本發(fā)明涉及一類多烯紫杉醇側(cè)鏈2′-衍生的新型紫杉烷類抗腫瘤化合物及其合成方法與應(yīng)用，屬于醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
癌癥已成為繼心腦血管疾病之后人類的第二大致死疾病，同時(shí)隨著環(huán)境的惡化以及人口老齡化，這一問題會(huì)更加突出。在我國，情況也不容樂觀，2013年發(fā)布的中國腫瘤登記年報(bào)稱，全國范圍內(nèi)癌癥發(fā)病形勢十分嚴(yán)峻，發(fā)病率與死亡率均呈持續(xù)上升趨勢。預(yù)計(jì)到2020年，中國每年癌癥患病總數(shù)將達(dá)660萬，死亡總數(shù)將達(dá)300萬左石。因此，全球范圍內(nèi)，抗腫瘤藥物將具有很大的市場需求。據(jù)IMS數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，自2007年超越降血脂藥物后，抗腫瘤藥物一直是全球醫(yī)藥市場的領(lǐng)頭羊。
事實(shí)證明，天然產(chǎn)物是最具潛力的抗腫瘤藥物源泉。在過去的二十多年間，有63%的抗腫瘤藥物直接或間接來源于天然產(chǎn)物。作為天然產(chǎn)物家族中的重要一員，紫杉醇及其半合成產(chǎn)物多烯紫杉醇無疑是最成功也最具代表性的抗腫瘤藥物。
1966年，紫杉醇首次被Wall和Wani從太平洋紅豆杉樹皮中提取得到，并將其命名為Taxol。因其良好的抗腫瘤活性和獨(dú)特的機(jī)理，紫杉醇在1992年被美國FDA批準(zhǔn)用于治療晚期卵巢癌，兩年后又被批準(zhǔn)用于治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌。直到目前，紫杉醇和多烯紫杉醇已被證實(shí)是最為有效的抗腫瘤藥物，在臨床上被廣泛用于卵巢癌、乳腺癌、小細(xì)胞肺癌、與AIDS相關(guān)的卡波劑氏肉瘤、膀胱癌、前列腺癌、食道癌、腦瘤、喉癌、宮頸癌以及子宮內(nèi)膜癌等多種類型癌癥的治療。隨著研究的深入，其臨床適應(yīng)癥必將會(huì)進(jìn)一步擴(kuò)大。
盡管紫杉醇和多烯紫杉醇是非常重要的抗腫瘤藥物，但是，由于水溶性差及其在化療過程中腫瘤細(xì)胞自身發(fā)展的多藥耐藥問題（MDR）而限制了他們在臨床上的廣泛運(yùn)用。為了解決腫瘤細(xì)胞耐藥的問題，擴(kuò)大紫杉醇和多烯紫杉醇在臨床上的應(yīng)用。同時(shí)，為了獲得具有選擇性的高活性紫杉醇衍生物，就需要對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種原料易得、合成簡便、具有抗腫瘤活性的多烯紫杉醇側(cè)鏈2′-衍生的新型紫杉烷類抗腫瘤化合物及其合成方法。
本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)過程如下：
結(jié)構(gòu)通式（I）所示的化合物，
X為N或O；
R為H或乙?；?；
R′為H、硝基、腈基、甲氧基或鹵素基。
結(jié)構(gòu)通式（I）所示化合物的制備方法，包括以下步驟：
（1）以天然產(chǎn)物10-去乙?；涂ㄍぃ?0-DAB）為原料進(jìn)行10-OH乙?；?，接著用三氯乙氧基甲酰氯（TrocCl）保護(hù)7-OH；
（2）用2,2-二甲氧基丙酮或?qū)谆郊兹┍Ｗo(hù)苯基異絲氨酸的2′-OH和3′-NHBoc；
（3）在DCC和DMAP存在下，（1）和（2）的產(chǎn)物進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)；
（4）在酸性介質(zhì)中脫去側(cè)鏈保護(hù)基；
（5）在縮水劑存在下，使用取代苯基異噁唑羧酸或取代苯基噁二唑羧酸與側(cè)鏈2′-OH進(jìn)行酯化反應(yīng)；
（6）脫去巴卡亭環(huán)上的羥基保護(hù)基。
具體地說，含7-OH和10-OH紫杉烷類化合物的合成方法，首先用保護(hù)基保護(hù)10-DAB中的7-OH和10-OH。
多烯紫杉醇側(cè)鏈2′-衍生的新型紫杉烷12的合成路線如下式所示。
本發(fā)明中所使用的芳基異噁唑羧酸和芳基噁二唑羧酸的結(jié)構(gòu)如下式所示。
部分典型的含多烯紫杉醇骨架的新型紫杉烷類抗腫瘤化合物的結(jié)構(gòu)如下式所示。
根據(jù)構(gòu)效關(guān)系，C13側(cè)鏈C2′-OH對保持多烯紫杉醇的抗腫瘤活性具有重要意義，取代或脫去OH活性會(huì)顯著降低甚至消失，但?；蟛粫?huì)失去活性，因?yàn)樵诩?xì)胞內(nèi)可以經(jīng)過內(nèi)源酯酶水解釋放出活性的多烯紫杉醇。因此，在保證多烯紫杉醇活性部位不變的前提下，發(fā)明人將一些含有芳基異噁唑或芳基噁二唑骨架的小分子通過酯化偶聯(lián)鍵合在C2′-OH得到C2′-芳基異噁唑和C2′-芳基噁二唑多烯紫杉醇衍生物，在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)水解釋放出活性成分。發(fā)明人預(yù)期通過這樣的協(xié)同作用，可以提高抗腫瘤活性，或者提高多藥耐藥腫瘤細(xì)胞株的敏感性?；诖耍l(fā)明人設(shè)計(jì)合成了一系列芳基異噁唑-多烯紫杉醇和芳基噁二唑多烯紫杉醇衍生物，并在體外通過MTT方法評估其對不同腫瘤細(xì)胞和對耐藥細(xì)胞的細(xì)胞毒性。
苯基異絲氨酸甲酯5選擇性保護(hù)后得6，化合物6中的亞胺基和羥基在偶聯(lián)之前需要保護(hù)，可以選擇以下幾種保護(hù)基：對甲氧基苯甲醛、2,2-二甲氧基丙烷、1,3-二氯丙酮和1,1-二氯丙酮等。
2,2-二甲氧基丙烷結(jié)構(gòu)雖然簡單，但發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在后面脫保護(hù)過程中選用的脫保護(hù)條件也可以使Boc部分脫掉；1,3-二氯丙酮和1,1-二氯丙酮?jiǎng)t屬于毒性較大的試劑；而對甲氧基苯甲醛原料易得，價(jià)格低廉，同時(shí)脫保護(hù)時(shí)條件溫和。因此，發(fā)明人選用對甲氧基苯甲醛作為保護(hù)基，可以高產(chǎn)率地得到保護(hù)產(chǎn)物7，水解后定量地得到苯基噁唑啉羧酸8，后者在DCC和DMAP的存在下，于18-52℃與2（Scheme 1）進(jìn)行脫水縮合，幾乎定量地得到化合物9。在TsOH的存在下，脫去9中側(cè)鏈的對甲氧基苯甲醛保護(hù)基，生成化合物10。接下來，10再與芳基異噁唑羧酸在DCC和DMAP存在下縮合得到化合物11。最后，11用鋅粉還原除去保護(hù)基Troc，得到2′-衍生的新型紫杉烷抗腫瘤化合物12。
含7-OH和10-乙酰化紫杉烷的合成如下式所示，在催化劑存在下，用?；噭┛梢赃x擇性地使10-DAB的10-OH?；玫疆a(chǎn)物13，產(chǎn)率幾乎是定量的。因?yàn)榇呋瘎┛膳cC9和C10的兩個(gè)氧原子螯合，使C10-OH活化，故優(yōu)先被酰化。
接著用TrocCl保護(hù)13 的7-OH，通過偶聯(lián)反應(yīng)和脫保護(hù)基等步驟，其過程與合成2′-衍生的新型紫杉烷類抗腫瘤化合物12（Scheme 2）基本相同，只是得到的最終產(chǎn)物是2′-衍生的新型紫杉烷類抗腫瘤化合物18而不是12。
本發(fā)明的設(shè)計(jì)思路是在保持多烯紫杉醇整體骨架包括C13側(cè)鏈的(2′R,3′S)立體構(gòu)型不變的情況下，通過酯化作用在C2′-OH位引入這兩種生物活性的小分子片段得到一系列新的紫杉烷衍生物，并在體外通過MTT方法評估其對不同腫瘤細(xì)胞（正常的和耐藥株）的抗增殖活性，篩選出具有較高活性的紫杉烷衍生物做為候選藥物。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1 7,10-diTroc-巴卡亭2的合成
于63-95℃條件下，將三氯乙氧基羰酰氯（TrocCl）20.5 mmol緩慢滴加到用吡啶溶解的10-DAB（10 mmol）1中，磁力攪拌，TLC（石油醚-AcOEt）監(jiān)測反應(yīng)完全后將反應(yīng)液冷卻至室溫并減壓除去吡啶，剩余物用AcOEt/H2O溶解稀釋后用HCl調(diào)溶液pH為中性。溶液靜置分層，分出有機(jī)相，水相用AcOEt萃取，合并有機(jī)相并依次用H2O、飽和食鹽水洗滌、無水MgSO4干燥，經(jīng)減壓除去溶劑得粗品，經(jīng)柱層析得到7,10-diTroc-巴卡亭2，產(chǎn)率：87.4%，m.p. 233.1-234.2℃。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.13 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.63 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.50 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 5.73 – 5.55 (m, 2H), 5.05 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.82 (dd, J = 9.6, 2H), 4.63 (dd, J = 9.6, 2H), 4.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.03 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.54 – 3.46 (m, 1H), 2.72 – 2.59 (m, 1H), 2.31 (s, 5H), 2.14 (s, 3H), 2.09 – 2.01 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.71 (s, 1H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 170.77, 166.96, 153.24, 153.18,146.52, 133.77, 130.09, 129.22, 128.68, 94.57, 94.40, 83.82, 80.46, 78.68, 77.15, 77.08, 76.60, 76.36, 74.28, 67.83, 60.57, 56.19, 42.75, 38.46, 33.25, 26.68, 22.56, 21.12, 20.18, 15.31, 14.27, 10.64. HRMS(FAB): calcd for C35H38Cl6O14 (M+NH4+): 912.0707, found: 912.0709.
實(shí)施例2 10-Ac-巴卡亭13的合成
將醋酸酐0.2 mol加入用無水THF 80 mL溶解的10-DAB 10 mmol和ZnCl2 20 mmol溶液中，室溫條件下反應(yīng)，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后向其中加入AcOEt/H2O并用糊狀NaHCO3調(diào)溶液pH為堿性。靜置分層，分出有機(jī)相，水相用AcOEt萃取，合并有機(jī)相并依次用H2O、飽和食鹽水洗滌、無水MgSO4干燥，經(jīng)減壓除去溶劑得粗品，重結(jié)晶后得到10-Ac-巴卡亭13純品，系白色固體，產(chǎn)率：93%。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.63 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.50 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 6.34 (s, 1H), 5.64 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.48 (dd, J = 10.5, 6.8 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 2.66 – 2.46 (m, 2H), 2.34 – 2.28 (m, J = 7.1 Hz, 5H), 2.26 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.95 – 1.82 (m, 2H), 1.73 (s, 1H), 1.68 (s, 3H), 1.12 (s, 6H).13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 204.19, 171.37, 170.67, 167.06, 146.45, 133.70, 131.79, 130.10, 129.32, 128.65, 84.46, 80.77, 79.08, 76.44, 76.24, 74.92, 72.30, 67.92, 58.69, 46.14, 42.70, 38.61, 35.60, 26.96, 22.59, 20.92, 15.60, 9.44.
實(shí)施例3 7-Troc-10-Ac-巴卡亭14的合成
于50-93℃條件下，將三氯乙氧基羰酰氯（TrocCl）9.8 mmol緩慢滴加到用吡啶溶解的化合物13（9.3 mmol）中，磁力攪拌，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后將反應(yīng)液冷卻至室溫并除去吡啶，剩余物用AcOEt/H2O溶解稀釋后用HCl調(diào)解溶液pH為弱堿性。溶液靜置分層，分出有機(jī)相，水相用AcOEt萃取，合并有機(jī)相并依次用H2O、飽和食鹽水洗滌、無水MgSO4干燥，除去溶劑得粗品，經(jīng)柱層析得到7-Troc-10-Ac-巴卡亭12，產(chǎn)率84.2%。m.p.154.8-158.2℃。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.63 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.50 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 6.40 (s, 1H), 5.73 – 5.55 (m, 2H), 5.05 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.89 (dd, J = 13.9, 5.3 Hz, 1H), 4.66 (dd, J = 12.0, 0.9 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.03 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.54 – 3.46 (m, 1H), 2.72 – 2.59 (m, 1H), 2.31 (s, 5H), 2.18 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.09 – 2.01 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.71 (s, 1H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 201.98, 170.77, 169.20, 166.96, 153.24, 145.07, 133.77, 131.60, 130.09, 129.22, 128.68, 94.57, 83.82, 80.46, 78.68, 76.32, 75.92, 74.28, 67.83, 65.87, 56.19, 47.39, 42.75, 38.46, 33.25, 26.68, 22.56, 20.82, 20.18, 15.27, 10.64. HRMS(FAB): calcd for C34H39Cl3O13 (M+NH4+): 778.1800, found: 778.1804.
實(shí)施例4 (2′R,3′S)-N-Boc-苯基異絲氨酸甲酯6的合成
將用CH2Cl2溶解的(Boc)2O 50 mmol加入用CH2Cl2/H2O溶解的(2′R,3′S)-苯基異絲氨酸甲酯50 mmol和氫氧化鉀3.58 g溶液中，室溫下反應(yīng)進(jìn)行，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后向反應(yīng)液中加入H2O，靜置分層，分出有機(jī)相，水相用CH2Cl2萃取，合并有機(jī)相并用水洗滌、無水MgSO4干燥。除去溶劑得粗品，重結(jié)晶得到(2′R,3′S)-N-Boc-苯基異絲氨酸甲酯，產(chǎn)率93.2%。
實(shí)施例5 苯基噁唑啉羧酸甲酯化合物7的合成
將46.4 mmol化合物6、對甲氧基苯甲醛51 mmol和對甲苯磺酸吡啶嗡0.1 g用甲苯溶解、回流，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后冷卻至室溫，除去溶劑得到化合物7。
實(shí)施例6 苯基噁唑啉羧酸8的合成
將上述產(chǎn)物7用MeOH溶解，加入稀NaOH，室溫下攪拌，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后除去MeOH，剩余物用AcOEt/H2O溶解稀釋，靜置分層。向水相中加入AcOEt，并用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為酸性。混合液靜置分層，分出有機(jī)相，水相用AcOEt萃取，合并有機(jī)相并水洗滌、無水MgSO4干燥，除去溶劑，得到苯基噁唑啉羧酸8，兩步總產(chǎn)率92%，m.p.132-133℃。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.50 – 7.31 (m, 7H), 6.94 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 5.42 (s, 1H), 4.64 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H).13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 172.73, 160.44, 151.71, 128.89, 128.33, 128.17, 126.32, 114.00, 92.44, 82.57, 81.14, 63.68, 55.32, 27.82.
實(shí)施例7 偶聯(lián)產(chǎn)物9的合成
將11 mmol苯基噁唑啉羧酸 8、10 mmol 7,10-diTroc-巴卡亭2、20 mmol DCC和1 mmol DMAP用CH2Cl2溶解，室溫下反應(yīng)至反應(yīng)完全。濾出不溶物，濾液經(jīng)減壓除去溶劑得到偶聯(lián)產(chǎn)物 9。
實(shí)施例8 脫側(cè)鏈保護(hù)基產(chǎn)物10的合成
將上述偶聯(lián)產(chǎn)物粗品和對甲苯磺酸10 mmol用MeOH溶解，室溫下反應(yīng)，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全。反應(yīng)液經(jīng)減壓除去溶劑得脫側(cè)鏈保護(hù)基產(chǎn)物粗品，用柱層析純化，得白色粉末產(chǎn)物10。
：兩步總產(chǎn)率：92.1%。m.p.（159.5-161.2℃）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.64 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.46 – 7.32 (m, 5H), 6.30 – 6.18 (m, 2H), 5.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.62 – 5.52 (m, 1H), 5.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.34 – 5.23 (m, 1H), 4.97 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 4.69 – 4.57 (m, 2H), 4.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 2.71 – 2.58 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.34 (s, 2H), 2.13 – 2.03 (m, 1H), 1.97 (s, 4H), 1.87 (s, 3H), 1.72 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.29 (s, 3H), 1.22 (s, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 200.77, 170.39, 166.90, 155.41, 153.22, 142.56, 133.85, 131.98, 130.19, 128.94, 128.89, 128.76, 128.13, 126.78, 94.19, 83.67, 80.76, 80.29, 79.16, 78.64, 76.38, 74.16, 73.56, 72.26, 56.23, 46.88, 43.15, 35.29, 33.28, 28.21, 26.32, 22.54, 20.97, 14.71, 10.72. HRMS(FAB): calcd for C49H55Cl6NO18 (M+NH4+): 1175.1865, found: 1175.1835.
實(shí)施例9 C2′-芳基異噁唑-多烯紫杉醇偶聯(lián)產(chǎn)物11的合成
將不同取代的0.11 mmol芳基異噁唑羧酸、0.1 mmol化合物10、0.2 mmol DCC和10 mg DMAP用CH2Cl2溶解，室溫條件下反應(yīng)大約1 h-4.5 h，TLC（石油醚-AcOEt）監(jiān)測反應(yīng)。濾出不溶物，濾液經(jīng)減壓除去溶劑得C2′-芳基異噁唑-多烯紫杉醇偶聯(lián)產(chǎn)物11粗品，未經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)。
實(shí)施例10 C2′-衍生的新型紫杉烷類抗腫瘤化合物12的合成
將0.1 mmol偶聯(lián)產(chǎn)物11粗品、2 mmol Zn粉和0.26 mL AcOH用AcOEt溶解，室溫下反應(yīng)，TLC監(jiān)測反應(yīng)。濾出Zn粉，濾液用飽和NaHCO3溶液調(diào)pH為堿性?；旌弦红o置分層，分出有機(jī)相，水相用AcOEt萃取，合并有機(jī)相并用水洗滌，無水MgSO4干燥，除去溶劑得粗品，經(jīng)柱層析純化，得目標(biāo)產(chǎn)物12。
：兩步總產(chǎn)率79.2%。m.p.（154.6-156.4℃）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.85 (br, s, 1H), 7.61 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.52 (br, s, 5H), 7.46 – 7.37 (m, 5H), 7.35 (br, s, 1H), 6.47 – 6.14 (m, 1H), 5.70 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.65 – 5.48 (m, 2H), 5.25 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.07 – 4.89 (m, 1H), 4.38 – 4.18 (m, 4H), 3.94 (dd, J = 18.3, 6.8 Hz, 1H), 2.67 – 2.54 (m, 1H), 2.49 (s, 1H), 2.39 (s, 2H), 2.27 (s, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.86 (s, 2H), 1.77 (s, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.25 (s, 6H), 1.14 (s, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 211.41, 170.32, 169.71, 167.15, 167.01, 163.18, 159.33, 155.68, 155.38, 138.90, 138.45, 135.83, 133.69, 130.92, 130.80, 130.18, 129.19, 129.09, 128.83, 128.72, 128.05, 127.60, 126.92, 126.76, 126.55, 108.95, 84.20, 81.07, 78.92, 78.80, 76.01, 75.02, 74.83, 74.51, 72.53, 71.93, 65.59, 57.63, 49.25, 46.45, 43.10, 36.93, 35.75, 33.89, 30.57, 28.17, 26.46, 26.36, 25.60, 24.91, 22.69, 22.57, 20.91, 19.19, 14.29, 13.73, 9.91. HRMS(FAB): calcd for C53H58N2O16 (M+H+): 979.3865, found: 979.3847.
實(shí)施例11 體外抗腫瘤細(xì)胞增殖活性評價(jià)
發(fā)明人采用不同的腫瘤細(xì)胞株Hela（宮頸癌細(xì)胞）、A549（肺癌細(xì)胞）、A2780（卵巢癌細(xì)胞）、MCF-7（乳腺癌細(xì)胞）以及多藥耐藥腫瘤細(xì)胞株A2780-MDR和MCF-7-MDR等6種細(xì)胞株，以多烯紫杉醇（Docetaxel）作為陽性對照，通過MTT方法評價(jià)16個(gè)新型芳基異噁唑-多烯紫杉醇衍生物對不同腫瘤細(xì)胞的抗增殖活性。
對于A549細(xì)胞，化合物12f、12g、18b、18d和18f表現(xiàn)出與多烯紫杉醇相似的抑制活性。對于A2780細(xì)胞，化合物12d、12h、18a、18b、18d、18e、18g和18h表現(xiàn)出較好的抑制活性，其中12d、18b和18d的抑制活性比多烯紫杉醇強(qiáng)2倍。對于MCF-7細(xì)胞，化合物12c、12d、12f、12g、18a、18b、18d、18g和18h表現(xiàn)出與多烯紫杉醇相似的活性。
從橫向分析，化合物18b對Hela、A549、A2780和MCF-7均表現(xiàn)出較好的抑制活性，其中對Hela細(xì)胞的抑制活性比多烯紫杉醇強(qiáng)3倍?；衔?8c雖然對A549、A2780和MCF-7沒有表現(xiàn)出較好的抑制活性，但是其選擇性抑制Hela細(xì)胞的能力比多烯紫杉醇強(qiáng)4倍?；衔?8g除了對A549表現(xiàn)不佳外，對Hela、A2780和MCF-7均表現(xiàn)出較好的活性。值得注意的是，化合物18h表現(xiàn)出選擇性優(yōu)先抑制Hela細(xì)胞的能力，其活性比多烯紫杉醇強(qiáng)5倍。
整體上看，C10位被乙?；幕衔锏囊种苹钚砸糜跊]有被乙?；?，這在18a、18b、18c、18g和18h對Hela細(xì)胞的抑制活性中表現(xiàn)的尤其明顯。這說明C10乙?；谝欢ǔ潭壬峡梢栽黾舆@些化合物對腫瘤細(xì)胞的抑制活性。
更為重要的是，所有這些化合物均不同程度提高了兩個(gè)耐藥腫瘤細(xì)胞A2780-MDR和MCF-7-MDR對多烯紫杉醇的敏感性。對于A2780-MDR細(xì)胞來說，化合物12c、12d、12e、12g和12d表現(xiàn)較好，其中化合物12g的活性比多烯紫杉醇強(qiáng)15倍。對于MCF-7-MDR，化合物18f和18h的抑制活性比多烯紫杉醇強(qiáng)10倍。
根據(jù)以上結(jié)果，發(fā)明人認(rèn)為C2′-芳基異噁唑-多烯紫杉醇衍生物在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)水解釋放出活性成分，兩部分共同發(fā)揮作用，使抗腫瘤活性有所提高。至于二者之間是相互獨(dú)立或者相互協(xié)同發(fā)揮作用還需進(jìn)一步研究。