非晶形特考韋瑞制備
【專利說(shuō)明】
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)案的奪叉引用
[0002] 本申請(qǐng)案要求2013年7月19日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)案第61/856, 240號(hào)的 優(yōu)先權(quán)，其特此以全文引用的方式且出于所有目的并入本文中。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 本文描述了用于制備供治療或預(yù)防病毒感染和與其相關(guān)的疾病、尤其由正痘病毒 引起的那些病毒感染和相關(guān)疾病用的非晶形特考韋瑞（Tecovirimat)的方法。特考韋瑞 (專利商品名 ST-24(/ )的化學(xué)名是 N_[(3aR，4R，4aR，5aS，6S，6aS)-3, 3a，4, 4a，5, 5a，6, 6 a_八氫-1，3-二氧代-4, 6-亞乙烯基環(huán)丙[f]異吲哚-2(1H)_基]-4-(三氟甲基）-苯甲 酰胺。
[0004] 關(guān)于聯(lián)邦替助研究或研發(fā)的聲明
[0005] 本發(fā)明是在美國(guó)政府支持下在由生物醫(yī)學(xué)高等研究和開發(fā)部門（Biomedical Advanced Research and Development Authority，BARDA)授予的合同號(hào)：HHS0100201100001C 下進(jìn)行的。美 國(guó)政府擁有本發(fā)明的某些權(quán)利。
【背景技術(shù)】
[0006] 正痕病毒屬（正痕病毒科（Orthopoxviridae))是痕病毒科（Poxviridae family) 和脊椎動(dòng)物痘病毒亞科（Choropoxivirinae subfamily)的成員。所述屬由人類和動(dòng)物群 體中引起重要疾病的許多病毒組成。正痘病毒屬中的病毒包括牛痘（cowpox)、猴痘、牛痘 (vaccinia)和天花（痘癥），它們均可感染人類。
[0007] 痘癥（天花）病毒為特定重要的。新近對(duì)將天花病毒用作生物武器的關(guān)注已強(qiáng)調(diào) 了開發(fā)靶向正痘病毒屬的小分子治療劑的必要性。天花病毒（Variola virus)是高度可傳 染的且在人類中引起導(dǎo)致高死亡率的嚴(yán)重疾?。ê嗟律℉enderson)等人（1999)美國(guó)醫(yī) 學(xué)會(huì)雜志（JAMA).281:2127-2137)。此外，存在天花病毒用作生物武器的先例。在法國(guó)人 和印地安人戰(zhàn)爭(zhēng)期間（1754-1765)，為了引發(fā)流行病，英國(guó)士兵給美國(guó)印地安人分發(fā)天花患 者使用過(guò)的毛毯（施特恩E. W. (Stern, E. W.)和施特恩A. E (Stern, A. E.) 1945.天花對(duì)美洲 印第安人命運(yùn)的影響（The effect of smallpox on the destiny of the Amerindian). 波士頓（Boston))。所引起的爆發(fā)導(dǎo)致在一些印地安人部落中的死亡率為50% (施特恩 E. W.和施特恩A. E.)。最近，蘇維埃政府啟動(dòng)了一個(gè)項(xiàng)目，生產(chǎn)在霧化懸浮液中的高度毒性 的武器化形式的天花（亨德森，同上）。更為關(guān)注的為觀察到已經(jīng)開發(fā)的痘病毒的重組形式 在經(jīng)疫苗接種的動(dòng)物中具有引起疾病的潛能（杰克遜（Jackson)等人（2001)病毒學(xué)雜志 (J. Virol·)，75:1205-1210)。
[0008] 天花疫苗項(xiàng)目在1972年終止；因此，許多個(gè)體不再對(duì)天花感染免疫。即使經(jīng)疫苗 接種的個(gè)體可能也不再受到完全地保護(hù)，特別是對(duì)病毒的強(qiáng)毒株或重組株（唐尼（Downie) 和麥卡錫（McCarthy). (1958)衛(wèi)生學(xué)雜志（J Hyg. )56:479-487 ;杰克遜，同上）。因此，如 果天花病毒被有意地或意外地再引入人群，那么死亡率將是高的。
[0009] 天花病毒天然經(jīng)由霧化液滴傳播到呼吸道粘膜，在那里的淋巴組織中的復(fù)制產(chǎn)生 持續(xù)1-3天的無(wú)癥狀感染。病毒通過(guò)淋巴向皮膚播散，在那里的小的真皮血管中進(jìn)行復(fù)制 以及隨后感染和使相鄰表皮細(xì)胞發(fā)生溶胞，產(chǎn)生皮膚損傷（摩斯B (Moss，B.) (1990)痘病毒 科和其復(fù)制（Poxviridae and Their Replication)，2079-2111.B.N.菲爾茲（B.N. Fields) 和·Μ·奈普（D.M.Knipe)(編），區(qū)域病毒學(xué)（Fields Virology).雷文出版有限公司（Raven Press, Ltd.)，紐約（New York))。兩種形式的疾病與天花病毒感染相關(guān)；重型天花，最常見(jiàn) 的疾病形式，其產(chǎn)生30 %死亡率，和輕型天花，其流行率較低并且很少導(dǎo)致死亡（〈1 % )。死 亡為播散的血管內(nèi)凝血、低血壓和心血管性虛脫的結(jié)果，其可通過(guò)天花的罕見(jiàn)出血性類型 的凝血缺陷而加?。λ梗希?。
[0010] 最近猴痘病毒的爆發(fā)加強(qiáng)了對(duì)開發(fā)靶向正痘病毒屬的病毒的小分子治療劑的需 求。猴痘在美國(guó)的出現(xiàn)表示新興的感染。猴痘和天花在人類引起相似的疾病，然而猴痘的 死亡率較低（1% )。
[0011] 疫苗接種是目前用于預(yù)防正痘病毒疾病，特別是天花疾病的手段。使用牛痘病毒 的減毒株開發(fā)了天花疫苗，其局部復(fù)制且在大于95%的經(jīng)疫苗接種個(gè)體中提供針對(duì)天花 病毒的保護(hù)性免疫（默德林（Modlin) (2001)發(fā)病率和死亡率每周報(bào)導(dǎo)（MMWR(Morb Mort Wkly R印)）50:1-25)。與疫苗接種相關(guān)的不良事件經(jīng)常發(fā)生（1:5000)且包括全身性牛痘以 及牛痘從疫苗接種部位的無(wú)意轉(zhuǎn)移。更嚴(yán)重的并發(fā)癥如腦炎以1:300, 000的比率出現(xiàn)，這 通常為致命的（默德林，同上）。不良事件的風(fēng)險(xiǎn)在免疫功能不全個(gè)體中甚至更顯著（恩格 勒（Engler)等人（2002)過(guò)敏臨床免疫學(xué)雜志（J Allergy Clin Immunol.) 110:357-365)。 因此，疫苗接種對(duì)患有AIDS或過(guò)敏性皮膚病的人為禁忌的（恩格勒（Engler)等人）。盡 管保護(hù)性免疫持續(xù)多年，但響應(yīng)于天花疫苗接種的抗體在接種后10到15年顯著減少（唐 尼，同上）。另外，疫苗接種可能對(duì)正痘病毒的重組形式?jīng)]有保護(hù)性。最近的研究展示出表 達(dá)IL-4的鼠痘病毒的重組形式引起經(jīng)疫苗接種小鼠死亡（杰克遜，同上）?？紤]到與疫苗 接種、免疫功能不全個(gè)體的禁忌癥和不能抵御重組病毒株相關(guān)的副作用，需要用于治療天 花病毒感染的更好的預(yù)防法和/或新的治療劑。
[0012] 已經(jīng)將痘苗病毒免疫球蛋白（VIG)用于治療疫苗接種后的并發(fā)癥。VIG是來(lái)源于 接受牛痘病毒疫苗的個(gè)體的血漿免疫球蛋白級(jí)分的等滲無(wú)菌溶液。其用于治療牛痘性濕疹 和一些形式的進(jìn)行性痘苗。因?yàn)榇水a(chǎn)品限量可用且難以獲得，所以尚未指示將其用于大規(guī) 模天花爆發(fā)的事件（默德林，同上）。
[0013] 西多福韋（Cidofovir)([⑶-1- (3-羥基-2-膦酰基甲氧基丙基）胞嘧啶] [HBMPC])是被批準(zhǔn)用于治療AIDS患者中的CMV視網(wǎng)膜炎的核苷類似物。已經(jīng)展示西多福 韋具有體外對(duì)抗多個(gè)含DNA的病毒（包括腺病毒、皰疹病毒、肝炎病毒、多瘤病毒、乳突狀瘤 病毒和正痘病毒屬）的活性（布蘭森（Bronson)等人（1990)實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)與生物學(xué)進(jìn)展（Adv. Exp. MecL Biol. )278:277-83 ;德克萊克（De Clercq)等人（1987)抗病毒研究（Antiviral Res. )8:261-272 ;德奧利維亞（de Oliveira)等人（1996)抗病毒研究 31:165-172 ;斯諾 艾克（Snoeck)等人（2001)臨床感染疾病（Clin Infect. Dis. )33:597-602)。也已經(jīng)發(fā) 現(xiàn)西多福韋抑制真正的天花病毒復(fù)制（斯密（Smee)等人（2002)抗微生物劑與化學(xué)療法 (Antimicrob. Agents Chemother.)46:1329-1335)〇
[0014] 然而，西多福韋投與與許多問(wèn)題相關(guān)。西多福韋生物利用度差且必須靜脈內(nèi)投與 (萊扎瑞（Laezari)等人（1997)內(nèi)科學(xué)年鑒（Ann.Intern.Med.) 126:257-263)。此外，西 多福韋在靜脈內(nèi)投與時(shí)產(chǎn)生劑量限制性腎毒性（萊扎瑞等人）。另外，已經(jīng)注意到多個(gè)病毒 具有西多福韋抗性。通過(guò)在存在藥物的情況下重復(fù)傳代已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室分離出西多福韋抗性 的牛痘、猴痘、牛痘和駱駝痘病毒變異體（斯密，同上）。西多福韋抗性表示使用此化合物治 療正痘病毒復(fù)制的顯著限制。因此，生物利用度差、需要靜脈內(nèi)投與以及抗性病毒的流行都 強(qiáng)調(diào)了對(duì)于開發(fā)治療正痘病毒感染的額外和替代療法的需求。
[0015] 除了病毒聚合酶抑制劑如西多福韋之外，已經(jīng)報(bào)導(dǎo)許多其它化合物抑制正痘病毒 復(fù)制（德克萊克（2001)臨床微生物學(xué)綜述（Clin Microbiol. Rev. ) 14:382-397)。歷史 上講，已經(jīng)將美替沙腙（methisazone)(原型氨硫脲）用于天花感染的預(yù)防性治療（保爾 (Bauer)等人（1969)美國(guó)流行病學(xué)雜志（Am. J Epidemiol. )90:130-145)。然而，此化合物 類別因?yàn)楦旎ǖ耐ǔ２豢山邮艿母弊饔萌鐕?yán)重惡心和嘔吐，未獲得許多關(guān)注。作用機(jī) 制研究表明美替沙腙干擾L基因的翻譯（德克萊克（2001)，同上）。如同西多福韋，美替沙 腙是相對(duì)非特異性的抗病毒化合物且可抑制許多其它病毒，包括腺病毒、小核糖核酸病毒、 呼腸孤病毒、蟲媒病毒和粘性病毒（同上）。
[0016] 可能適用于治療痘病毒的另一類別的化合物由S-腺苷高半胱氨酸水解酶（SAH) 的抑制劑代表。此酶負(fù)責(zé)S-腺苷高半胱氨酸向腺苷和高半胱氨酸的轉(zhuǎn)化，這是病毒mRNA 的甲基化和成熟必需的步驟。已展示此酶的抑制劑在體外和體內(nèi)抑制痘苗病毒的功效 (德克萊克等人（1998)核苷核苷酸（Nucleosides Nucleotides.) 17:625-634·)。結(jié) 構(gòu)上，迄今為止報(bào)導(dǎo)的所有活性抑制劑為核苷腺苷的類似物。許多為碳環(huán)衍生物，通過(guò) 瓶菌素 A(N印lanacin A)和3-去氮雜瓶菌素 A所例示。雖然這些化合物已在動(dòng)物模 型中展示一些功效，但是如同許多核苷類似物，其遭受全身毒性和/或較差藥物動(dòng)力學(xué) 特性（克倫布（Coulombe)等人（1995)歐洲藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)雜志（Eur.J Drug Metab Pharmacokinet. )20:197-202;奧巴拉（Obara)等人（1996)醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志（J Med.