治療非酒精性脂肪性肝病的中藥有效成分復(fù)方制劑及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中醫(yī)藥研究開發(fā)利用領(lǐng)域，具體設(shè)及一種用于治療非酒精性脂肪性肝 病的中藥有效成分復(fù)方制劑及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)概括了從單 純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholicsteatohepatitis,NASH)到肝纖維化甚 至肝硬化的一類疾病。隨著肥胖和糖尿病的流行，NAFLD的發(fā)病率快速上升，成為引起慢 性肝病最主要的發(fā)病因素之一。西方人群中，NAFLD的發(fā)病率在25~30%，在肥胖和糖尿 病人中高達80%，成為引起肝酶異常的首要原因。在我國，由于飲食結(jié)構(gòu)和生活方式的改 變，NAFLD的發(fā)病率也逐漸上升，已成為僅次于病毒性肝病的第二大肝病。目前NAFLD的具 體發(fā)病機制還不十分清楚，其形成主要由于進食過多脂肪或脂肪代謝障礙，導(dǎo)致甘油=醋 (triglycerides,TG)在肝細胞內(nèi)積聚。Day等提出的W氧應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化為軸屯、的"二 次打擊"學(xué)說似乎可W解釋其復(fù)雜的發(fā)病機理，在學(xué)術(shù)界較為流行。在NAFLD形成的"二次 打擊"中，第一次打擊是肝臟內(nèi)脂肪的積聚，尤其是脂肪酸和TG，形成單純性脂肪肝；第二次 打擊氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化導(dǎo)致脂肪變的肝臟發(fā)生炎癥、壞死和纖維化，發(fā)展為MW。
[0003] 中國專利CN101919986A公開了一種治療非酒精性脂肪性肝病的中藥組合物，該 組合物是由W下重量份的原料藥制成：丹參10~20份，葛根10~20份，垂盆草20~ 40份，女貞子10~20份、白術(shù)10~20份、片姜黃5~15份。
[0004] 中國專利CN102883721A于2013-01-16公開了一種用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪 性肝?。∟AFLD)的藥物組合物，其包含選自式1表示的化合物1、西格列汀、維格列汀、利拉 利汀或它們的藥學(xué)可接受的鹽的活性成分。
[0005] 中國專利CN103800352A于2014-05-21公開了一種抗非酒精性脂肪性肝病的中藥 有效成分復(fù)方制劑，由檐子巧和綠原酸2種成分組成。
[000引NAFLD尚無療效理想的治療藥物，目前大批治療NAFLD的藥物，包括前述中國專利CN101919986AXN102883721A和CN103800352A公開的藥物在內(nèi)，可調(diào)節(jié)脂代謝、抗氧化、改 善IR等，或多或少顯示出一定治療作用，但尚無完全有效、作用肯定的藥物可供臨床使用， 且運些藥物長期服用存在一定毒性，因此患者很難長期堅持。本發(fā)明研制出的復(fù)方制劑，基 于目前臨床常用于治療脂肪肝的=種中藥絞股藍、虎杖、丹參，由運=種草藥中的主要有效 成分組成。傳統(tǒng)中藥復(fù)方注重整體綜合治療，其作用機理是多祀作用，但缺乏對藥效物質(zhì)的 微觀分析和組分質(zhì)量控制，運成為中醫(yī)藥迅速發(fā)展的瓶頸。分離提取中藥有效成分，闡述其 作用并明確其祀點和機制，是中藥研究國際化發(fā)展的熱點和趨勢，對開發(fā)成分較少、質(zhì)量可 控、機制明確的新藥具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 針對現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，根據(jù)本發(fā)明的實施例，希望提出一種可顯著改善細胞 脂肪變性，減少脂滴積聚，減輕肝細胞損傷，并且療效確切的治療非酒精性脂肪性肝病的中 藥有效成分復(fù)方制劑。
[0008] 本發(fā)明基于中醫(yī)藥防治脂肪肝的臨床實踐和扎實工作基礎(chǔ)，應(yīng)用權(quán)重配方法構(gòu)建 有效組分配比優(yōu)化篩選模式，實現(xiàn)復(fù)方制劑組分優(yōu)化配伍復(fù)方。
[0009] 根據(jù)實施例，本發(fā)明提供的一種治療非酒精性脂肪性肝病的中藥有效成分復(fù)方制 劑，由=種中藥有效成分原人參二醇、丹參酬IIA和大黃素組成，原人參二醇、丹參酬IIA和 大黃素的摩爾比為（10~100): (10~100): (1~10)。
[0010] 根據(jù)一個實施例，本發(fā)明前述治療非酒精性脂肪性肝病的中藥有效成分復(fù)方制劑 中，原人參二醇、丹參酬IIA和大黃素的摩爾比為10:10:1。
[0011] 根據(jù)一個實施例，本發(fā)明前述治療非酒精性脂肪性肝病的中藥有效成分復(fù)方制劑 中，所述復(fù)方制劑為片劑、顆粒劑、膠囊或口服液。
[0012] 根據(jù)一個實施例，本發(fā)明前述治療非酒精性脂肪性肝病的中藥有效成分復(fù)方制劑 中，非酒精性脂肪性肝病為肝臟脂肪積聚及肝損傷。
[0013] 本發(fā)明所述的原人參二醇按常規(guī)方法采用原材料絞股藍制備或市購。
[0014] 本發(fā)明所述的丹參酬IIA按常規(guī)方法采用原材料丹參制備或市購。
[0015] 本發(fā)明所述的大黃素按常規(guī)方法采用原材料虎杖制備或市購。
[0016] 本發(fā)明的中藥有效成分復(fù)方制劑，可按照常規(guī)方法制備成臨床常用制劑，包括片 劑、顆粒劑、膠囊或口服液。
[0017] 隨后的實施例和試驗例將證明，本發(fā)明應(yīng)用權(quán)重配方法設(shè)計多組藥物劑量配伍復(fù) 方，依據(jù)干預(yù)脂肪酸誘導(dǎo)的脂肪變性肝細胞的效應(yīng)篩選最佳配伍。研究結(jié)果表明，本發(fā)明中 藥有效成分復(fù)方制劑可顯著改善細胞脂肪變性，減少脂滴積聚，減輕肝細胞損傷。另外，在 高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠非酒精性脂肪肝模型干預(yù)試驗中，觀察到本制劑可下調(diào)血脂、減輕肝 脂積聚及肝損傷。同時觀察本發(fā)明中藥有效成分復(fù)方制劑對脂質(zhì)代謝和氧化應(yīng)激的影響， W闡述其降脂效應(yīng)機理。因此，不同于中藥復(fù)方，本發(fā)明中藥有效成分復(fù)方制劑還具有組分 簡單明確、質(zhì)量可控的優(yōu)勢，用于脂肪肝治療具有良好的市場前景。
【附圖說明】
[0018] 圖1為藥物A-F配伍藥物對化pG2細胞脂肪變性的作用圖（油紅0染色，200X)。
[0019] 圖2為藥物A-F配伍藥物對L02細胞脂肪變性的作用圖（油紅0染色，200X)。
[0020] 圖3為藥物A-F配伍藥物對化pG2和L02脂肪變性細胞脂質(zhì)含量的影響圖（與模 型組比較，*叩<〇. 001，叮<〇. 01，*P<〇. 。
[0021] 圖4為藥物F對脂肪變性化pG2細胞活性氧水平的影響（巧光顯微鏡，X200;N: 正常對照組；M:模型組；F:組分配伍F組）。
[0022] 圖5為藥物F對脂肪變性化pG2細胞MDAXYP2E1水平的影響圖（與模型組比較， **P<0. 01，*P<0. 05)。
[0023] 圖6為藥物F對脂肪變性化pG2細胞TG合成相關(guān)蛋白表達或活化水平的影響圖 (N:正常對照組；M:模型組；F:組分配伍F組；與模型組比較，"1K0. 01，午<0. 05)。
[0024] 圖7為藥物F高中低劑量對非酒精性脂肪肝小鼠模型干預(yù)后各組小鼠體重肝重的 變化圖（*P<〇. 05)。
[0025] 圖8為藥物F高中低劑量對非酒精性脂肪肝小鼠模型干預(yù)后各組小鼠血脂和血糖 的變化圖r*P<〇. 001，**P<〇. 01，*P<〇. 05)。
[0026] 圖9為藥物F高中低劑量對非酒精性脂肪肝小鼠模型干預(yù)后各組小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶 的變化圖（*P<〇. 05)。
[0027] 圖10為藥物F高中低劑量對非酒精性脂肪肝小鼠模型干預(yù)后各組小鼠肝組織病 理學(xué)變化圖。
[0028] 圖11為藥物F高中低劑量對非酒精性脂肪肝小鼠模型干預(yù)后各組小鼠肝脂含量 的變化圖r*P<〇. 001，*P<〇. 05)。
【具體實施方式】
[0029] 下面結(jié)合附圖和具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。運些實施例應(yīng)理解為僅用于說 明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的保護范圍。在閱讀了本發(fā)明記載的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù) 人員可W對本發(fā)明作各種改動或修改，運些等效變化和修飾同樣落入本發(fā)明權(quán)利要求所限 定的范圍。
[0030] 本發(fā)明W下實施例所使用的原人參二醇、丹參酬IIA和大黃素均為市購，購于上 海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司，純度大于98 %。
[0031] 要施巧I1 (篩洗_出有效白勺藥效成分和最值藥物成分配比方案）
[0032] 首先確定藥效組分的安全劑量，然后W單體干預(yù)脂肪變性細胞2地，據(jù)細胞油紅或 尼羅紅染色及細胞內(nèi)甘油立醋（triglyceride,TG)測定、上清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移