
[0023] HRMS(ESI):m/z[M+H].calcd for Ci8H25N2〇4:333.1814;found:333.1811。
[0025] 實(shí)施例4 Virosaine A的0_(嗎啉基)乙基衍生物的合成
[0026] 將化合物II(17lmg,0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當(dāng)中,向其中加入無(wú)水碳酸鉀(345mg, 2 ? 5mmo 1),碘化鉀(84mg,0 ? 5mmo 1)和嗎啉(1742mg,20mmo 1),混合物加熱回流lh。反應(yīng)結(jié)束 后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中,用等量二氯甲烷萃取三次,合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機(jī)相,再用無(wú)水硫酸鈉干燥,減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100: l.〇,v/v),收集黃色集中洗脫帶即得 到Virosaine A的0-(嗎啉基)乙基衍生物的黃色固體(IV) (125.3mg,72% )。
[0027] 咕 MMR(500MHz,DMS0-d6)S5.95(s,lH),4.12(s,lH),3.68(s,lH),3.63(d,J= 8.4Hz,lH),3.61(s,4H),3.57-3.26(m,3H),2.61(s,2H),2.56(s,2H),2.51-2.03(m,5H), 1.70(d,J = 3.1Hz,lH),1.65(d,J = 25.6Hz,lH),1.52(s,2H).
[0028] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)Sl71.85(s),106.73(s),79.95(s),74.34(s),66.75(t, J=4.6Hz),54.46(s),52.93(s),44.22(s),35.55(s),25.88(s),21.89(s).
[0029] HRMS(ESI):m/z[M+H].calcd for Ci8H25N2〇5:349.1763;found:349.1761。
[0031]實(shí)施例5小鼠特異性心肌缺氧實(shí)驗(yàn) [0032] 1、方法:
[0033] 組合物的制備:將研磨之后過(guò)200目網(wǎng)的55mg化合物III的粉末和研磨之后過(guò)200 目網(wǎng)的45mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合物, 使用時(shí)用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0034] 50只昆明小鼠,體重(20±2)g。隨機(jī)分為5組,灌胃給藥。前2組給予0.3%羧甲基纖 維素鈉(CMC-Na)溶液,后3組分貝給予化合物III、化合物IV和組合物,50min后,除第1組外, 均腹腔注射異丙腎上腺素(IS0)15mg ? Kg-^lSmin后,將小鼠放入常壓缺氧裝置中,記錄小 鼠死亡時(shí)間及耗氧量。
[0035]結(jié)果:
[0036]異丙腎上腺素可通過(guò)興奮心臟0受體,使心肌耗氧量增加。本實(shí)驗(yàn)顯示,與溶媒對(duì) 照組相比,組合物O.OlOg ? Kg-1能顯著對(duì)抗異丙腎上腺素(ISO)導(dǎo)致的心肌耗氧量增加(P〈 0.01 ),同時(shí)延長(zhǎng)小鼠缺氧密閉狀態(tài)下的存活時(shí)間(P〈〇. 01 ),結(jié)果見(jiàn)表1。而化合物III和化 合物IV均不具備此作用。
[0037]表1待試物對(duì)異丙腎上腺素致特異性缺氧小鼠的影響(x,n = 10)
[0040] 注^^〈O.01,與對(duì)照組比較,2)P〈0.01,與異丙腎上腺素組比較。
[0041] 實(shí)施例6小鼠常壓室息性缺氧實(shí)驗(yàn)
[0042] 1、方法:
[0043] 40只昆明小鼠,體重(20±2)g。隨機(jī)分為4組,灌胃給藥。第1組給予0.3%羧甲基纖 維素鈉(CMC-Na)溶液,后3組分別給予含組合物、化合物III和化合物IV的CMC-Na溶液,濃度 為O.OlOg ? Kg<。給藥50min后,置于廣口瓶中并蓋緊瓶塞(瓶?jī)?nèi)放置5g鈉石灰)。以呼吸停止 為標(biāo)志,記錄小鼠存活時(shí)間。
[0044] 2、結(jié)果:
[0045]與溶媒對(duì)照組相比,組合物的O.OlOg ? Kg<使小鼠在常壓密閉條件下的存活時(shí)間 延長(zhǎng)了47.16%,差異具有顯著性(P〈0.01),而化合物III和化合物IV均未能使小鼠在常壓 密閉條件下的存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)。
[0046]實(shí)施例7小鼠減壓缺氧實(shí)驗(yàn) [0047] 1、方法:
[0048] 40只昆明小鼠,體重(20±2)g。隨機(jī)分為4組,灌胃給藥。給藥組分別給予組合物、 化合物III和化合物IV,濃度為0.010g ? Kg<,對(duì)照組給予0.3 % CMC-Na溶液,灌胃體積均為 2ml ? Kg<。50min后,各給藥組和對(duì)照組各取5只,放入減壓裝置中,在26.7Kpa(相當(dāng)于海拔 約10000m)時(shí)停止減壓,保持此壓力不變,待對(duì)照組動(dòng)物死亡80 %時(shí),立即停止減壓,緩緩放 入空氣,取出動(dòng)物,記錄各組死亡及存活數(shù)目,重復(fù)操作至實(shí)驗(yàn)完成。
[0049] 2、結(jié)果:
[0050]組合物0.010g ? Kg<使小鼠在減壓缺氧條件下的存活率由對(duì)照組的20%提高至 50%,差異具有顯著性(P〈0.05);而化合物III和化合物IV對(duì)小鼠在減壓缺氧條件下的存活 率為20%,均未有提高。
[0051]結(jié)論:組合物可顯著提高異丙腎上腺素致特異性缺氧的存活時(shí)間,室息性缺氧和 急性減壓缺氧小鼠的存活率,提供了組合物在制備抗缺氧藥物中的用途。而化合物III和化 合物IV均不具有上述活性。
[0052]實(shí)施例8本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0053]取2克組合物,加入制備片劑的常規(guī)輔料18克,混勻,常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0054] 實(shí)施例9本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0055] 取2克組合物,加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克,混勻,裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物,其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成,該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為55%和45%,2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法,其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為55 %和45 %充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在抗缺氧藥物中的應(yīng)用。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物在抗缺氧藥物中的應(yīng)用,其特征在于:所述缺氧為異丙 腎上腺素致特異性缺氧。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物在抗缺氧藥物中的應(yīng)用,其特征在于:所述缺氧為常壓 室息性缺氧。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物在抗缺氧藥物中的應(yīng)用,其特征在于:所述缺氧為減壓 缺氧。
【文檔編號(hào)】A61K31/439GK105853438SQ201610283397
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年4月28日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請(qǐng)人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司