一種在鈦種植體表面制備抑菌涂層的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及高分子材料技術(shù)領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種在鐵種植體表面制備抑菌涂層的 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著人民生活水平的提高和牙科醫(yī)療技術(shù)的進步，越來越多的人在牙齒缺失修復(fù) 治時，選擇成功率高、對鄰牙無損傷及美觀的種植牙修復(fù)技術(shù)。但種植體植入后仍存在著由 于繼發(fā)感染而導(dǎo)致種植體松動、脫落，因此預(yù)防植入后的感染是防止種植失敗的關(guān)鍵因素。 預(yù)防植入后感染發(fā)生的常用方法是口服抗生素。口服抗生素是在種植手術(shù)后服用，它存在 著用時間短、易產(chǎn)和耐藥性等缺點；種植體表面涂附抗菌劑具有局部抗菌劑有效濃度高，不 產(chǎn)生全身毒附作用等優(yōu)點，因此該方法越來越受到研究工作者的重視。張玉梅等在鐵表面 先制備納米鐵管，然后的在納米鐵管中附載納米銀粒子，該方法能增強鐵表面的抗菌性能； Narbat等在鐵種植體表面吸附抗生素和季錠鹽增強鐵表面的抗菌性。運兩種方法雖然能 能局部抗菌，避免抗生素的全身毒附作用，但存在著起始釋放量大并隨時間的延長而逐漸 失去抗菌作用。而且目前研究表明：吸附在種植體表面的細菌能在植體表面形成生物膜，細 菌生物膜一旦形成，植入的鐵種植體雖然植入前經(jīng)殺菌消毒處理也很難殺死生物膜內(nèi)的細 菌，在一定的條件下，膜內(nèi)細菌復(fù)活導(dǎo)致感染的發(fā)生，因此植入的種植體最好具有長期的殺 菌抑菌性能。本發(fā)明通過化學(xué)反應(yīng)，在鐵表面通過共價鍵連接大分子季錠化合物，從而使鐵 表面具有長期抗菌性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是通過化學(xué)反應(yīng)在鐵表面接枝高分子季錠鹽，使鐵表面具有長期殺 菌抑菌功能。
[0004] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0005] 一種在鐵種植體表面制備抑菌涂層的方法，步驟如下：
[0006] (1)稱取8.Og十水四棚酸鋼于500ml的圓底燒瓶中，加入200ml去離子水，攬拌溶 解，然后加入4. 0多己胺，繼續(xù)攬拌至溶解，用無水碳酸調(diào)整溶液抑值至9-10,在冰浴條件 下加入2.Iml2-漠丙酷漠，冰浴2小時后，升至室溫繼續(xù)反應(yīng)24小時，反應(yīng)結(jié)束后用6mol/ L的鹽酸調(diào)整溶液抑至2,用乙酸乙醋萃取溶液3次，每次乙酸乙醋用量100ml，蒸去乙酸 乙醋，所得產(chǎn)物再用甲醇重結(jié)晶，得白色固體產(chǎn)物，即2-漠-N-巧-(3, 4-二徑基苯基）乙 基]-丙酷胺；
[0007] (2)將上步所得2-漠-N-巧-(3, 4-二徑基苯基）乙基]-丙酷胺用去離子水配成 2(Wt)%的水溶液，備用； 陽00引 做取鐵化依次用200目、400目、800目、1200目砂紙對其表面進行拋光，然后在 lOmol/L的氨氧化鋼溶液中、60°C溫度下浸泡2小時，自來水下沖洗，然后依次用去離子水、 異丙醇、丙酬超聲清洗，每次15分鐘，自然涼干，備用；
[0009] (4)將上步制備好的鐵片放入步驟2配制的2-漠-N-巧-(3, 4-二徑基苯基）乙 基]-丙酷胺的水溶液中，在避光條件下浸泡12小時，然后取出，用去離子水反復(fù)沖洗3次， 然后在氣氣流下吹干；
[0010] (5)將上步所得鐵片浸入甲基丙締酸N，N-二甲氨基乙醋的1，2-二氯苯溶液中，并 加入面化亞銅和2, 2'聯(lián)化晚，80°C條件下反應(yīng)24小時，然后取出依次用四氨巧喃和水清洗， 重復(fù)清洗四次，室溫真空干燥； 陽0川所述的甲基丙締酸N，N-二甲氨基乙醋的1，2-二氯苯溶液中的甲基丙締酸N，N-二甲氨基乙醋的濃度為10(Wt)% -50(Wt)%;
[0012] 面化亞銅用量為甲基丙締酸N，N-二甲氨基乙醋量的0. 1-1. 0(Wt)%;所述的2, 2' 聯(lián)化晚為甲基丙締酸N，N-二甲氨基乙醋量的0. 1-0. 5(Wt)%; 陽01引 （6)將上步所得鐵片浸入R-X的硝基甲燒溶液中，30°C下反應(yīng)24小時，取出，依次 用四氨巧喃、甲醇和去離子水清洗，重復(fù)清洗2次，然后室溫涼干，即得表面具有抑菌涂層 的鐵種植體；
[0014] R-X的硝基甲燒溶液中R-X的體積濃度為10 % -50 %。
[0015] 所述步驟5中的面化亞銅為氯化亞銅和漠化亞銅，優(yōu)選漠化亞銅。
[0016] 所述步驟6中R-X中的R為碳原子數(shù)為1-16的正烷基，X為氯或漠原子，優(yōu)選漠 兀素。
[0017] 本發(fā)明的有益技術(shù)效果為：本發(fā)明制備的鐵種植體表面抗菌涂層具有長期的抗菌 性，而且該涂層為接觸性抗菌涂層，不釋放殺菌、抑菌物質(zhì)，對周圍組織無毒附作用。
【附圖說明】
[0018] 圖1為2-漠-N-巧-(3, 4-二徑基苯基）乙基]-丙酷胺的核磁共振表征圖。
【具體實施方式】
[0019] 下面結(jié)合實施例和附圖對本發(fā)明作進一步說明。
[0020] 具有殺菌和抑菌涂層的鐵片的殺菌抑菌性用平皿計數(shù)法測定，所用菌種為變形鏈 球菌（ATCC35668)
[0021] W本發(fā)明中方法制備的具有殺菌和抑菌涂層的鐵片作實驗組，純鐵片作空白組， 所有用于抑菌實驗的鐵片12rC，103kPa滅菌30min。
[0022] 抑菌實驗室按下述方法進行：
[0023] 取復(fù)蘇的變形鏈球菌適量加入到BHI液體培養(yǎng)基中，37 °C下厭氧培養(yǎng)16~18小 時。連續(xù)傳代至第=代，測定變形鏈球菌光密度值ODe。。= 0. 30。按照1:100的比例稀釋， 即取50yL菌液加入到5血含糖BHI液體培養(yǎng)基中，混勻備用。
[0024] 取6孔培養(yǎng)板，放入消毒的棉花和濾紙，滴入0.9%化Cl溶液，使溶液剛好浸沒。 將實驗組和空白組鐵片各一枚置于濾紙上，每個鐵片上均滴加上述菌液50y以再在每個鐵 片上放置與鐵片同大小的濾紙一張，使濾紙與鐵片完全重合，且菌液將濾紙完全浸濕。將培 養(yǎng)板置于37 °C溫箱中，厭氧培養(yǎng)2地。 陽0巧]待培養(yǎng)24h后，取3個50mL離屯、管，各加入PBS溶液5mU將6孔培養(yǎng)板中的鐵片 連同覆蓋其上的濾紙一并放入離屯、管中，每個離屯、管中放入一枚鐵片。超聲震蕩儀50W功 率下震蕩2min后，滿旋振蕩10s，使粘附在鐵片表面的細菌脫落于PBS中形成懸液。待充分 振蕩后，選取10 2稀釋倍數(shù)，從中吸取25yL菌液接種于BHI瓊脂固體培養(yǎng)皿中。每個稀釋 度接種3個BHI瓊脂固體培養(yǎng)皿。將接種過的培養(yǎng)皿放入37°C溫箱中，厭氧培養(yǎng)24h后，作 平板菌落計數(shù)。
[00%] 在實驗條件及培養(yǎng)環(huán)境完全相同的情況下，抑菌實驗各重復(fù)3次。菌落計算：選取 無片狀菌落生長的平皿作為菌落總數(shù)測定標準。各稀釋度使用=個平皿，采用=個平皿菌 落數(shù)平均值。若有片狀菌落分布，不到平皿的一半，而其余一半中菌落分布又均勻，計算半 個平皿后乘2W代表全皿菌落數(shù)。
[0028] 一種在鐵種植體表面制備抑菌涂層的方法，步驟如下：
[0029] (1)多己胺在催化劑作用下與2-漠異下酷漠反應(yīng)，制備2-漠-N-[2-化4-二徑 基苯基）乙基]-丙酷胺，具體步驟如下：稱取8.Og十水四棚酸鋼于500ml的圓底燒瓶中， 加入200ml去離子水，攬拌溶解，然后加入4. 0多己胺，繼續(xù)攬拌至溶解，用無水碳酸調(diào)整溶 液pH值至9-10,在冰浴條件下加入2.Iml2-漠丙酷漠，冰浴2小時后，升至室溫繼續(xù)反應(yīng) 24小時，反應(yīng)結(jié)束后用6mol/L的鹽酸調(diào)整溶液抑至2,用乙酸乙醋萃取溶液3次，每次乙 酸乙醋用量100ml，蒸去乙酸乙醋，所得產(chǎn)物再用甲醇重結(jié)晶，得白色固體產(chǎn)物，用核磁共振 對產(chǎn)物進行表征，產(chǎn)物為2-漠-N-巧-(3, 4-二徑基苯基）乙基]-丙酷胺；
[0030] (2)將上步所得2-漠-N-巧-(3, 4-二徑基苯基）乙基]-丙