本發(fā)明涉及一種分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子及其核磁共振造影劑用途，該錳的六氰金屬絡合物納米粒子可以用作核磁共振造影劑原料藥。

背景技術：

本發(fā)明涉及一種分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子及其核磁共振造影劑用途，該錳的六氰金屬絡合物納米粒子可以用作核磁共振造影劑原料藥。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明涉及一種分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子及其核磁共振造影劑用途，該錳的六氰金屬絡合物納米粒子可以用作核磁共振造影劑原料藥。

1、分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20化合物結晶的制備，主要包括以下步驟：

以六氰金屬絡合離子[M(CN)₆]^n-(M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru，n＝3-4)與二價錳離子Mn ²⁺通過混合反應，得到分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20化合物的結晶。

其中六氰金屬絡合離子[M(CN)₆]^n-(M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru，n＝3-4)，溶解在0.1％-20％(重量)的檸檬酸水溶液中稱為A1、溶解在0.1％-20％(重量)酒石酸水溶液中稱為A2、溶解于乳酸∶水的體積比1∶1-20的乳酸水溶液中稱為A3；

其中二價錳離子Mn ²⁺，溶解在0.1％-20％(重量)的檸檬酸水溶液中稱為B1、溶解在0.1％-20％(重量)酒石酸水溶液中稱為B2、溶解于乳酸∶水的體積比1∶1-20的乳酸水溶液中稱為B3；

將A 1倒入B 1中得C 1，或將A 1倒入B 2中得C 2，或將A 1倒入B 3中得C 3；

將A 2倒入B 1中得D 1，或將A 2倒入B 2中得D 2，或將A 2倒入B 3中得D 3；

將A 3倒入B 1中得E 1，或將A 3倒入B 2中得E 1，或將A 3倒入B 3中得E 3。

上述混合方式得到C I、C 2、C 3、D 1、D 2、D 3、E 1、E 2、E 3結晶，其分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20，結晶顆粒粒徑在0.2-120微米之間，其中一種結晶的粉末X射線衍射圖見圖1，另一種種結晶的粉末X射線衍射圖見圖2，但不限于這兩種結晶及其粉末X射線衍射圖。

2、分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子的制備主要包括以下步驟：

將分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20化合物結晶溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮、煙酸、依地酸二鈉、半胱氨酸的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮、煙酸、依地酸二鈉的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮、煙酸、半胱氨酸的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮、依地酸二鈉、半胱氨酸的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮、煙酸的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮、依地酸二鈉的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮、半胱氨酸的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、聚乙烯吡咯烷酮的水溶液中；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、煙酸、依地酸二鈉、半胱氨酸的水溶液中，攪拌至溶液透明后，再加入聚乙烯吡咯烷酮后繼續(xù)攪拌至溶液透明；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、煙酸、依地酸二鈉、的水溶液中，攪拌至溶液透明后，再加入聚乙烯吡咯烷酮后繼續(xù)攪拌至溶液透明；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、煙酸、半胱氨酸的水溶液中，攪拌至溶液透明后，再加入聚乙烯吡咯烷酮后繼續(xù)攪拌至溶液透明；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、依地酸二鈉、半胱氨酸的水溶液中，攪拌至溶液透明后，再加入聚乙烯吡咯烷酮后繼續(xù)攪拌至溶液透明；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、煙酸的水溶液中，攪拌至溶液透明后，再加入聚乙烯吡咯烷酮后繼續(xù)攪拌至溶液透明；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、依地酸二鈉的水溶液中，攪拌至溶液透明后，再加入聚乙烯吡咯烷酮后繼續(xù)攪拌至溶液透明；或溶蝕在配方為甘露醇、葡甲胺、半胱氨酸的水溶液中，攪拌至溶液透明后，再加入聚乙烯吡咯烷酮后繼續(xù)攪拌至溶液透明；上述過程中，聚乙烯吡咯烷酮可用殼聚糖替代，或可用右旋糖酐替代，或可用羧基右旋糖酐替代，或可用葡聚糖替代，或可用羧甲基葡聚糖替代，或可用聚乙二醇替代，各成分用量為甘露醇為2-20％(重量)， 葡甲胺為2％-20％(重量)，煙酸為0.01-5.0％(重量)，依地酸二鈉為0.01-5.0％(重量)，半胱氨酸為0.01％-5.0％(重量)，聚乙烯吡咯烷酮為2％-20％(重量)，殼聚糖為1.0％-15％(重量)，右旋糖酐為1.0％-15％(重量)，羧基右旋糖酐為1.0％-15％(重量)，葡聚糖為1.0％-15％(重量)，羧甲基葡聚糖為1.0％-15％(重量)，聚乙二醇為1.0％-20％(重量)，上述過程中，各成分全部溶解或溶蝕后繼續(xù)攪拌0.5-36小時，形成穩(wěn)定透明的分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子及其納米粒子溶液，其中納米粒子在PH在3.5-12.6之間穩(wěn)定，納米粒子大小在0.1nm-200nm之間，納米粒子溶液二價錳離子含量在0.1-400mM之間。

3、分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液，其核磁共振磁豫率測試結果為r1＝2-80。其中一種結晶的納米粒子溶液磁豫率r1＝3.7169，見圖4；核磁共振T1加權成像成像結果，見圖5。

4、分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子造影劑的制備主要包括以下步驟：

將所制備的分子式為分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液配制成含錳2-50mM的濃度，經過0.22μm微孔濾膜無菌過濾，無菌分裝到西林瓶中，即制得液態(tài)錳的六氰金屬絡合物納米核磁共振造影劑，可供靜脈注射使用；

將所制備的分子式為分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液配制成含錳2-50mM的濃度，經過0.22μm微孔濾膜無菌過濾，所得濾液按無菌噴霧冷凍真空干燥或真空冷凍干燥方法處理，得到干粉，無菌分裝到西林瓶中，即制得固態(tài)錳的六氰金屬絡合物納米核磁共振造影劑，使用前用注射用水或注射用生理鹽水稀釋，配成含錳2-50mM的濃度，可供靜脈注射使用。

5、分子式為分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子核磁共振造影劑用于大白鼠肝臟核磁共振造影實驗結果表明：

T2造影圖像顯著減弱，信號增強值比空白信號值相對降低65％以上，見圖9、圖10、圖11、圖12；造影實驗后的大白鼠飼養(yǎng)2周，期間其外觀和行為未見異常。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實施例1所制備的分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝14；和n＝0，1-20化合物結晶中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_m，其中n＝0-13的化合物結晶的粉末x-射線衍射圖。

圖2是本發(fā)明實施例2所制備的分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH4，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_m，其中n＝0-13的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液透射電鏡圖，納米粒子粒徑在1-10nm之間。

圖3是本發(fā)明實施例2所制備的分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液透射電子顯微鏡元素分析能譜圖，測得錳和鐵的比例為1.5∶1。

圖4是本發(fā)明實施例4中分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液核磁共振弛豫率r1測試結果，磁豫率r1＝3.7169。

圖5是本發(fā)明實施例4中分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液核磁共振T1加權成像結果。

圖6是本發(fā)明實施例5所制備的分子式AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物結晶中分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的錳的六氰金屬絡合物結晶的粉末X-射線衍射圖。

圖7是本發(fā)明實施例6所制備的分子式AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液中分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液，經透射電鏡觀察到的納米粒子，納米粒子粒徑在40-70nm之間。

圖8是本發(fā)明實施例6所制備的分子式AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝Li，Na，K，NH₄，或Tl；M＝Cr，Mn，F(xiàn)e，Co或Ru；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡 合物納米粒子溶液中分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液透射電子顯微鏡元素分析能譜圖，測得鉀∶錳∶鐵的比例為1∶1∶1。

圖9是本發(fā)明實施例8中，按1ml/300g的劑量通過尾靜脈注射到大白鼠體內之前，做核磁共振造影，得注射前的大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值。

圖10是本發(fā)明實施例8中，按1ml/300g的劑量通過尾靜脈注射到大白鼠體內，做核磁共振造影，得注射后20分鐘時大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值。

圖11是本發(fā)明實施例9中，按1ml/300g的劑量通過尾靜脈注射到大白鼠體內之前，做核磁共振造影，得注射前的大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值。

圖12是本發(fā)明實施例9中，按1ml/300g的劑量通過尾靜脈注射到大白鼠體內，做核磁共振造影，得注射后20分鐘時大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值。

具體實施方式

實施例1：

分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝K；M＝Fe；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20錳的六氰金屬絡合物結晶中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的鐵氰化錳結晶的制備

稱取843毫克K₃[Fe(CN)₆]放入100毫升燒杯中，加入10％檸檬酸水溶液25ml完全溶解，簡稱樣A；稱取495毫克MnCl₂·4H₂O放入100毫升燒瓶中，加入乳酸∶水的體積比1∶10的乳酸水溶液25ml完全溶解，簡稱樣B；將盛A樣倒入B樣的燒杯中，用封口膠封住燒杯口，在避光下室溫靜置12小時后得到分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝K；M＝Fe；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物結晶中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的化合物結晶，其粉末X射線衍射圖見圖1。

實施例2：

分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝K；M＝Fe；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物納米粒子中分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的錳的六氰金屬絡合物納米粒子的制備

稱取6.00g甘露醇、葡甲胺10.00g、煙酸1.33g、依地酸二鈉1.29g、半胱氨酸0.31g于100ml燒杯中，加水至70ml，磁力攪拌，至完全溶解，簡稱樣A。

再稱取聚乙烯吡咯烷酮10g分次加入樣A中，不斷攪拌，并逐步加熱至60℃，維持60℃至聚乙烯吡咯烷酮完全溶解，溶液呈微黃透明，然后再冷卻至室溫，簡稱樣B。

稱取分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的化合物鐵氰化錳結晶0.224g加入到樣B中，不斷攪拌，至該結晶完全溶蝕，溶液呈棕色透明，繼續(xù)攪拌12小時，得分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液，簡稱樣C。測得樣C的PH值為11.0；透射電子顯微鏡觀察到樣C納米粒子在溶液中均衡分布，粒徑在1-10nm，見圖2；透射電子顯微鏡元素分析能譜測得樣C錳和鐵的比例為1.5∶1，見圖3；

實施例3：

將實施例2中所制備的分子式為Mn₃[Fe(CN)₆]₂(H₂O)_n，其中n＝0-13的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液樣C配制成含錳10mM的濃度，經過0.22μm微孔濾膜無菌過濾，無菌分裝到西林瓶中，即制得液態(tài)的錳的六氰金屬絡合物納米核磁共振造影劑，簡稱樣D，可供靜脈注射使用；

實施例4：

在0.55T核磁共振成像儀中測得實施例2中樣C弛豫率r₁為3.7169mM^-1*s^-1，見圖4；在0.55T核磁共振成像儀中測得樣C的T1加權成像結果，層次區(qū)分清楚，見圖5。

實施例3測試結果說明實施例2中樣C弛豫率r1為3.7169mM^-1*s^-1，可用作核磁共振造影劑原料藥。

實施例5：

分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝K；M＝Fe；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物結晶中分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的鐵氰化錳鉀結晶的制備

稱取1.0561克K₄[Fe(CN)₆]·3(H₂O)放入100毫升燒杯中，加入酸∶水的體積比1∶10的乳酸水溶液25ml完全溶解，簡稱樣A；稱取0.9896克MnCl₂.4H₂O放入100毫升燒杯中，加入乳酸∶水的體積比1∶10的乳酸水溶液25ml完全溶解，簡稱樣B；將A樣倒入B樣的燒杯中，用封口膠封住燒杯口，在避光下室溫靜置12小時后產生大量微細結晶，用0.22-0.45μm微孔濾膜過濾，用去離子水清洗結晶至濾液PH無變化，將清洗后的結晶在50℃下恒溫干燥至恒重，得到分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的鐵氰化錳鉀結晶，其粉末X射線衍射圖見圖6。

實施例6：

分子式為AxMny[M(CN)₆]z·(H₂O)n，其中A＝K；M＝Fe；x＝0-2；y＝1-4；z＝1-4；和n＝0，1-20的錳的六氰金屬絡合物中分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的錳的六氰金屬絡合物納米粒子的制備

稱取8.50g甘露醇，加水至65ml，再加入葡甲胺6.00g、煙酸0.0109g、依地酸二鈉0.0242g、 半胱氨酸0.0180g、聚乙烯吡咯烷酮9.00g，不斷攪拌，并逐步加熱至60℃，維持60℃至聚乙烯吡咯烷酮完全溶解，溶液呈微黃透明，然后再冷卻至室溫，簡稱樣A。

稱取分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的鐵氰化錳結晶0.3734g加入到樣A中，不斷攪拌，至該結晶完全溶蝕，溶液呈棕色透明，繼續(xù)攪拌12小時，得分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液，簡稱樣B。測得樣B的PH值為9.0；透射電子顯微鏡觀察到樣B中納米粒子在溶液中均衡分布，粒徑在40-70nm范圍，見圖7；透射電子顯微鏡元素分析能譜測得樣B中鉀∶錳∶鐵的原子比約為1∶1∶1，見圖8；

實施例7：

將實施例6中所制備的分子式為KMn[Fe(CN)₆](H₂O)_n，其中n＝0-4的錳的六氰金屬絡合物納米粒子溶液樣B配制成含錳10mM的濃度，經過0.22μm微孔濾膜無菌過濾，無菌分裝到西林瓶中，即制得液態(tài)的錳的六氰金屬絡合物納米核磁共振造影劑，簡稱樣C，可供靜脈注射使用；

實施例8：

將實施例3中所得到的樣D按1ml/300g的劑量通過尾靜脈注射到大白鼠體內，做核磁共振造影實驗，注射樣D前測得大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值，見圖9；注射樣D后20分鐘時大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值，見圖10。

注射樣D后的大白鼠肝臟核磁共振造影圖像顯著變暗，信號值比注射樣D前相對降低70％以上；注射樣D后的大白鼠飼養(yǎng)2周，期間大白鼠外觀及行為未發(fā)現(xiàn)異常。

實施例9：

將實施例7中所得到的樣C按1ml/300g的劑量通過尾靜脈注射到大白鼠體內，做核磁共振造影實驗，注射樣C前測得大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值，見圖11；注射樣C后20分鐘時大白鼠肝臟的核磁共振造影T2圖像和信號值，見圖12。

注射樣C后的大白鼠肝臟核磁共振造影圖像顯著變暗，信號值比注射樣C前相對降低65％以上；注射樣C后的大白鼠飼養(yǎng)2周，期間大白鼠外觀及行為未發(fā)現(xiàn)異常。