含利福昔明的乳房注入用原位凝膠及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于動(dòng)物用藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種含利福昔明的乳房注入用原位凝膠及 其制備方法，尤其是一種具有適宜相變溫度的含利福昔明的乳房注入用原位凝膠及其制備 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖臨床常發(fā)、多發(fā)病，主要由金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸 桿菌、蠟樣芽孢桿菌、化膿放線菌、綠膿桿菌、克雷伯氏菌等誘發(fā)。我國(guó)奶牛乳房炎的發(fā)病率 高于世界平均水平，已嚴(yán)重制約奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。在奶牛乳房炎防治中，干乳期治療是控 制牛群乳房炎的重要環(huán)節(jié)，此時(shí)奶牛處于停乳時(shí)期，有利于防治用藥，能治愈乳房已存在的 感染，預(yù)防新的感染發(fā)生。奶牛干乳期是從停止擠奶至產(chǎn)犢前15天，一般為40~70天，常 規(guī)藥物持效時(shí)間短，頻繁給藥費(fèi)時(shí)費(fèi)力，更會(huì)給乳房造成傷害，應(yīng)首選緩釋藥物。目前臨床 將藥物制成膏劑、油劑實(shí)現(xiàn)緩釋，膏劑、油劑生物相容性差，刺激性大，大大制約了藥效發(fā)揮 和疾病轉(zhuǎn)歸，且膏劑、油劑的緩釋效果一般，仍需重復(fù)給藥3-5次方能持效至干乳期結(jié)束。 目前抗菌藥仍是奶牛乳房炎防治的主力，臨床常采用聯(lián)合用藥，防止耐藥菌株增多，耐藥性 增強(qiáng)。
[0003] 利福昔明（Rifaximin)是利福霉素的半合成衍生物，為廣譜、高效、低毒的腸道或 局部用抗生素。本品為桔紅色粉末，溶于乙醇、乙酸乙酯、氯仿和甲苯，不溶于水。對(duì)革蘭氏 陽(yáng)性菌如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸球菌、糞鏈球菌及艱難梭菌等、對(duì)革蘭氏陰性 如大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、小腸結(jié)膜炎耶爾森菌及革蘭陽(yáng)性厭氧菌也有殺菌活性， 但明顯弱于抗革蘭氏陽(yáng)性菌的活性?？诜腿榉孔⑷牖緹o(wú)吸收，大鼠以l〇〇mg/kg劑量單 次口服利福昔明后，在胃腸黏膜達(dá)到較高濃度，在肝、腎、肺分布極少，大部分藥物通過(guò)糞便 排泄；泌乳期或干奶期奶牛，每個(gè)乳頭注入l〇〇mg利福昔明，血漿內(nèi)未檢測(cè)到利福昔明，非 常適合防治腸道和乳房等局部敏感菌感染。
[0004] 利福昔明耐受性好，不良反應(yīng)輕微，毒性小。小鼠口服LD50>5g/kg ;SD大鼠每天 灌服利福昔明25、50及100mg/kg，連續(xù)180d，除雌性大鼠血清總膽固醇出現(xiàn)劑量相關(guān)性增 高外，其他血液學(xué)、血清生化及病理組織學(xué)檢查均未見(jiàn)異常改變；大鼠和家兔實(shí)驗(yàn)均未觀察 到利福昔明的胚胎毒性和致畸毒性作用。利福昔明在醫(yī)學(xué)臨床主要用于防治敏感菌引起 的急、慢性腸道感染、腹瀉綜合征、夏季腹瀉、旅行者腹瀉、小腸結(jié)腸炎及手術(shù)期腸道預(yù)防用 藥，也用于防治牙周、皮膚和陰道等敏感菌感染。獸醫(yī)臨床上，主要用于乳房注入防治奶牛 乳房炎，子宮內(nèi)給藥防治奶牛子宮內(nèi)膜炎，外用防治多種動(dòng)物如牛、羊、山羊、馬、兔、寵物等 的局部感染等。利福昔明對(duì)大腸桿菌等陰性菌作用相對(duì)較弱，單獨(dú)用于乳房炎的防治，不利 于大腸桿菌及其內(nèi)毒素所致癥狀的修復(fù)。
[0005] 新霉素（Neomycin)為氨基糖苷類抗生素，常用其硫酸鹽，硫酸鹽在水中極易溶 解，在乙醇、乙醚、丙酮或氯仿中幾乎不溶?？咕V廣，對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性桿菌如大腸桿 菌、沙門(mén)菌、布魯菌、巴氏桿菌、變形桿菌等作用強(qiáng)，，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性球菌有一定作用，但弱于 革蘭氏陰性菌。內(nèi)服給藥吸收少，在腸道內(nèi)呈現(xiàn)抗菌作用。常用于治療畜禽的腸道大腸桿 菌感染；子宮或乳管內(nèi)注入治療奶牛、母豬等的子宮內(nèi)膜炎和乳腺炎；局部外用治療革蘭 氏陰性桿菌引起的皮膚、眼、耳感染。
[0006] 新魚(yú)腥草素鈉 （Sodium New Houttuyfonate)為合成的十二酰乙醛亞硫酸氫鈉加 成物，系中藥魚(yú)腥草活性成分癸酸乙醛亞硫酸氫鈉（即合成魚(yú)腥草素）的同系物，其在熱水 中易溶，在水、乙醇中微溶，在氯仿、苯中幾乎不溶，在氫氧化鈉試液中易溶，但同時(shí)分解。魚(yú) 腥草系三白草科植物蕺菜的新鮮全草或干燥地上部分，屬清熱解毒類中草藥，具有抗菌、抗 病毒、抗炎、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力及利尿、止血、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等多重功效。研究證實(shí)新魚(yú)腥草素 鈉具有同樣的藥理作用，對(duì)金黃色葡萄球菌、流感桿菌、卡他球菌、肺炎雙球菌、白色念珠菌 等有明顯作用，對(duì)大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌也有較強(qiáng)作用。魚(yú)腥草還可以增強(qiáng)白細(xì)胞 等的吞噬能力，顯著提高外周T淋巴細(xì)胞的比例，促進(jìn)免疫球蛋白的生成，參與調(diào)整中性粒 細(xì)胞氧化過(guò)程，提高中性粒細(xì)胞殺菌能力，增強(qiáng)機(jī)體非特異性和特異性兔疫能力，這對(duì)其抗 菌、抗病毒作用也有重要的意義。
[0007] 我國(guó)獸醫(yī)臨床上，已批準(zhǔn)上市的利福昔明劑型及規(guī)格有：利福昔明乳房注入劑 (干乳期），規(guī)格5g :0. lg。醫(yī)學(xué)臨床上，已批準(zhǔn)上市的利福昔明劑型及規(guī)格有：①利福 昔明片，規(guī)格：〇. lg、〇. 2g ;②利福昔明軟膠囊，規(guī)格：0. lg、0. 2g ;③利福昔明膠囊，規(guī)格： 0. lg、0. 2g ;④利福昔明干混懸齊I」，規(guī)格：0. lg、0. 2g。利福昔明已見(jiàn)報(bào)道研究的劑型有：利 福昔明陰道栓、利福昔明緩釋陰道泡騰片、乳房注入劑等。醫(yī)學(xué)臨床上，利福昔明已見(jiàn)報(bào)道 研究的劑型有：利福昔明分散片、納米乳等。獸醫(yī)、醫(yī)學(xué)臨床均未見(jiàn)利福昔明與硫酸新霉 素、魚(yú)腥草組合復(fù)方制劑上市，更未見(jiàn)乳房注入用原位凝膠劑型的報(bào)道。溫敏型原位凝膠 (thermosensitive in situ gel)具有使用方便，生物相容性好，刺激性小，黏膜組織親和 力強(qiáng)，滯留時(shí)間長(zhǎng)，體外流變學(xué)特征良好的優(yōu)點(diǎn)，在藥物制劑中應(yīng)用廣泛，是近年來(lái)緩控釋 制劑領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，雖然溫敏型原位凝膠具優(yōu)良的緩釋效果，但難以維繼40~70天，尤 其是主藥成分溶于水時(shí)，緩釋時(shí)間還會(huì)縮短，限制了溫敏型原位凝膠在防治奶牛乳房炎領(lǐng) 域的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供制備簡(jiǎn)單、使用方便、釋藥緩慢、強(qiáng)效 抗菌、生物相容性好的含利福昔明的乳房注入用原位凝膠劑。
[0009] 本發(fā)明的另一目的是提供含利福昔明的乳房注入用原位凝膠的制備方法。
[0010] 本發(fā)明的目的可通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0011] -種含利福昔明的乳房注入用原位凝膠，包括以分散形式存在的藥物活性成分、 以包合物形式存在的藥物活性成分、溫敏型凝膠基質(zhì)、高分子阻滯劑、抑菌劑、pH調(diào)節(jié)劑和 注射用水，所述溫敏型凝膠基質(zhì)由泊洛沙姆407 (P407)和泊洛沙姆188 (P188)組成，其中各 組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為：〇. 1-15%以分散形式存在的藥物活性成分、0. 25-20%以包合物形式存 在的藥物活性成分、12-30%泊洛沙姆407、0. 01-11 %泊洛沙姆188、0. 01-10%高分子阻滯 劑、0. 001-3%抑菌劑，pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH 5. 5~7. 5,余量為注射用水。
[0012] 優(yōu)選的，所述含利福昔明的乳房注入用原位凝膠中各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為：〇. 1-5% 以分散形式存在的藥物活性成分、1-10%以包合物形式存在的藥物活性成分、15-25%泊洛 沙姆407、0. 5-5%泊洛沙姆188、0. 1-1. 5%高分子阻滯劑、0. 001-0. 5%抑菌劑，pH調(diào)節(jié)劑 調(diào)節(jié)至pH 5. 5~7. 5,余量為注射用水。
[0013] 最優(yōu)選的，所述含利福昔明的乳房注入用原位凝膠中各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為： 0. 2-0. 6 %以分散形式存在的藥物活性成分、2. 48-4. 81 %以包合物形式存在的藥物活 性成分、16-23%泊洛沙姆407、0. 8-1.25%泊洛沙姆188、0. 15-1. 15%高分子阻滯劑、 0· 001-0. 2%抑菌劑，pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH 5. 5~7. 5,余量為注射用水。
[0014] 本發(fā)明所述含利福昔明的乳房注入用原位凝膠的成凝膠溫度在32°C~37°C之 間。
[0015] 所述以包合物形式存在的藥物活性成分是由以下制備方法制得的：將藥物活性成 分和乙基化β -環(huán)糊精按照摩爾比（0. 5-2) : (0. 5-4)放入研磨機(jī)中，加入50 %乙醇水溶 液，研磨20-30分鐘，再加入與前述50 %乙醇水溶液等量的50 %乙醇水溶液，攪拌2-8h，噴 霧干燥，過(guò)300目篩，即得主藥包含物；其中所述加入的50%乙醇水溶液的總體積與藥物活 性成分的質(zhì)量比為14_25mL : lg。
[0016] 優(yōu)選的，所述以包合物形式存在的藥物活性成分中藥物活性成分和乙基化β -環(huán) 糊精的摩爾比為1 : (1-2);最優(yōu)選的，所述以包合物形式存在的藥物活性成分中藥物活性 成分和乙基化β-環(huán)糊精的摩爾比為1 : 1-1.2。
[0017] 所述乙基化β -環(huán)糊精選自乙基β -環(huán)糊精、2, 6-二乙基β -環(huán)糊精、2, 3, 6-三 乙基β-環(huán)糊精中的任意一種或多種。
[0018] 本發(fā)明所述含利福昔明的乳房注入用原位凝膠中，所述以分散形式存在的藥物活 性成分和以包合物形式存在的藥物活性成分中的藥物活性成分相同。所述藥物活性成分包 括藥物活性成分Α和/或藥物活性成分Β，所述藥物活性成分Α為利福昔明，所述藥物活性 成分B為硫酸新霉素、新魚(yú)腥草素鈉中的一種或兩種組合；當(dāng)藥物活性成分B為硫酸新霉素 時(shí)，所述利福昔明與硫酸新霉素的重量比為（0.2-3) : (0.2-3);當(dāng)藥物B活性成分為新魚(yú) 腥草素鈉時(shí)，所述利福昔明與新魚(yú)腥草素鈉的重量比為（0.5-5) : (0.1-1);當(dāng)藥物活性成 分B為硫酸新霉素和新魚(yú)腥草素鈉的組合時(shí)，所述利福昔明、硫酸新霉素和新魚(yú)腥草素鈉 的重量比為（〇· 1-2) : (0· 2-4) : (0· 1-2)。
[0019] 優(yōu)選的，當(dāng)藥物活性成分B為硫酸新霉素時(shí)，所述利福昔明與硫