重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，特別涉及重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠劑及其 制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 喊性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic Fibroblast Growth Factor, bFGF)是由 146 個(gè) 氨基酸組成的單鏈多肽，分子量為17KD，是一種多功能細(xì)胞生長(zhǎng)因子，對(duì)中胚層和神經(jīng)外胚 層源細(xì)胞具有廣泛的生物學(xué)活性。它還是角膜組織的正常生理成分，在正常角膜組織全層 中都有分布。正常狀態(tài)下，bFGF主要以無(wú)或低活性形式存在于細(xì)胞間質(zhì)中，當(dāng)角膜受損是， rFGF能刺激角膜上皮細(xì)胞增殖移行，加速角膜上皮再生進(jìn)而促進(jìn)創(chuàng)傷愈合。臨床試驗(yàn)表明 bFGF眼部制劑可以在一定程度上延緩和減輕角膜上皮的再脫落損傷。
[0003] 目前已上市的重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子眼用制劑劑型主要為滴眼液以及 凝膠劑型。滴眼劑為液體狀態(tài)低粘度的眼部制劑，由于其粘度較低，給藥后會(huì)很快被眼瞼不 斷擠出或被淚液清洗排出。進(jìn)而降低其生物利用度以及給藥周期。而眼用凝膠為凝膠狀的 固體或半固體制劑。與滴眼劑相比，其粘度較高，不易很快被眼瞼擠出或被淚液沖刷下。這 點(diǎn)性質(zhì)導(dǎo)致眼部凝膠給藥后可患處停留周期較長(zhǎng)時(shí)間，生物利用度也較高，給藥周期也可 以相應(yīng)延長(zhǎng)。然而眼用凝膠使用不變，且若使用不當(dāng)患處會(huì)有刺激或其他異常感覺(jué)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供了一種在眼中滯留時(shí)間較長(zhǎng)，生物利用度高的重組人堿性成纖維細(xì)胞 生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，同時(shí)提高rh-bFGF眼用制劑的易用性與生物利用度。
[0005] 本發(fā)明提供一種重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，按照重量比包括 以下組分：重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5. 0 X l(T3-40 X KT3份，泊洛沙姆2-50份；作為 優(yōu)選的，所述重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比包括以下組分：重 組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子為15 X l(T3-40 X KT3份，泊洛沙姆為10-30份；作為更優(yōu)選 的，所述重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比包括以下組分：重組人 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子為20XKT 3-40X1(T3份，泊洛沙姆為13-23份；作為最優(yōu)選的，所 述重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比包括以下組分：重組人堿性成 纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子為30 X KT3份，泊洛沙姆為18份。
[0006] 本發(fā)明還提供另一種重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，按照重量 比包括以下組分：重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5. OX 1(T3-40X KT3份，卡波姆0. 1-20 份，羥丙甲纖維素〇. 1-50份；作為優(yōu)選的，所述重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝 膠制劑按照重量比包括以下組分：重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子15XKT 3-40X1(T3 份，卡波姆〇. 1-10份，羥丙甲纖維素〇. 2-20份；作為更優(yōu)選的，所述重組人堿性成纖維 細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比包括以下組分：重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 20 X l(T3-40 X KT3份，卡波姆0. 1-5份，羥丙甲纖維素0. 5-15份；作為最優(yōu)選的，所述重組 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比包括以下組分：重組人堿性成纖維細(xì) 胞生長(zhǎng)因子30 X KT3份，卡波姆0. 3份，羥丙甲纖維素1份。
[0007] 進(jìn)一步地，所述重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比還包 括以下組分：泊洛沙姆2-50份；作為優(yōu)選的，泊洛沙姆5-30份；作為更優(yōu)選的，泊洛沙姆 10-20份；作為最優(yōu)選的，泊洛沙姆16份。
[0008] 進(jìn)一步地，所述的泊洛沙姆是分子量為1000、2000、4000、7000、10000、12600或 15000的泊洛沙姆中的一種或多種的混合物；所述的卡波姆是卡波姆910、934、940、941、 974、980或1342中的一種型號(hào)或多種型號(hào)的混合物；所述的羥丙甲纖維素是粘度級(jí)別在3、 5、15、50、100、400、4000、6000或12000的羥丙甲纖維素中一種或多種的混合物。
[0009] 進(jìn)一步地，上述任意一種重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量 比還包括以下輔料組分：滲透壓調(diào)節(jié)劑0. 1-20份，抑菌劑0. 001-10份；作為優(yōu)選的，上述 任意一種重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比還包括以下輔料組分： 滲透壓調(diào)節(jié)劑0. 1-10份，抑菌劑0. 001-5份；作為更優(yōu)選的，上述任意一種重組人堿性成纖 維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量比還包括以下輔料組分：滲透壓調(diào)節(jié)劑〇. 1-5份， 抑菌劑0. 001-2. 5份。
[0010] 進(jìn)一步地，所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑是氯化鈉、氯化鉀、甘油、丙二醇、甘露醇、葡萄糖 中的一種或多種的混合物；所述的抑菌劑是三氯叔丁醇、尼泊金酯類、苯扎溴銨、苯扎氯銨 中的一種或多種的混合物。
[0011] 進(jìn)一步地，上述任意一種重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑按照重量 比還包括以下輔料組分：pH調(diào)節(jié)劑；所述的pH調(diào)節(jié)劑是磷酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液、三乙 醇胺、枸櫞酸、枸櫞酸納、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液中的一種或多種的混合物。
[0012] 本發(fā)明還提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑的制備方法，包括以 下步驟：
[0013] Al :在容器中加入重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5. OX 10_3-40X 10_3份；
[0014] A2:加入滲透壓調(diào)節(jié)劑0. 1-20份，抑菌劑0. 001-10份，攪拌；
[0015] A3:加入泊洛沙姆2-50份和/或卡波姆0. 1-20份，羥丙基甲基纖維素0. 1-50份， 攪拌直至形成透明溶液；
[0016] A4 :加入注射用水，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值3. 0-8.0,過(guò)濾，滅菌，分裝。
[0017] 采用本發(fā)明提供的重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，可延長(zhǎng)眼中滯 留時(shí)間，延長(zhǎng)給藥周期，提高生物利用度。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 實(shí)施例1
[0019] 本實(shí)施例提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，包括以下組分： 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5.0mg、卡波姆9400. lg、羥丙甲纖維素（E4M)0. lg、甘油 0. lg、三氯叔丁醇0.0 Olg、鹽酸溶液適量，注射用水加至1000ml。
[0020] 本實(shí)施例還提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑的制備方法，包括 以下步驟：
[0021] Al :在容器中加入重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5. Omg ;
[0022] A2 :加入甘油0? lg，三氯叔丁醇0? 001g，攪拌；
[0023] A3 :加入羥丙基甲基纖維素（E4M)0. lg，攪拌直至形成透明溶液；
[0024] A4:分次將卡波姆9400.1 g灑入容器中，邊加邊攪拌，持續(xù)攪拌直到完全分散溶 脹；
[0025] A5:加入注射用水定容至1000ml，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值3. 0-8. 0,過(guò)濾，滅菌，分裝 于滴眼劑瓶中。
[0026] 實(shí)施例2
[0027] 本實(shí)施例提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，包括以下組分：重 組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子30.0 mg、卡波姆9400. 3g、羥丙甲纖維素（E4M) lg、甘油2. 5g、 三氯叔丁醇〇. lg、鹽酸溶液適量，注射用水加至l〇〇〇ml。
[0028] 本實(shí)施例提供的重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑的制備方法與實(shí) 施例1相同。
[0029] 實(shí)施例3
[0030] 本實(shí)施例提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，包括以下組分： 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子40.0 mg、卡波姆94020g、羥丙甲纖維素（E4M)50g、甘油 20. 0g、三氯叔丁醇10. 0g、鹽酸溶液適量，注射用水加至1000ml。
[0031] 本實(shí)施例提供的重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑的制備方法與實(shí) 施例1相同。
[0032] 實(shí)施例4
[0033] 本實(shí)施例提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，包括以下組分：重 組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5. Omg、泊洛沙姆2. 0g、氯化鈉0. lg、苯扎氯銨0. 001g、氫氧 化鈉溶液適量，注射用水加至l〇〇〇ml。
[0034] 本實(shí)施例還提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑的制備方法，包括 以下步驟：
[0035] Al :在容器中加入重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5. Omg ;
[0036] A2 :加入氯化鈉0? lg，苯扎氯銨0? 001g，攪拌；
[0037] A3:加入泊洛沙姆2. 0g，攪拌使形成透明溶液；
[0038] A5:加入注射用水定容至1000ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值3. 0-8. 0,過(guò)濾，滅菌， 分裝于滴眼劑瓶中。
[0039] 實(shí)施例5
[0040] 本實(shí)施例提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，包括以下組分：重 組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子40.0 mg、泊洛沙姆50. 0g、氯化鈉20. 0g、苯扎氯銨10. 0g、氫 氧化鈉溶液適量，注射用水加至l〇〇〇ml。
[0041] 本實(shí)施例提供的重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑的制備方法與實(shí) 施例4相同。
[0042] 實(shí)施例6
[0043] 本實(shí)施例提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，包括以下組分：重 組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子30.0 mg、泊洛沙姆18. 0g、氯化鈉2. 5g、苯扎氯銨0. lg、氫氧 化鈉溶液適量，注射用水加至1000ml。
[0044] 本實(shí)施例提供的重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑的制備方法與實(shí) 施例4相同。
[0045] 實(shí)施例7
[0046] 本實(shí)施例提供重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子即型凝膠制劑，包括以下組分： 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5. Omg、