一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法【
技術(shù)領(lǐng)域：
】[0001]本發(fā)明屬于光動態(tài)治療
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體是一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法?！?br>背景技術(shù)：
】[0002]光動力療法是指光敏劑被細(xì)胞攝取后，在特定波長的光激發(fā)下，產(chǎn)生具有細(xì)胞毒性的單線態(tài)氧，進(jìn)而殺死細(xì)胞的一種治療方法;光敏劑是光動力療法的重要因素之一，在眾多光敏劑中，撲啉及其衍生物具有較好的發(fā)展前景，但是，因為卟啉及其衍生物分子疏水性強(qiáng)，在水系溶液中，大環(huán)平面間的疏水作用導(dǎo)致其具有較強(qiáng)的聚集傾向，這不僅給光敏劑的分離純化帶來困難，而且使得光敏劑的光動力效果較差，從而影響了其光化學(xué)性質(zhì)及在體內(nèi)的功效;通過高分子功能化，合成多種拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的高分子，采用共聚，共混，超支化等方法可以克服上述缺陷，而在光敏劑分子上引入糖肽，能夠使光敏劑帶上親水基團(tuán)，增強(qiáng)其水溶性，因此設(shè)計和合成以卟啉為核的聚合物和樹枝狀高分子受到越來越多研究者的關(guān)注；同時，以卟啉及其衍生物為內(nèi)核，通過外部接枝形成拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的含有特異性識別基團(tuán)的糖肽化合物，可以有效地防止卟啉內(nèi)核的自猝滅，有望能夠高效地把高濃度的光敏藥物遞送到病灶部位。[0003]糖肽是糖基與氨基酸或多肽鏈以共價鍵相連而形成的綴合物;含有糖肽的物質(zhì)，既保留了糖蛋白的許多重要的生物功能，又沒有糖蛋白巨大的分子量和復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，是研究糖蛋白這種廣泛存在于生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)的重要模型工具;選用糖肽作為靶向裝置具有以下優(yōu)點:a.糖肽中含有特異性識別位點，能與腫瘤組織中的受體相結(jié)合，將光敏劑運送至目標(biāo)細(xì)胞;b.與糖蛋白靶向裝置相比，糖肽修飾光敏劑分子質(zhì)量較小，能有效穿過組織，利于腫瘤細(xì)胞的選擇性結(jié)合與內(nèi)吞;c.引入糖肽能改變光敏劑的親水-疏水平衡，調(diào)節(jié)體內(nèi)攝取和運輸?shù)人幬锎x特性;d.合成與修飾較為簡單，得到的化合物組成確定可控;糖肽和糖蛋白在許多生理和病理過程中發(fā)揮著極為重要的作用，比如細(xì)胞間的粘連和識別、組織的分化和發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤的轉(zhuǎn)移、炎癥的發(fā)生以及病原體的感染等方面，采用人工合成的方法，可以方便地對多種材料進(jìn)行糖肽修飾，以滿足不同領(lǐng)域的要求。[0004]本專利將糖肽類聚合物的優(yōu)點和卟啉的光動力性能相結(jié)合，制備了一種能夠有效提高光動力療效的新型聚合物，時至今日，已經(jīng)有很多相關(guān)的研究成果，而主要的研究集中在乳糖糖肽材料上。[0005]經(jīng)對現(xiàn)有技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，TusharBorase等在2013年《AngewandteChemieInternat1nalEdit1n》上發(fā)表的“StableAqueousDispers1nsofGlycopeptide-GraftedSelectablyFunct1nalizedMagneticNanoparticles”(經(jīng)糖肽修飾能在水溶液穩(wěn)定分散的具有選擇性的功能化磁性納米粒子)，該文提出用3-胺丙基三乙氧基硅烷修飾的四氧化三鐵納米粒子引發(fā)炔丙基谷氨酸酯羧基內(nèi)酸酐的開環(huán)聚合反應(yīng)，然后與疊氮功能化半乳糖發(fā)生Husigen環(huán)加成反應(yīng)，制備出糖肽功能化的磁性納米粒子，但是，迄今為止，以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽尚未見報道?！?br/>發(fā)明內(nèi)容】[0006]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種可注射光動力治療用以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，通過開環(huán)聚合和糖基化反應(yīng)可以方便地制得具有靶向識別且可調(diào)節(jié)的以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物，設(shè)計合理，操作方便，有望適用于工業(yè)化生產(chǎn)。[0007]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的，一種用于光動力治療的以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，按照下述步驟進(jìn)行:[0008](1)由對-5，10，15，20-四_(氨基)苯基撲啉化合物，在室溫下引發(fā)ε-芐氧羰基_L_賴氨酸-N-羧酸酐開環(huán)聚合制備以卟啉為核的星型聚-ε_芐氧羰基-L-賴氨酸，聚合反應(yīng)時間為5天。[0009]所述室溫指20°C_30°C。[0010]所述對-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉與ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-N-羧酸酐的摩爾比為1:40-1:80。[0011]其中以臂支長度為20的以卟啉為核的星型聚-ε-芐氧羰基-L-賴氨酸為例，對-5，10,15,20-四(氨基)苯基卟啉與-ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐的摩爾比為1:80。[0012]具體步驟為:將引發(fā)劑對-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉，ε_芐氧羰基_L_賴氨酸-N-羧酸酐分別置于經(jīng)充分干燥的兩個不同試管中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮氣來回三次后，用干燥過的N，N’_二甲基甲酰胺溶解ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-N-羧酸酐，待完全溶解后用轉(zhuǎn)移針頭聯(lián)通兩個試管，將溶解的組分通入對_5，10，15，20_四(氨基)苯基卟啉中，在20°C_30°C油浴下反應(yīng)5天，反應(yīng)完成后，在無水乙醚中沉淀，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，除去無水乙醚。再用THF溶解，在無水乙醚中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥箱干燥。[0013](2)用氫溴酸/醋酸(HBr/CH3C00H)混合溶劑來對卟啉為核的星型聚-ε-芐氧羰基-L-賴氨酸上的芐氧羰基進(jìn)行脫保護(hù)，得卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸，反應(yīng)時間為15小時，反應(yīng)溫度在45°C。[0014]所述混合溶劑中，氫溴酸和醋酸混和的質(zhì)量比為:2:5。[0015](3)以卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸同乳糖酸內(nèi)酯糖基化，制得以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物。[0016]所述反應(yīng)時間為36小時，反應(yīng)溫度在30°C。[0017]所述卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸與乳糖酸內(nèi)酯的摩爾比為1:40-1:80。[0018]具體步驟為:[0019]取卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸和乳糖酸內(nèi)酯，置于圓底燒瓶中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮氣來回三次后，用干燥過的甲醇進(jìn)行溶解，再加入干燥過的三乙胺，在30°C油浴下反應(yīng)36小時，反應(yīng)完成后，過濾去除多余乳糖酸，然后在無水乙醚中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥槍中干燥，得到以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物。[0020]本發(fā)明具有如下優(yōu)點:[0021]1)用端基為胺基的對-5，10，15，20_四(氨基)苯基卟啉作為核引發(fā)聚合，可控合成多種不同鏈段長度的擬糖肽結(jié)構(gòu)。[0022]2)精確合成的PLL鏈段的二級結(jié)構(gòu)可用于調(diào)節(jié)該材料自組裝后形成的納米粒子的大小及形狀。[0023]3)引入半乳糖殘基，對特定腫瘤細(xì)胞具有靶向識別作用。[0024]4)為制備新型的光動力治療腫瘤細(xì)胞高分子藥物控制釋放載體提供了一種簡單而有效的途徑?！靖綀D說明】[0025]圖1為本發(fā)明合成路線圖。[0026]圖2為驗證本發(fā)明制備的一種聚合物具有識別作用的效果圖。【具體實施方式】[0027]下面對本發(fā)明的實施例作詳細(xì)說明:本實施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實施，給出了詳細(xì)的實施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實施例。[0028]本發(fā)明實施例的合成路線如圖1所示。[0029]實施例1:以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽(對-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉:ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐=1:40)的制備方法[0030]將引發(fā)劑對-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉(0.036mmol)，ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐1.44mmol)分別置于經(jīng)充分干燥的兩個不同試管中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮氣來回三次后，用干燥過的N，N’_二甲基甲酰胺(2mL)溶解ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐，待完全溶解后用轉(zhuǎn)移針頭聯(lián)通兩個試管，將溶解的組分通入對_5,10,15,20-四(氨基)苯基卟啉中，在25°C油浴下反應(yīng)5天。反應(yīng)完成后，在無水乙醚(50mL)中沉淀，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，除去無水乙醚。再用5mLTHF當(dāng)前第1頁1 2