本發(fā)明涉及包含透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽和無機(jī)過氧化物的組合物和試劑盒，用于預(yù)防或治療傷口和/或需要傷口愈合、組織再生和/或骨再生的病理狀況，所述無機(jī)過氧化物選自過氧化鈣(cao2)、過氧化鎂(mgo2)和/或過氧化鋅(zno2)。更特別地，本發(fā)明涉及包含透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽和選自過氧化鈣(cao2)、過氧化鎂(mgo2)和/或過氧化鋅(zno2)的過氧化物的組合物和試劑盒，所述組合物和所述試劑盒用于預(yù)防或治療牙齦疾病。

背景技術(shù)：

1、氧涉及各種生物過程，諸如細(xì)胞代謝和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。特別地，在傷口愈合過程期間，由氧引起的瞬時(shí)氧化應(yīng)激有利于增加細(xì)胞活性、分泌傷口生長因子和促進(jìn)新血管形成。在可以檢測(cè)到慢性炎癥反應(yīng)的部位，增加氧消耗并且刺激血液流動(dòng)。該局部組織po2變化部分是由于增加的氧消耗，包括駐留細(xì)胞和浸潤的防御細(xì)胞的氧消耗，并且部分是由于內(nèi)皮損傷和血管收縮劑微循環(huán)以及兼性厭氧細(xì)菌而引起的降低的氧可用性。這些代謝過程存在于所有組織中。在牙周炎癥過程中幾乎總是發(fā)現(xiàn)缺氧性代謝變化，因?yàn)榻M織中的氧供應(yīng)和消耗之間存在不平衡(gordon,h.a.；rovin,s.；bruckner,g.blood?flow,collagencomponents?of?oral?tissue?and?salivary?kallikrein?in?young?to?senescent,germfree?and?conventional?rats.a?study?on?the?etiologic?factors?ofperiodontaldisease.gerontology?1978,24,1-11)。

2、在細(xì)胞防御的生理背景下的“突釋”，也稱為“呼吸突釋”，描述了產(chǎn)生氧自由基的氧的高且快速的增加，例如用于防御微生物(r.v.；costa,a.m.a.；grzeskowiak,l.oxidative?stress?and?tissue?repair:mechanism,biomarkers,andtherapeutics.oxidative?medicine?and?cellular?longevity?2021,2021,6204096)。然而，對(duì)于組織再生，不需要突釋。事實(shí)上，緩慢、恒定的氧釋放是有利的，其為局部微環(huán)境提供足夠的氧而不產(chǎn)生導(dǎo)致組織損傷的威脅健康的自由基。

3、在組織工程領(lǐng)域中已經(jīng)開發(fā)了氧釋放材料，以解決由于缺乏大的人工組織塊的血管化而導(dǎo)致的氧供應(yīng)不足的問題(wang,j.；zhu,y.；bawa,h.k.；ng,g.；wu,y.；libera,m.；van?der?mei,h.c.；busscher,h.j.；yu,x.oxygen-generating?nanofiber?cellscaffolds?with?antimicrobial?properties.acs?applied?materials&interfaces2011,3,67-73；lv,x.；li,z.；chen,s.；xie,m.；huang,j.；peng,x.；yang,r.；wang,h.；xu,y.；feng,c.structural?and?functional?evaluation?of?oxygenating?keratin/silkfibroin?scaffold?and?initial?assessment?of?their?potential?for?urethraltissue?engineering.biomaterials?2016,84,99-110；park,s.；park,k.m.hyperbaricoxygen-generating?hydrogels.biomaterials?2018,182,234-244)。

4、鈣(ca)、鋅(zn)和鎂(mg)是許多組織中的天然元素，并且涉及許多生理過程，諸如骨代謝或傷口愈合(chen,z.；zhang,w.；wang,m.；backman,l.j.；chen,j.effects?ofzinc,magnesium,and?iron?ions?on?bone?tissue?engineering.acs?biomater?sci?eng?2022,8,2321-2335)。當(dāng)過氧化鋅分解時(shí)，鋅被釋放，并且已知用于加速傷口愈合過程(lin,p.h.；sermersheim,m.；li,h.；lee,p.h.u.；steinberg,s.m.；ma,j.zinc?in?wound?healingmodulation.nutrients?2017,10)。鈣和鎂已經(jīng)顯示出增加骨再生(zhou,h.；liang,b.；jiang,h.；deng,z.；yu,k.magnesium-based?biomaterials?as?emerging?agents?forbone?repair?and?regeneration:from?mechanism?to?application.journal?ofmagnesium?and?alloys?2021,9,779-804；aquino-martínez,r.；angelo,a.p.；pujol,f.v.calcium-containing?scaffolds?induce?bone?regeneration?by?regulatingmesenchymal?stem?cell?differentiation?and?migration.stem?cell?research&therapy?2017,8,265)。因此，這些元素對(duì)于組織工程和組織再生具有很大的潛力。然而，它們的作用是劑量依賴性的，并且較高的劑量可能對(duì)組織再生產(chǎn)生不利影響或甚至誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。已知非常大量的不溶性ca鹽沉積在彈性組織諸如皮膚中導(dǎo)致皮膚鈣化并引起組織損傷(pugashetti,r.；shinkai,k.；ruben,b.s.；grossman,m.e.；maldonado,j.；fox,l.p.calcium?may?preferentially?deposit?in?areas?ofelastic?tissue?damage.j?amacad?dermatol?2011,64,296-301)。zn在體外顯示細(xì)胞毒性作用，因此當(dāng)使用zn以實(shí)現(xiàn)最佳組織工程效果時(shí)也應(yīng)避免過量給藥。鋅的細(xì)胞毒性作用可以通過增加ca2+濃度(通過使用也用于鈣的通道調(diào)節(jié)ca2+進(jìn)入細(xì)胞中)來抑制(borovansky,j.；riley,p.a.cytotoxicityofzinc?in?vitro.chem?biol?interact?1989,69,279-291)。類似于ca2+和zn2+，已知mg2+在體內(nèi)和體外均在細(xì)胞中引起細(xì)胞毒性作用，并且這些作用是劑量依賴性的(sanders,t.；liu,y.m.；tchounwou,p.b.cytotoxic,genotoxic,and?neurotoxic?effects?of?mg,pb,and?fe?on?pheochromocytoma(pc-12)cells.environ?toxicol?2015,30,1445-1458)。

5、牙齦炎、牙周炎和種植體周圍炎是人或哺乳動(dòng)物中最常見的生物膜相關(guān)的炎癥牙齦疾病。在沒有治療的情況下，這些牙齦疾病導(dǎo)致牙齒或種植體損失。牙周炎和種植體周圍炎由于易感個(gè)體中細(xì)菌群體的失調(diào)(與免疫炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)異常有關(guān))而發(fā)展。因此，失調(diào)造成微生物相關(guān)的病理的發(fā)展和宿主介導(dǎo)的結(jié)締組織和牙槽骨的分解(darveau,r.p.periodontitis:a?polymicrobial?disruption?of?host?homeostasis.nat.rev.microbiol.2010,8,481–490.)。牙周炎和種植體周圍炎還涉及結(jié)締組織，包括膠原、蛋白聚糖和細(xì)胞外基質(zhì)的其它組分的破壞。牙齦炎是牙齦組織對(duì)口腔菌斑中存在的細(xì)菌的代謝產(chǎn)物和病原毒素的炎癥反應(yīng)。

6、從牙周健康到疾病的轉(zhuǎn)變與從主要由諸如放線菌和鏈球菌的兼性細(xì)菌屬組成的共生微生物群落到主要由來自厚壁菌門、變形菌門、螺旋菌門、擬桿菌門和互養(yǎng)菌門的厭氧屬組成的失調(diào)的(dysbiotic)微生物結(jié)構(gòu)的巨大轉(zhuǎn)變有關(guān)(hajishengallisg.periodontitis:from?microbial?immune?subversion?to?systemic?inflammation.natrev?immunol.2015；15(1):30-44.doi:10.1038/nri3785.)。

7、革蘭氏陰性厭氧細(xì)菌菌群誘導(dǎo)一系列免疫反應(yīng)，從而促進(jìn)組織分解。軟組織和牙槽骨因此被降解，并且革蘭氏陰性厭氧菌可以在最佳條件下在牙周袋中生長。然而，盡管牙周病和種植體周圍疾病的病因是基于失調(diào)的微生物結(jié)構(gòu)，并且盡管一些特性良好的病原體表現(xiàn)出破壞性的毒力因子，但牙周炎和種植體周圍炎的發(fā)病機(jī)理本質(zhì)上由宿主反應(yīng)介導(dǎo)的(van?dyke,t.e.；serhan,c.n.resolution?of?inflammation:a?new?paradigm?for?thepathogenesis?ofperiodontal?diseases.j.dent.res.2003,82,82–90.0)。

8、存在用于治療牙齦炎、牙周炎或種植體周圍炎的不同方法，它們中的大多數(shù)涉及抗菌組合物的應(yīng)用(lasserre,j.f.；toma,s.；bourgeois,t.；el?khatmaoui,h.；marichal,e.；brecx,m.c.influence?of?low?direct?electric?currents?and?chlorhexidine?uponhuman?dental?biofilms.clin.exp.dent.res.2016,2,146–154.)。

9、在一種常見的方法中，生物可降解的氯己定(chx)芯片在治療中度至重度牙周炎患者中用作刮治和根面平整(srp)的佐劑(medaiah?s,srinivas?m,melath?a,girish?s,polepalle?t,dasari?ab.chlorhexidine?chip?in?the?treatment?of?chronicperiodontitis-a?clinical?study.j?clin?diagn?res.2014；8(6):zc22-zc25.doi:10.7860/jcdr/2014/8808.4477)。然而，研究表明，在srp后使用chx作為佐劑對(duì)微生物組和組織附著沒有顯著的積極影響(grisi,d.c.,等人,2002；carvalho,j.,等人,2007)，可能是因?yàn)閏hx對(duì)成纖維細(xì)胞和成骨細(xì)胞具有毒性，因此抑制了組織再生。

10、一些其它治療產(chǎn)品包括過硼酸鈉凝膠，其可以在srp之后被輔助地放置在袋中以用于氧釋放。然而，已知過硼酸鈉是腐蝕性和刺激性物質(zhì)，其盡管具有抗菌作用，但也具有細(xì)胞毒性并因此損害組織再生。另一種方法涉及包含透明質(zhì)酸的組合物，已經(jīng)在治療牙齦疾病的上下文中對(duì)其進(jìn)行了描述。

11、在wo2018/158764a1中描述了使用液體組合物治療牙齦炎或牙周炎，所述液體組合物包含不可生物降解的熱敏性的藥學(xué)上可接受的聚環(huán)氧烷嵌段共聚物、具有高達(dá)約50.000道爾頓的分子量的透明質(zhì)酸或其鹽和任選的治療劑。已經(jīng)描述了透明質(zhì)酸及其在牙周愈合，特別是與牙周疾病相關(guān)的傷口愈合過程中的潛在作用(mosley?r等人:“hyaluronan?and?its?potential?role?in?periodontal?healing”,dental?update,update?publ.,london,gb,第29卷,第3版,2002年4月1日,第144-148頁)。透明質(zhì)酸在牙周治療中也有用(dahiya?parveen等人:“hyaluronic?acid:a?boon?in?periodontaltherapy”,north?american?journal?of?medicalk?sciences,第5卷,第5版,2013年5月1日,第309-315頁)。

12、de20201602375u1公開了透明質(zhì)酸與抗菌的二鹽酸奧替尼啶的組合，其適用于治療和預(yù)防多種疾病，諸如口腔學(xué)并發(fā)癥、結(jié)石去除后的牙齦損傷、口腔粘膜傷口或舌頭傷口、或口腔中的其它類型的傷口和損傷。

13、ep1638582b1公開了透明質(zhì)酸在制備用于治療復(fù)發(fā)性口瘡的組合物中的用途。

14、ep3056195a1公開了透明質(zhì)酸和β-葡聚糖的組合物及其在治療牙周炎和牙齦炎等中的用途。

15、wo2018/158764a1公開了聚環(huán)氧烷嵌段共聚物和透明質(zhì)酸的某種組合物及其在治療牙周炎、牙齦炎和種植體周圍炎等中的用途。

16、此外，已知其中cao2用作抗微生物劑的根填充物(malyk?yuriy(2005),“in?vitrostudies?on?the?use?of?calcium?peroxide(cao2)-containing?sealer?materials?inendodontic?therapy”,doctoral?thesis,poliklinik?für?zahnerhaltung?undparodontologie?der?ludwig-maximilians-münchen)。

17、wo2018/026204a1公開了包含過氧化鈣的原位交聯(lián)的聚合物水凝膠，其以緩釋形式釋放高濃度的氧。還描述了用于組織再生和填充的種植體材料，其包含這種原位交聯(lián)的緩釋氧釋放型水凝膠。

18、cn112826761a和cn112870109a公開了一種含有過氧化鈣的具有抗菌作用的潔齒劑的制備方法。ca1334282c描述了含有過氧化物和碳酸氫鹽的牙周組合物和方法。

19、us5616313?a描述了一種用于將牙齦和牙周組織的損傷最小化的方法。該方法包括將含有鋅鹽的第一組合物遞送到容器，將含有碳酸氫鹽的第二組合物遞送到相同的容器，以及在遞送到容器的5min內(nèi)將組合物轉(zhuǎn)移到口中的牙齦和牙周組織上。然而，所釋放的氧僅在非常短的時(shí)間內(nèi)且在非常一次性的高濃度(突釋)下可用。為了實(shí)現(xiàn)抗菌作用，需要高的過氧化物濃度。

20、盡管已知用于治療人或動(dòng)物中的各種牙齦疾病的各種組合物，但它們不會(huì)結(jié)合持久的抗菌作用，而同時(shí)支持牙齦組織再生，使得傷口或炎癥病狀(特別是牙齦炎、牙周炎和種植體周圍炎)的治療效率較低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)該背景，本發(fā)明的目的是提供用于預(yù)防或治療傷口和炎癥疾病的藥物活性組合物，該組合物增加可用的氧的量，并在延長的時(shí)間段內(nèi)釋放氧。

2、該目的通過權(quán)利要求1的主題來解決，特別地通過包含透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽和一種或多種無機(jī)過氧化物的組合物來解決。

3、本發(fā)明基于以下令人驚訝的發(fā)現(xiàn)：當(dāng)將至少一種無機(jī)過氧化物與透明質(zhì)酸在組合物中組合時(shí)，可用氧的量倍增，并且氧以延遲的方式釋放。更具體地，發(fā)現(xiàn)，至少一種無機(jī)或金屬過氧化物與透明質(zhì)酸的組合，根據(jù)條件的不同，使可用氧的量倍增多達(dá)5倍。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含至少一種選自由氧化鈣(cao2)、過氧化鋅(zno2)和/或過氧化鎂(mgo2)組成的組中的無機(jī)過氧化物，以及透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。

4、還發(fā)現(xiàn)，可以通過添加mgo2和/或zno2來進(jìn)一步增加或改變可用氧的量，并且因此適應(yīng)于個(gè)體應(yīng)用和組織的需要。特別地，令人驚訝且重要的是，氧在更長的時(shí)間段內(nèi)釋放。

5、由于避免了高濃度的過氧化物，高濃度的過氧化物在局部觸發(fā)氧突釋并因此產(chǎn)生大量的抗菌氧自由基，從而損害局部組織，抗菌氧在延長時(shí)段的持續(xù)且穩(wěn)定的釋放使得傷口或炎癥病況的治療更高效且對(duì)于所治療的受試者的危險(xiǎn)更小。

6、如本文所示，本發(fā)明的組合物適于組織再生或骨再生，因?yàn)榱钊梭@訝地發(fā)現(xiàn)，低濃度的金屬過氧化物或無機(jī)過氧化物在與透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽組合時(shí)表現(xiàn)出意想不到的性質(zhì)。氧從金屬過氧化物諸如cao2、zno2和/或mgo2的延遲釋放可歸因于由所述組合物的透明質(zhì)酸形成的基質(zhì)。此外，由于氧從經(jīng)透明質(zhì)酸結(jié)合的無機(jī)過氧化物，特別是過氧化鈣的延遲釋放，可以避免突釋(一次高濃度的氧)和對(duì)周圍傷口組織有害的氧濃度。

7、在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，和一種或多種無機(jī)過氧化物，用于治療傷口或炎癥狀況。待治療的炎癥狀況的示例包括但不限于需要傷口愈合、組織再生和/或骨再生的狀況或病理。優(yōu)選地，炎癥狀況是牙齦疾病。更優(yōu)選地，牙齦疾病選自由牙齦炎、牙周炎或種植體周圍炎組成的組。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，和一種或多種選自cao2、zno2和/或mgo2的無機(jī)過氧化物，用于預(yù)防或治療牙齦炎、牙周炎或種植體周圍炎。在一個(gè)進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物至少含有過氧化鈣(cao2)和透明質(zhì)酸作為活性化合物，并且適合用于傷口愈合、組織再生和/或骨再生。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，此類組合物另外含有zno2和mgo2以增加可用氧的量。

8、在替代實(shí)施方式中，組合物包含兩種或更多種不同的無機(jī)過氧化物，在又一個(gè)實(shí)施方式中，組合物包含三種不同的無機(jī)過氧化物。因此，除了氧釋放之外，無機(jī)過氧化物的離子終產(chǎn)物也可以根據(jù)組織進(jìn)行優(yōu)化，并且使其具體地適于指征。

9、在第一變體中，組合物包含cao2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。在第二變體中，組合物包含zno2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。在第三變體中，組合物包含mgo2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。在第四變體中，組合物包含cao2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及至少一種另外的過氧化物，該至少一種另外的過氧化物包括但不限于zno2或mgo2。在第五變體中，組合物由cao2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽以及zno2組成。在第六變體中，組合物由cao2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽以及mgo2組成。在第七變體中，組合物包含mgo2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及至少一種另外的過氧化物，該至少一種另外的過氧化物包括但不限于cao2或zno2。在第八變體中，組合物由mgo2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽以及cao2組成。在第九變體中，組合物由mgo2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽以及zno2組成。在另一變體中，組合物包含zno2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一變體中，組合物包含zno2和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及mgo2和/或cao2。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，組合物由選自由cao2、zno2和mgo2組成的組中的兩種無機(jī)過氧化物和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合組成。優(yōu)選地，這種制劑含有兩種無機(jī)過氧化物cao2和zno2，或可替代地cao2和mgo2，以及透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽?？商娲膬?yōu)選的制劑含有三種無機(jī)過氧化物cao2、zno2和mgo2以及透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。過氧化物的組合可以根據(jù)待治療的狀況進(jìn)行調(diào)節(jié)。不同的過氧化物(cao2、zno2和/或mgo2)的組合增加了可用氧的量，并使終產(chǎn)物(ca2+、zn2+或mg2+)可用于待治療的組織。最重要地，避免了有毒量的過氧化物和氧的突釋。

10、在另一變體中，組合物是藥物組合物，其包含至少一種稀釋劑、溶劑或載體、至少一種無機(jī)過氧化物和透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。

11、一方面，本發(fā)明的組合物允許治療不同種類的傷口，包括慢性傷口，諸如靜脈腿潰瘍、糖尿病足潰瘍、壓瘡、動(dòng)脈潰瘍、燒傷和未愈合手術(shù)傷口。此外，根據(jù)本發(fā)明的組合物還可用于治療擦傷、撕裂傷、輕微割傷、燙傷和燒傷以及其它ii度創(chuàng)面(partial?thicknesswound)。

12、優(yōu)選治療被有害病原微生物污染的傷口。例如，牙周袋由于其厭氧條件，為厭氧致病菌提供了理想的生活環(huán)境。因此，發(fā)炎的組織增加了齦溝液，其是牙齦下微生物的主要營養(yǎng)來源。

13、本發(fā)明的組合物的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是顯著增加了氧破壞受影響組織中(例如牙周袋中)的生物膜和細(xì)菌的有效時(shí)段，使得炎癥狀況(諸如牙齦疾病，如牙齦炎、牙周炎或種植體周圍炎)的治療變得更有效。因此，可以避免或至少延遲或停止組織分解。同時(shí)，組織再生受到透明質(zhì)酸的刺激，且不會(huì)受到無機(jī)過氧化物的作用的不利影響。根據(jù)狀況，本發(fā)明的組合物用于治療特征為組織分解或骨破壞的病癥。本發(fā)明的組合物因此適用于組織再生、組織工程或骨再生。

14、不能預(yù)期通過將過氧化鈣與透明質(zhì)酸組合來延緩氧釋放。事實(shí)上，由于透明質(zhì)酸僅形成相當(dāng)粗的網(wǎng)狀基質(zhì)，更可能的是，氧氣以與水中相同的方式釋放。因此令人驚訝的是，透明質(zhì)酸與無機(jī)過氧化物諸如過氧化鈣的組合將導(dǎo)致氧的延遲釋放而不會(huì)對(duì)周圍組織產(chǎn)生不利地影響，同時(shí)保持金屬過氧化物的抗微生物性質(zhì)。如本文所例示的，可以有效地抑制牙周致病菌的生長或生物膜形成和免疫炎癥反應(yīng)。最重要地，在成纖維細(xì)胞或成骨細(xì)胞上沒有觀察到毒性作用。

15、包含在透明質(zhì)酸中的不同過氧化物的組合不僅使得可以根據(jù)不同靶標(biāo)(例如骨、皮膚、軟骨)的需要調(diào)節(jié)氧遞送。通過使用不同的過氧化物，可以避免一種離子的配藥過量，并且可以針對(duì)不同的靶標(biāo)對(duì)不同離子的需要定制生物材料。

16、本發(fā)明使得牙周炎或種植體周圍炎的基本原因可通過以下方式來解決：(a)提高針對(duì)專性厭氧菌的抗微生物效率，從而恢復(fù)共生細(xì)菌菌群，以及(b)加速組織再生以防止牙周袋中的細(xì)菌重新定植。

17、本發(fā)明的組合物優(yōu)選地被配制為藥物組合物。優(yōu)選地，藥物組合物包含一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、溶劑、稀釋劑或賦形劑(expedient)，并且優(yōu)選地制備為用于在口腔中局部施用的制劑。

18、優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物以溶液、懸浮液、乳液、乳膏或凝膠的形式配制。此類制劑含有治療有效濃度的透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，和治療有效濃度的一種或多種選自cao2、zno2或mgo2的無機(jī)過氧化物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物作為凝膠提供，其被準(zhǔn)備用遞送裝置例如注射器注射到牙齒和牙齦之間的空間中。由于本發(fā)明的組合，凝膠對(duì)致病性牙周病菌具有殺菌作用，防止機(jī)械清潔后的新定殖并加速組織再生(例如骨、牙齦)。此外，凝膠暫時(shí)封閉牙齒和牙齦之間的間隙，否則病原細(xì)菌將在該間隙中繁殖。

19、本發(fā)明的組合物優(yōu)選地包括無菌水溶液、或分散體和用于制備無菌可注射溶液或分散體的無菌粉末。可注射溶液必須是無菌的且為達(dá)到它們可以通過用于口腔的任何合適的遞送裝置(諸如注射器)注射的程度的流體。可注射溶液優(yōu)選包含載體，該載體可以是任何合適的溶劑或分散介質(zhì)，其包含例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、其合適的混合物、或植物油。所采用的活性成分的有效劑量可以根據(jù)所采用的特定化合物、施用方式和所治療的狀況的嚴(yán)重程度而變化。然而，一般來說，當(dāng)以每次施加高達(dá)3ml的單一劑量施用本發(fā)明化合物時(shí)，獲得了令人滿意的結(jié)果。

20、適用于向口腔施用的優(yōu)選的劑型包含與藥學(xué)上可接受的載體混合的約15mg/ml至35mg/ml的透明質(zhì)酸和約100mg/l至500mg/l的過氧化鈣。可以調(diào)節(jié)該劑量方案以提供最佳治療響應(yīng)。可以將本發(fā)明的組合施用于患有牙齦疾病的人或動(dòng)物的口腔。通常，獸醫(yī)劑量對(duì)應(yīng)于人類劑量，其中與成人相比，施用的量與動(dòng)物的重量成比例。

21、例如，對(duì)于向口腔施用，在本發(fā)明的藥物組合物中可以包含不會(huì)對(duì)透明質(zhì)酸和過氧化鈣的活性產(chǎn)生不利影響的藥學(xué)上可接受的載體，諸如溶劑或稀釋劑。此類載體包括但不限于試劑、穩(wěn)定劑、吸收延遲劑、崩解劑、乳化劑、抗氧化劑、粘合劑、潤滑劑、吸濕劑等。例如，溶劑可以選自由水和蔗糖溶液組成的組，稀釋劑可以選自由乳糖、淀粉和微晶纖維素組成的組，吸收延遲劑可以選自由殼聚糖和糖基聚糖組成的組，潤滑劑可以選自由硬脂酸鎂、滑石、硬脂酰富馬酸鈉或其組合組成的組。

22、在本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物優(yōu)選地還包含載體、增稠劑和一種或多種另外的抗微生物劑。根據(jù)這些實(shí)施方式的各個(gè)方面，組合物可以包含濕潤劑、遷移增強(qiáng)劑、油等。

23、優(yōu)選地，透明質(zhì)酸的藥學(xué)上可接受的鹽是透明質(zhì)酸鹽，并且包括但不限于透明質(zhì)酸的堿金屬或堿土金屬鹽，例如透明質(zhì)酸鈉、透明質(zhì)酸鉀和透明質(zhì)酸鈣。在一個(gè)實(shí)施方式中，透明質(zhì)酸的藥學(xué)上可接受的鹽是透明質(zhì)酸鈉。在一個(gè)可替代的實(shí)施方式中，透明質(zhì)酸的藥學(xué)上可接受的鹽是透明質(zhì)酸鉀或透明質(zhì)酸鈣。本發(fā)明的組合物還可以包含透明質(zhì)酸鈉、透明質(zhì)酸鉀和/或透明質(zhì)酸鈣的組合。

24、優(yōu)選地，在本發(fā)明的組合物中，透明質(zhì)酸或其藥學(xué)活性鹽以基質(zhì)的形式提供以允許過氧化鈣的結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明的透明質(zhì)酸基質(zhì)促進(jìn)成纖維細(xì)胞的組織再生和活力。此外，透明質(zhì)酸基質(zhì)防止過氧化鈣進(jìn)入溶液，并降低進(jìn)一步沉積新的潛在致病菌的風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)過氧化鈣與透明質(zhì)酸基質(zhì)結(jié)合時(shí)，氧從組合物中的過氧化鈣組分均勻釋放，從而在長時(shí)間段內(nèi)抑制牙周病原生物體的生長。此類牙周致病生物體的示例包括專性厭氧病菌，特別是牙周病原體(periopathogen)，其包括但不限于牙齦卟啉單胞菌(porphyromonasgingivalis)、伴放線聚集桿菌(aggregatibacter?actinomycetemcomitans)或由鏈球菌屬(諸如口腔鏈球菌(streptococcus?oralis))和放線菌屬組成的革蘭氏陽性需氧菌。

25、用于本發(fā)明的組合物中的透明質(zhì)酸或其鹽可以是高分子量透明質(zhì)酸或低分子量透明質(zhì)酸或其鹽。在本發(fā)明的上下文中，優(yōu)選高分子量透明質(zhì)酸。高分子量透明質(zhì)酸或其鹽優(yōu)選地具有約300,000至約6百萬道爾頓(da)的平均分子量。最優(yōu)選地，其具有約500,000至約3百萬道爾頓的平均分子量。包含在本發(fā)明的組合物中的低分子量透明質(zhì)酸或其鹽具有至多約50,000da的分子量，并且任選地被水解或部分水解。在某些實(shí)施方式中，低分子量透明質(zhì)酸具有約3,000至約50,000da、約4,000至約20,000da、或約6,000至約10,000da的分子量。

26、在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，包含在本發(fā)明的組合物中的透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽以約1mg/ml至約100mg/ml，優(yōu)選地約5mg/ml至約80mg/ml，約5mg/ml至約50mg/ml，或約10mg/ml至約40mg/ml，更優(yōu)選地約10mg/ml至約30mg/ml，最優(yōu)選地20mg/ml至約25mg/ml的量，例如以21mg/ml、22mg/ml、23mg/ml、24mg/ml或25mg/ml的量存在。優(yōu)選地，透明質(zhì)酸作為透明質(zhì)酸鈉以指定的濃度存在于組合物中。

27、本發(fā)明的組合物的無機(jī)過氧化物組分包含在足以在將組合物施加到口腔時(shí)允許氧均勻釋放的量中。通常，過氧化物組分可以以使得組合物包含至少約1mg/l的選自cao2、zno2或mgo2的無機(jī)過氧化物的量用于本發(fā)明的組合物中。

28、在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，過氧化鈣以約1mg/l至5000mg/l(對(duì)應(yīng)(resp.)1.4*10-5至0.07mol/l)的量存在于所述組合物中。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，包含在本發(fā)明的組合物中的過氧化鈣以約10mg/l至1000mg/l(對(duì)應(yīng)1.4*10-4至0.014mol/l)，優(yōu)選地約10mg/l至約800mg/l(對(duì)應(yīng)1.4*10-4至0.011mol/l)，約100mg/l至約800mg/l(對(duì)應(yīng)1.4*10-3至0.011mol/l)，或約100mg/l至約500mg/l(對(duì)應(yīng)1.4*10-3至0.0069mol/l)，更優(yōu)選地約200mg/l至約500mg/l(對(duì)應(yīng)0.0028至0.0069mol/l)的量，例如以200mg/l、250mg/l、300mg/l、400mg/l或500mg/l的量存在。

29、過氧化鋅的濃度優(yōu)選地在1mg/l至10000mg/l(對(duì)應(yīng)于1.02*10-5至0.103mol/l)的范圍內(nèi)。

30、過氧化鎂的濃度優(yōu)選地在1mg/l至15000mg/l(對(duì)應(yīng)于1.77*10-5至0.266mol/l)的范圍內(nèi)。

31、本發(fā)明的另一方面涉及優(yōu)選地存在于組合物中以提高其效率或治療有效性的附加組分。在本發(fā)明的第一方面，組合物包含一種或多種添加劑，其包括但不限于植物提取物、羥基磷灰石鈣和/或膠原。例如，本發(fā)明的組合物優(yōu)選另外包含一種或多種植物提取物的制劑，所述植物提取物優(yōu)選地得自選自由桉樹、大黃根、丁香油、蘆薈和/或蒔蘿組成的組的植物品種。本發(fā)明的組合物中植物提取物的存在抑制了病菌的生長并構(gòu)成了抗生素的可行替代物。如此，當(dāng)存在于本發(fā)明的組合物中時(shí)，植物提取物增強(qiáng)了cao2、zno2或mgo2的抗菌作用。

32、在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物中的添加劑是羥基磷灰石鈣，其被發(fā)現(xiàn)可誘導(dǎo)天然膠原的形成和儲(chǔ)存。此外，羥基磷灰石鈣促進(jìn)牙齒和骨材料的重構(gòu)。

33、在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物中的添加劑是膠原。當(dāng)存在于本發(fā)明的組合物中時(shí)，膠原支持牙齦對(duì)牙齒的附著。

34、當(dāng)組合物包含一種或多種選自由植物提取物、羥基磷灰石鈣或膠原組成的組中的添加劑時(shí)，植物提取物以約0.1重量％至約10重量％的量，更優(yōu)選地以約0.3重量％至約3重量％的量，最優(yōu)選地以0.5重量％的濃度存在于本發(fā)明的組合物中。

35、在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，羥基磷灰石鈣以鈣/磷酸鹽為0.8至20的比率和約1重量％至約30重量％的量，更優(yōu)選地以約5重量％至約20重量％的量，最優(yōu)選地以10重量％的濃度存在于本發(fā)明的組合物中。

36、在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實(shí)施方式中，膠原以約0.9重量％至約25重量％的量，更優(yōu)選地以約5重量％至約20重量％的量，最優(yōu)選地以15重量％的濃度存在于本發(fā)明的組合物中。

37、本發(fā)明還包含本文所述的化合物的變體或改性衍生物，特別地透明質(zhì)酸或其鹽、過氧化鈣、植物提取物、羥基磷灰石鈣或膠原的化學(xué)或生物改性形式。

38、組合物的ph值可根據(jù)特定應(yīng)用而變化。根據(jù)本發(fā)明的各種實(shí)施方式，ph值為約4至約9，優(yōu)選ph值為約6至8.5，最優(yōu)選地為6.5至8。

39、本發(fā)明的組合物不僅對(duì)牙周致病菌具有殺菌作用并暫時(shí)防止其重新安置，而且積極地支持組織再生。特別地，透明質(zhì)酸的基質(zhì)能夠使得在延長的時(shí)間段內(nèi)促進(jìn)氧釋放，同時(shí)對(duì)組織再生具有積極影響。因此，本發(fā)明的組合物產(chǎn)生治療牙齦疾病的較高成功率，并降低再治療的可能性。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是，由于一般性質(zhì)，本發(fā)明的組合物可適用于治療任何牙齦疾病，但特別適用于治療或預(yù)防牙齦炎、牙周炎或種植體周圍炎。

40、在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，可通過在制劑的生產(chǎn)中實(shí)施特殊加工來增加可用氧的量。用于獲得本發(fā)明組合的處理包括以下步驟：

41、1.將防腐劑溶解在液體基質(zhì)中；

42、2.溶解任選的可溶性組分；

43、3.懸浮不溶性組分；

44、4.在強(qiáng)烈攪拌下嵌入透明質(zhì)酸。

45、在本發(fā)明的上下文中使用的防腐劑的示例是甲基-4-羥基苯甲酸酯(mhb)。

46、優(yōu)選的液體基質(zhì)是pbs緩沖液或任何其它合適的溶液。可溶性組分包括添加劑，諸如植物提取物。優(yōu)選的不溶性組分包括但不限于過氧化物、羥基磷灰石鈣或其它種類的植物提取物。通過應(yīng)用該程序，與化合物的簡單混合以及隨后的溶解和懸浮相比，可以顯著增加可用氧的量。

47、此外，本發(fā)明包括用于將本發(fā)明的組合物遞送至靶標(biāo)的試劑盒。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及一種用于傷口愈合、組織再生和/或骨再生的試劑盒，該試劑盒包含根據(jù)本發(fā)明的組合物和用于將所述組合物施加到所述傷口、組織或骨中的遞送裝置。

48、在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的試劑盒被配置為將組合物遞送到牙齦袋、牙周袋或由種植體周圍炎產(chǎn)生的袋中，所述試劑盒包含根據(jù)本發(fā)明的組合物，以及用于將所述組合物局部施加到所述牙齦袋、牙周袋或由種植體周圍炎產(chǎn)生的袋中的遞送裝置。

49、在一個(gè)可替代的優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的試劑盒被配置為將所述組合物施加到口腔粘膜上或施加到口腔粘膜中，所述試劑盒包含根據(jù)本發(fā)明的組合物和用于將所述組合物局部施加到所述口腔粘膜上或施加到所述口腔粘膜中的遞送裝置。

50、在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，在本發(fā)明的試劑盒中，所述組合物以凝膠的形式提供，優(yōu)選地用注射器將所述凝膠施加于口腔。優(yōu)選地，凝膠被設(shè)置在牙齦袋、牙周袋或由種植體周圍炎產(chǎn)生的袋中。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，試劑盒中的用于組合物的遞送裝置是注射器。在一個(gè)可替代的實(shí)施方式中，將本發(fā)明的組合物施加到口腔粘膜上或施加到口腔粘膜中。本發(fā)明的試劑盒中的組合物允許可施用于動(dòng)物或人的口腔的緩釋劑型。

51、總之，過氧化物的組合可以最佳地向各種組織供應(yīng)氧和離子而不會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性。如本文所示，本發(fā)明的組合物和試劑盒允許氧從抗微生物過氧化鈣中延遲釋放，由此能夠成功地治療感染性或炎癥疾病，諸如牙齦疾病，包括但不限于牙齦炎、牙周炎和種植體周圍炎，而不會(huì)對(duì)周圍組織，諸如牙齒或種植體組織，產(chǎn)生不利地影響。

52、在以下實(shí)施例中更詳細(xì)地解釋本發(fā)明，然而，所述實(shí)施例僅旨在具有說明性性質(zhì)。本文所述的實(shí)施例和實(shí)施方式絕不應(yīng)限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明還包括本文所述的組分的任何變型、修改和/或組合。