本發(fā)明屬于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的應(yīng)用，具體涉及煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

炎性痛是由創(chuàng)傷、細(xì)菌或病毒感染以及外科手術(shù)等引起的外周組織損傷導(dǎo)致的炎癥引起，主要特征是受損組織對(duì)熱刺激和機(jī)械刺激的敏感性增加。炎性疼痛病程長且治愈困難，患者在精神上、身心上遭受極大的痛苦，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量，并給患者帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。由于其病因多樣，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜而導(dǎo)致發(fā)病率高，難治愈已經(jīng)成為臨床醫(yī)療最具挑戰(zhàn)的難題之一。目前，藥物治療是控制癥狀的最常用也是最主要的手段。按照其作用特點(diǎn)和機(jī)制可以分為中樞神經(jīng)系統(tǒng)鎮(zhèn)痛藥和解熱抗炎鎮(zhèn)痛藥兩大類。中樞神經(jīng)系統(tǒng)鎮(zhèn)痛藥的代表是阿片類受體的激動(dòng)劑，其代表藥為嗎啡，但由于成癮性等副作用限制了其在臨床上的應(yīng)用。解熱抗炎鎮(zhèn)痛藥，又稱為非甾體類抗炎藥，具有抗炎、解熱作用，其中鎮(zhèn)痛作用主要部位在外周，并且作用機(jī)制主要是通過阻斷體內(nèi)環(huán)氧合酶(cox)，從而抑制前列腺素(prostaglandin，pg)的生物合成，減弱炎癥反應(yīng)和疼痛作用的發(fā)揮，其代表為阿司匹林、吲哚美辛等。但由于非甾體抗炎藥對(duì)炎性痛效果不明顯，副作用較多限制了其臨床應(yīng)用。因此，研究炎性疼痛產(chǎn)生的病因和病理，尋找和開發(fā)新型鎮(zhèn)痛藥，不僅成為疼痛醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)，而且對(duì)于最終解決這一頑癥，提高罹患人群的生活質(zhì)量具有重要的臨床意義和社會(huì)意義。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(縮寫為nad⁺)，在哺乳動(dòng)物體內(nèi)存在氧化型(nad⁺)和還原型(nadh)兩種狀態(tài)，氧化型(nad⁺)在260nm處具有最大紫外吸收光譜，通過各種脫氨酶，從底物中接受一個(gè)氫原子和一個(gè)電子，變成還原型(nadh)，在340nm處有最大吸收。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸參與細(xì)胞物質(zhì)代謝、能量合成、細(xì)胞dna修復(fù)等多種生理活動(dòng)，對(duì)機(jī)體免疫能力有重要作用。在健康狀態(tài)下，人體內(nèi)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度穩(wěn)定，維持各項(xiàng)細(xì)胞正常功能。體內(nèi)的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度決定了細(xì)胞衰老的過程和程度，濃度下降會(huì)加速細(xì)胞衰老的過程。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸主要存在于酵母細(xì)胞線粒體中，目前通常選用破壁和提純的方法制備煙酰胺腺嘌呤二核苷酸。

本發(fā)明人首次發(fā)現(xiàn)：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對(duì)炎性痛具有一定的鎮(zhèn)痛作用，基于上述發(fā)現(xiàn)經(jīng)過進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)從而完成本發(fā)明。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物以及作為活性成分制備治療炎性痛藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物中的應(yīng)用，所述的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的結(jié)構(gòu)分子式為：

所述的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸作為活性成分在制備治療炎性痛藥物中的應(yīng)用。

所述的炎性痛為福爾馬林或完全弗氏佐劑誘導(dǎo)的炎癥疼痛。

在制備治療炎性痛藥物時(shí)，所述的藥物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、混懸劑、糖漿劑、腸溶制劑或注射劑。

所述的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸作為注射劑制備治療炎性痛藥物時(shí)，將煙酰胺腺嘌呤二核苷酸溶解于生理鹽水中，采用鞘內(nèi)注射、皮下注射、腹腔注射、靜脈注射，濃度為8mmol/l到800mmol/l。

進(jìn)一步地，采用鞘內(nèi)注射的注射量為0.1ul/g-1ul/g；采用皮下注射的注射量為1ul/g-5ul/g；采用腹腔注射的注射量為1ul/g-200ul/g；采用靜脈注射的注射量為1ul/g-100ul/g。

本發(fā)明中nad⁺通過依賴nad⁺的去乙?；竤irt1和sirt2參與調(diào)節(jié)福爾馬林和完全弗氏佐劑(cfa)誘發(fā)的炎癥痛，而sirt1和sirt2通過不同機(jī)制參與nad⁺對(duì)炎癥痛的抑制作用，從而達(dá)到對(duì)炎性痛具有鎮(zhèn)痛的作用。

附圖說明

圖1為鞘內(nèi)注射煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對(duì)福爾馬林致小鼠舔足反應(yīng)的影響；

圖2為鞘內(nèi)注射煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對(duì)完全弗氏佐劑致小鼠足底炎癥反應(yīng)的影響；

圖3為皮下注射煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對(duì)完全弗氏佐劑致小鼠足底炎癥反應(yīng)的影響。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對(duì)福爾馬林引起的炎性痛有鎮(zhèn)痛作用，下面通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在福爾馬林引起的炎性痛中具有治療作用。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為20gicr小鼠，購自同濟(jì)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，喂養(yǎng)條件：標(biāo)準(zhǔn)飼料，室溫保持在(24±2)℃，濕度50-60％，每日光照與黑暗時(shí)間各12h，實(shí)驗(yàn)前，將動(dòng)物置于實(shí)驗(yàn)環(huán)境適應(yīng)3天。

取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機(jī)分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組(鞘內(nèi)注射，10ul)、嗎啡組(鞘內(nèi)注射，350nmol/l，10ul)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(sigma-aldrich公司，濃度分別是8mmol/l，80mm/l，800mmol/l，鞘內(nèi)注射，10ul)，分別于給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測(cè)量小鼠舔足時(shí)間，記錄分為兩個(gè)時(shí)相，i相為0-10min，ii相為10-45min，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示，與生理鹽水組相比，在i相和ii相中，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mmol/l和800mmol/l)與嗎啡組(350nmol/l)降低了舔足時(shí)間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。

實(shí)施例2

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對(duì)完全弗氏佐劑致小鼠炎癥痛有鎮(zhèn)痛作用，下面通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明。

取icr小鼠18只(雄性，20g左右)，隨機(jī)分兩組，分別為生理鹽水組(鞘內(nèi)注射，10ul)，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mmol/l，鞘內(nèi)注射，10ul)。小鼠足底注射完全弗氏佐劑第三天，分別鞘內(nèi)給予生理鹽水，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，采用常規(guī)的vonfrey纖維細(xì)絲利用upanddown法進(jìn)行測(cè)量，分別測(cè)定給藥后15min，30min，45min，1h，2h，3h，6h的機(jī)械閾值，結(jié)果如圖2所示，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組在15min-3h抑制了完全弗氏佐劑引起的炎性痛，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛的作用。

實(shí)施例3

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對(duì)完全弗氏佐劑致小鼠炎癥痛有鎮(zhèn)痛作用，下面通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明。

取icr小鼠18只(雄性，20g左右)，隨機(jī)分兩組。分別為生理鹽水組(皮下注射，20ul)，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mmol/l，皮下注射，20ul)。小鼠足底注射完全弗氏佐劑第三天，分別腳掌皮下給予生理鹽水，80mmol/l的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，采用常規(guī)的vonfrey纖維細(xì)絲利用upanddown法進(jìn)行測(cè)量，分別測(cè)定給藥后15min，30min，45min，1h，2h，3h，6h的機(jī)械閾值，結(jié)果如圖3所示，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組在45min和1h抑制了完全弗氏佐劑引起的炎性痛，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛的作用。

實(shí)施例4

取icr小鼠18只(雄性，20g左右)，隨機(jī)分兩組，分別為生理鹽水組(鞘內(nèi)注射，2ul)，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mm/l，鞘內(nèi)注射，2ul)。小鼠足底注射完全弗氏佐劑第三天，分別鞘內(nèi)給予生理鹽水，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，采用常規(guī)的vonfrey纖維細(xì)絲利用upanddown法進(jìn)行測(cè)量，分別測(cè)定給藥后15min，30min，45min，1h，2h，3h，6h的機(jī)械閾值，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組在15min-3h抑制了完全弗氏佐劑引起的炎性痛，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛的作用。

實(shí)施例5

本實(shí)施例取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機(jī)分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組(皮下注射)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸兩組，濃度分別是8mmol/l，800mmol/l，分別按5ul/g和1ul/g的用量進(jìn)行皮下注射，給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測(cè)量小鼠舔足時(shí)間，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組降低了舔足時(shí)間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。

實(shí)施例6

取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機(jī)分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組濃度分別是8mmol/l，800mmol/l，分別按200ul/g和1ul/g的用量進(jìn)行腹腔注射，給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測(cè)量小鼠舔足時(shí)間，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組降低了舔足時(shí)間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。

實(shí)施例7

本實(shí)施例取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機(jī)分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組(靜脈注射)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸兩組，濃度分別是8mmol/l，800mmol/l，分別按100ul/g和1ul/g的用量進(jìn)行靜脈注射，給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測(cè)量小鼠舔足時(shí)間，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組降低了舔足時(shí)間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。