本發(fā)明涉及可用于治療慢性乙型肝炎的免疫方案中的新型組合物。

背景技術(shù)：

1、乙型肝炎病毒(hbv)感染是主要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。全球近似2.57億人被hbv感染[who,2017]。hbv感染的臨床過(guò)程和結(jié)果在很大程度上取決于感染時(shí)的年齡以及病毒和宿主免疫應(yīng)答之間復(fù)雜的相互作用[ott,2012；maini,2016]。因此，暴露于hbv可能導(dǎo)致急性肝炎，其自行解決或可能進(jìn)展為各種形式的慢性感染，包括非活動(dòng)性乙型肝炎表面抗原(hbsag)攜帶者狀態(tài)、慢性肝炎、肝硬化和肝細(xì)胞癌(hcc)[liaw,2009]。成年群體中hbsag的流行率>2％，其中東南亞和中國(guó)的比率為5-8％，且非洲地區(qū)的比率為>8％。15-40％的具有慢性乙型肝炎感染的人(定義為檢測(cè)到超過(guò)6個(gè)月的血清hbsag)將發(fā)展肝臟后遺癥，其中肝硬化(lc)、肝代償不全和hcc是主要并發(fā)癥。

2、盡管在嬰兒中實(shí)施普遍的預(yù)防性乙型肝炎免疫已經(jīng)高度有效地降低許多流行國(guó)家中的乙型肝炎的發(fā)病率和流行率，但其尚未導(dǎo)致青少年和成人中的慢性乙型肝炎感染(chb)的流行率的強(qiáng)烈降低，并且不預(yù)期其影響hbv相關(guān)的死亡，直到引入后數(shù)十年。在2015年，乙型肝炎導(dǎo)致887,000例死亡，主要死于肝硬化和肝癌[who,2017]。

3、慢性乙型肝炎的臨床管理旨在通過(guò)預(yù)防疾病進(jìn)展并因此預(yù)防hcc發(fā)展來(lái)改善生存率和生活質(zhì)量[liaw,2013]。當(dāng)前的治療策略主要基于長(zhǎng)期抑制hbvdna復(fù)制，以實(shí)現(xiàn)hbv誘導(dǎo)的肝病的穩(wěn)定并預(yù)防進(jìn)展。血清hbvdna水平是所有當(dāng)前治療方式的基石終點(diǎn)。實(shí)現(xiàn)(可檢測(cè)的)乙型肝炎e-抗原(hbeag)的喪失是另一種有價(jià)值的生物標(biāo)志物，然而無(wú)論是否存在抗hbs血清轉(zhuǎn)化，hbsag喪失通常被認(rèn)為是代表“功能性治愈”的最佳終點(diǎn)，因?yàn)樗砻鱤bv復(fù)制和病毒蛋白表達(dá)的深刻抑制[block,2017；cornberg,2017]。目前，對(duì)于chb患者存在兩種主要的治療選項(xiàng)：通過(guò)聚乙二醇化干擾素α(pegifnα)或通過(guò)核苷(核苷酸)類似物(na)[easl,2017]。目的在于用有限持續(xù)時(shí)間治療誘導(dǎo)長(zhǎng)期免疫控制的pegifnα可以實(shí)現(xiàn)持續(xù)的治療外控制(off-treatment?control)，但持久的病毒學(xué)應(yīng)答和乙型肝炎表面抗原(hbsag)丟失限于小部分的患者。此外，由于其耐受性差和長(zhǎng)期安全性擔(dān)憂，顯著量的患者不適合進(jìn)行這種類型的治療。

4、na通過(guò)經(jīng)由抑制hbv聚合酶逆轉(zhuǎn)錄酶活性來(lái)抑制dna復(fù)制而起作用。在歐洲獲準(zhǔn)用于hbv治療的nas包括恩替卡韋(etv)、富馬酸替諾福韋二吡呋酯(tdf)和替諾福韋艾拉酚胺(taf)(其與針對(duì)hbv抗性的高屏障相關(guān))，以及拉米夫定(lam)、阿德福韋酯(adefovirdipivoxil)(adv)和替比夫定(tbv)(其與針對(duì)hbv抗性的低屏障相關(guān))。用具有對(duì)抗性的高屏障的有效na進(jìn)行治療的主要優(yōu)勢(shì)是其可預(yù)測(cè)的長(zhǎng)期高抗病毒效力(導(dǎo)致絕大多數(shù)順應(yīng)性患者中的hbv?dna抑制)以及其有利安全性概況。na治療的缺點(diǎn)是其長(zhǎng)期治療方案，因?yàn)閚a通常沒(méi)有實(shí)現(xiàn)hbv根除，并且na停用可以導(dǎo)致hbv復(fù)發(fā)[kranidioti,2015]。代表功能性治愈的hbsag丟失現(xiàn)在是chb中的金標(biāo)準(zhǔn)治療終點(diǎn)[block,2017；cornberg,2017]，然而，其很少用na治療實(shí)現(xiàn)[zoutendijk,2011]。

5、由于hbsag血清清除率低[zoutendijk,2011]和na外病毒復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)高[kranidioti,2015]，大多數(shù)患者被維持在長(zhǎng)期或甚至無(wú)限na療法下，這可能與患者對(duì)療法的順從性降低、財(cái)務(wù)成本的增加以及長(zhǎng)期暴露后藥物毒性和耐藥性突變的風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)[terrault,2015]。因此，新的策略對(duì)于補(bǔ)充na療法以實(shí)現(xiàn)用有限方案的“功能性治愈”是必要的。

6、目前正在探索的新的治療策略包括新的抗病毒策略以及加強(qiáng)hbv-特異性適應(yīng)性免疫應(yīng)答或活化先天性肝內(nèi)免疫力的新型免疫治療策略[durantel,2016]。迄今為止，這些實(shí)驗(yàn)治療無(wú)一顯示有效。在所評(píng)估的接種疫苗策略中，無(wú)一能夠誘導(dǎo)對(duì)hbv核心抗原(hbcag)的穩(wěn)健的多功能cd8+?t-細(xì)胞應(yīng)答，這對(duì)于恢復(fù)對(duì)該病毒的免疫控制是至關(guān)重要的[lau,2002；li,2011；liang,2011；bertoletti,2012；boni,2012]。關(guān)于基于hbv表面和/或pres抗原的重組疫苗的早期努力初步誘導(dǎo)抗體應(yīng)答，但沒(méi)有hbv特異性cd8+t-細(xì)胞應(yīng)答，其中沒(méi)有臨床或病毒學(xué)益處[jung,2002；vandepapelière,2007]。表達(dá)hbv包膜的dna疫苗無(wú)法恢復(fù)對(duì)hbsag和hbcag特異性的t細(xì)胞應(yīng)答，因此并不降低na停用后患者中復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)[fontaine,2015]。用新的遞送系統(tǒng)，編碼s、pres1/s2的dna疫苗(引發(fā)疫苗)和mva病毒載體疫苗(加強(qiáng)疫苗)沒(méi)有顯示t細(xì)胞誘導(dǎo)或病毒血癥的降低，表明單獨(dú)的hbv?pres和表面抗原不足以治愈患者[cavenaugh,2011]。更近來(lái)，已經(jīng)研究了靶向多種hbv抗原的疫苗策略和新的遞送系統(tǒng)。重組hbsag/hbcag疫苗導(dǎo)致僅一半患者中的病毒載量降低到非常低的水平(即～50iu/ml)[al-mahtab,2013]。編碼s、pres1/s2、核心、聚合酶和x蛋白的dna疫苗與遺傳佐劑化的il-12連同拉米夫定一起在一半患者中誘導(dǎo)多特異性t細(xì)胞應(yīng)答以及病毒載量的>2log10降低。然而，在任何患者中均未觀察到hbsag的定量檢測(cè)的變化，hbsag的喪失或hbsag血清轉(zhuǎn)化[yang,2012]。gs-4774疫苗，一種基于酵母的表達(dá)hbv的大s、核心和x蛋白的t細(xì)胞疫苗，在病毒抑制的chb患者中沒(méi)有提供hbsag的顯著降低[lok,2016]。

7、仍然存在對(duì)可以清除hbsag以允許患者安全地中止na治療而沒(méi)有病毒學(xué)或臨床復(fù)發(fā)的治療的未滿足需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、提供了免疫原性組合物，其包含復(fù)制缺陷的黑猩猩腺病毒(chad)載體，所述復(fù)制缺陷的黑猩猩腺病毒(chad)載體包含編碼乙型肝炎表面抗原(hbs)的多核苷酸、編碼乙型肝炎病毒核心抗原(hbc)的核酸和編碼與所述hbc融合的人恒定鏈(hii)的核酸。所述組合物可用于通過(guò)在引發(fā)-加強(qiáng)方案中施用所述組合物與至少一種其他免疫原性組合物來(lái)治療慢性乙型肝炎的方法中。

2、在一個(gè)進(jìn)一步方面，提供了免疫原性組合物，其包含修飾的牛痘病毒安卡拉(mva)載體，所述修飾的牛痘病毒安卡拉(mva)載體包含編碼乙型肝炎表面抗原(hbs)的多核苷酸和編碼乙型肝炎病毒核心抗原(hbc)的核酸。所述組合物可用于通過(guò)在引發(fā)-加強(qiáng)方案中施用所述組合物與至少一種其他免疫原性組合物來(lái)治療慢性乙型肝炎的方法中。

3、在一個(gè)進(jìn)一步方面，提供了免疫原性組合物，其包含重組乙型肝炎表面抗原(hbs)、c-末端截短的重組乙型肝炎病毒核心抗原(hbc)和含有mpl(3d單磷酰脂質(zhì)a)和qs-21(從皂樹(quillaja?sapnoaria)的樹皮純化的三萜糖苷)的佐劑。所述組合物可用于通過(guò)在引發(fā)-加強(qiáng)方案中施用所述組合物與至少一種其他免疫原性組合物來(lái)治療慢性乙型肝炎的方法中。

4、在一個(gè)進(jìn)一步方面，提供了免疫原性組合產(chǎn)品，其包含：

5、a)包含復(fù)制缺陷的黑猩猩腺病毒(chad)載體的組合物，所述復(fù)制缺陷的黑猩猩腺病毒(chad)載體包含編碼乙型肝炎表面抗原(hbs)的多核苷酸和編碼乙型肝炎病毒核心抗原(hbc)的核酸；

6、b)包含修飾的牛痘病毒安卡拉(mva)載體的組合物，所述修飾的牛痘病毒安卡拉(mva)載體包含編碼乙型肝炎表面抗原(hbs)的多核苷酸和編碼乙型肝炎病毒核心抗原(hbc)的核酸；和

7、c)包含重組乙型肝炎表面抗原(hbs)、重組乙型肝炎病毒核心抗原(hbc)和佐劑的組合物。

8、所述免疫原性組合產(chǎn)品可用于通過(guò)在引發(fā)-加強(qiáng)方案中施用所述組合物來(lái)治療慢性乙型肝炎(cbh)的方法中。

9、所述免疫原性組合產(chǎn)品可用于通過(guò)依次或同時(shí)施用所述組合物來(lái)治療人中的chb的方法中。