背景技術(shù)：

1、b型血友病是一種罕見的先天性遺傳性疾病，其特征在于凝血因子ix(fix)的缺乏或不存在，從而導(dǎo)致出血傾向。它是由因子9(f9)基因的遺傳性或自發(fā)性x連鎖隱性突變引起的，導(dǎo)致缺失或缺陷的fix蛋白。b型血友病的全球發(fā)病率約為每25,000名活產(chǎn)男嬰中1例。在美國，2019年的最新全球血友病調(diào)查報道了4,093名b型血友病患者，全世界總共31,997名b型血友病患者。world?federation?of?hemophilia,“report?on?the?annualglobal?survey?2019”world?federation?of?hemophilia(2020)。

2、由于x連鎖隱性突變，b型血友病主要影響男性，但女性攜帶者也可能受到影響。b型血友病的出血傾向與所測量的因子濃度有關(guān)，并且被分類為輕度、中度或重度。在嚴(yán)重和中度嚴(yán)重的b型血友病病例中，頻繁的自發(fā)性出血事件是最常見的癥狀。此類流血事件可能發(fā)生在肌肉和關(guān)節(jié)中，引起疼痛和運(yùn)動限制，并且如果不進(jìn)行治療，則可能導(dǎo)致關(guān)節(jié)的長期損傷，伴有滑膜炎、關(guān)節(jié)病和肌肉無力。

3、美國目前的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)是用凝血因子濃縮物(cfc)預(yù)防和治療出血事件，這些凝血因子濃縮物是重組的或來源于血液供體的血漿。然而，在3％-4％的cfc輸注中可能發(fā)生過敏反應(yīng)，并且約5％的患者在重復(fù)施用后會產(chǎn)生fix中和抗體。srivastava等人“wfhguidelines?for?the?management?of?hemophilia,”haemophilia?26.6:1-158(2020)。因子替換也是繁瑣的(需要頻繁的靜脈內(nèi)施用)、昂貴的，并且減少但不能消除出血事件，這仍然導(dǎo)致關(guān)節(jié)疾病的進(jìn)展和殘疾。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、提供了包含含有第一因子ix蛋白編碼序列或該第一因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列的核酸構(gòu)建體的組合物、包含該組合物的細(xì)胞以及使用此類核酸構(gòu)建體的方法，諸如將因子9核酸引入細(xì)胞內(nèi)的方法、將因子9核酸構(gòu)建體整合到細(xì)胞中的靶基因內(nèi)的方法、在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)因子ix的方法、治療受試者的因子ix缺乏的方法、治療受試者的b型血友病的方法以及預(yù)防或抑制患有b型血友病的受試者的自發(fā)性出血的方法。

2、在一個方面，提供了包含核酸構(gòu)建體的組合物，該核酸構(gòu)建體包含第一因子ix蛋白編碼序列或該第一因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166、165、164和167-171中的任一者至少95％相同，任選地其中因子ix蛋白編碼序列是cpg耗盡的并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(ii)與seq?id?no:159、160和161中的任一者至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

3、在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；(ii)與seq?id?no:165至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(iii)與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

4、在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(ii)與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

5、在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:165至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?id?no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166、165或159。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166、165或159組成。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166或159。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166或159組成。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列由seqid?no:166組成。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:165組成。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:159組成。

6、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體包含位于第一因子ix蛋白編碼序列上游的剪接受體。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體包含位于第一因子ix蛋白編碼序列下游的聚腺苷酸化信號。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體包含位于第一因子ix蛋白編碼序列上游的剪接受體，并且核酸構(gòu)建體包含位于第一因子ix蛋白編碼序列下游的聚腺苷酸化信號。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子。

7、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列，或者其中核酸構(gòu)建體包含第一因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二因子ix蛋白編碼序列。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列和第二因子ix蛋白編碼序列是不同的，但編碼相同的因子ix蛋白序列，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

8、在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少95％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

9、在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:165至少95％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

10、在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

11、在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:165至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。

12、在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的，并且第二因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的。

13、在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?id?no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體，并且第二因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?id?no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼包含seqid?no:195的因子ix蛋白，并且第二因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白。

14、在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:159組成；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166組成。

15、在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。在一些此類組合物中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:159組成；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:165組成。

16、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，或者其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第二因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第一因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列和第二因子ix蛋白編碼序列是不同的，但編碼相同的因子ix蛋白序列，并且其中第一聚腺苷酸化信號和第二聚腺苷酸化信號是不同的。

17、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?idno:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。

18、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體包含seq?id?no:210或180或其反向互補(bǔ)序列。

19、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?idno:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。

20、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體包含seq?id?no:209或179或其反向互補(bǔ)序列。

21、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna或雙鏈dna。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體或脂質(zhì)納米顆粒中。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體中。在一些此類組合物中，核酸載體是病毒載體。在一些此類組合物中，核酸載體是腺相關(guān)病毒(aav)載體，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，aav載體是單鏈aav(ssaav)載體。在一些此類組合物中，aav載體來源于aav8載體、aav3b載體、aav5載體、aav6載體、aav7載體、aav9載體、aavrh.74載體或aavhu.37載體。在一些此類組合物中，aav載體是重組aav8(raav8)載體。在一些此類組合物中，aav載體是單鏈raav8載體。

22、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?idno:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?idno:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。

23、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?idno:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?idno:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。

24、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是單向構(gòu)建體。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

25、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是單向構(gòu)建體。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

26、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna或雙鏈dna。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體或脂質(zhì)納米顆粒中。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體中。在一些此類組合物中，核酸載體是病毒載體。在一些此類組合物中，核酸載體是腺相關(guān)病毒(aav)載體，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，aav載體是單鏈aav(ssaav)載體。在一些此類組合物中，aav載體來源于aav8載體、aav3b載體、aav5載體、aav6載體、aav7載體、aav9載體、aavrh.74載體或aavhu.37載體。在一些此類組合物中，aav載體是重組aav8(raav8)載體。在一些此類組合物中，aav載體是單鏈raav8載體。

27、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

28、在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。在一些此類組合物中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

29、一些此類組合物還包含靶向靶基因中的核酸酶靶位點(diǎn)的核酸酶藥劑。在一些此類組合物中，靶基因是白蛋白基因，任選地其中白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此類組合物中，核酸酶藥劑包含：(a)鋅指核酸酶(zfn)；(b)轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶(talen)；或者(c)(i)cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸；以及(ii)向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna，其中向?qū)na包含靶向向?qū)na靶序列的dna靶向區(qū)段，并且其中向?qū)na與cas蛋白結(jié)合并且將cas蛋白靶向到向?qū)na靶序列。在一些此類組合物中，核酸酶藥劑包含：(a)cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸；以及(b)向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna，其中向?qū)na包含靶向白蛋白基因的內(nèi)含子1中的向?qū)na靶序列的dna靶向區(qū)段，并且其中向?qū)na與cas蛋白結(jié)合并且將cas蛋白靶向到向?qū)na靶序列。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因。

30、在一些此類組合物中：(i)dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:30-61中的任一者所示序列中的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸，任選地其中dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36、30、33和41中的任一者所示序列中的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向區(qū)段與seq?id?no:30-61中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同，任選地其中dna靶向區(qū)段與seq?id?no:36、30、33和41中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:30-61中的任一者，任選地其中dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36、30、33和41中的任一者。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段由seq?id?no:30-61中的任一者組成，任選地其中dna靶向區(qū)段由seq?id?no:36、30、33和41中的任一者組成。在一些此類組合物中，向?qū)na包含seqid?no:62-125中的任一者，任選地其中向?qū)na包含seq?id?no:68、100、62、94、65、97、73和105中的任一者。

31、在一些此類組合物中：(i)dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向區(qū)段與seq?id?no:36至少90％或至少95％相同。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段由seq?id?no:36組成。在一些此類組合物中，向?qū)na包含seq?id?no:68或100。

32、在一些此類組合物中：(i)dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:30的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向區(qū)段與seq?id?no:30至少90％或至少95％相同。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:30。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段由seq?id?no:30組成。在一些此類組合物中，向?qū)na包含seq?id?no:62或94。

33、在一些此類組合物中：(i)dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:33的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向區(qū)段與seq?id?no:33至少90％或至少95％相同。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:33。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段由seq?id?no:33組成。在一些此類組合物中，向?qū)na包含seq?id?no:65或97。

34、在一些此類組合物中：(i)dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:41的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向區(qū)段與seq?id?no:41至少90％或至少95％相同。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:41。在一些此類組合物中，dna靶向區(qū)段由seq?id?no:41組成。在一些此類組合物中，向?qū)na包含seq?id?no:73或105。

35、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na。在一些此類組合物中，向?qū)na包含至少一種修飾。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括向?qū)na的5'端處的前五個核苷酸中的一個或多個核苷酸處的修飾。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括向?qū)na的3'端處的最后五個核苷酸中的一個或多個核苷酸處的修飾。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。在一些此類組合物中，該至少一種修飾包括：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。

36、在一些此類組合物中，向?qū)na是單向?qū)na(sgrna)。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。

37、在一些此類組合物中，向?qū)na是單向?qū)na(sgrna)。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。

38、在一些此類組合物中，向?qū)na是單向?qū)na(sgrna)。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。

39、在一些此類組合物中，向?qū)na是單向?qū)na(sgrna)。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。

40、在一些此類組合物中，cas蛋白是cas9蛋白。在一些此類組合物中，cas蛋白是或來源于釀膿鏈球菌(streptococcus?pyogenes)cas9蛋白。在一些此類組合物中，cas蛋白包含seq?id?no:11所示的序列。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的核酸被密碼子優(yōu)化以在哺乳動物細(xì)胞或人細(xì)胞中表達(dá)。在一些此類組合物中，該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna包含至少一種修飾。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna被修飾以在一個或多個或所有尿苷位置處包含經(jīng)修飾的尿苷。在一些此類組合物中，經(jīng)修飾的尿苷是假尿苷或n1-甲基-假尿苷，任選地n1-甲基-假尿苷。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代。在一些此類組合物中，經(jīng)修飾的尿苷是假尿苷。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna包含5'帽。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。

41、在一些此類組合物中，該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

42、在一些此類組合物中，該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

43、在一些此類組合物中，該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

44、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

45、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

46、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

47、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

48、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

49、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

50、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

51、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

52、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

53、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

54、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

55、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

56、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

57、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

58、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

59、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

60、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

61、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

62、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

63、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

64、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

65、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

66、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

67、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

68、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

69、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

70、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

71、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

72、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

73、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

74、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

75、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

76、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

77、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

78、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

79、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

80、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

81、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

82、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

83、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

84、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

85、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

86、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

87、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

88、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

89、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

90、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

91、在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

92、在一些此類組合物中，cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸和向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna與脂質(zhì)納米顆粒締合。在一些此類組合物中，脂質(zhì)納米顆粒包含陽離子脂質(zhì)、中性脂質(zhì)、輔助脂質(zhì)(helper?lipid)和隱形脂質(zhì)(stealth?lipid)。在一些此類組合物中，陽離子脂質(zhì)是脂質(zhì)a。在一些此類組合物中，中性脂質(zhì)是dspc。在一些此類組合物中，輔助脂質(zhì)是膽固醇。在一些此類組合物中，隱形脂質(zhì)是1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇-2000(peg2k-dmg)。在一些此類組合物中，陽離子脂質(zhì)是脂質(zhì)a，中性脂質(zhì)是dspc，輔助脂質(zhì)是膽固醇，并且隱形脂質(zhì)是peg2k-dmg。在一些此類組合物中，脂質(zhì)納米顆粒包含以下摩爾比的四種脂質(zhì)：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。

93、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

94、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

95、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

96、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

97、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

98、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?idno:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

99、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

100、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

101、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

102、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

103、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

104、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

105、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

106、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

107、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

108、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

109、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

110、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

111、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

112、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

113、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

114、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

115、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

116、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

117、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

118、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

119、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

120、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

121、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

122、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

123、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

124、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:225所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

125、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

126、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

127、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

128、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:62或94，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

129、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

130、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:65或97，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

131、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

132、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:73或105，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

133、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

134、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

135、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

136、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:94，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

137、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

138、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:97，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

139、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

140、在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?idno:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該組合物包含呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:105，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該組合物包含編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列的雙向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類組合物中，核酸構(gòu)建體是包含第一因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seqid?no:165，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:165。任選地，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

141、在一些此類組合物中，該組合物用于在將因子9核酸引入細(xì)胞內(nèi)的方法、將因子9核酸構(gòu)建體整合到細(xì)胞中的靶基因內(nèi)的方法或在細(xì)胞中表達(dá)因子ix的方法中使用。在一些此類組合物中，該組合物用于在治療受試者的因子ix缺乏的方法中使用。在一些此類組合物中，該組合物用于在治療受試者的b型血友病的方法中使用。在一些此類組合物中，細(xì)胞是新生兒細(xì)胞。在一些此類組合物中，新生兒細(xì)胞來自出生后24周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類組合物中，新生兒細(xì)胞來自出生后12周內(nèi)的人類新生兒受試者。新生兒細(xì)胞來自出生后8周內(nèi)的人類新生兒受試者。新生兒細(xì)胞來自出生后4周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類組合物中，細(xì)胞不是新生兒細(xì)胞。在一些此類組合物中，受試者是新生兒受試者。在一些此類組合物中，新生兒受試者是出生后24周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類組合物中，新生兒受試者是出生后12周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類組合物中，新生兒受試者是出生后8周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類組合物中，新生兒受試者是出生后4周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類組合物中，受試者不是新生兒受試者。

142、在另一方面，提供了包含任何上述組合物的細(xì)胞。在一些此類細(xì)胞中，核酸構(gòu)建體被整合到內(nèi)源靶基因座中，并且其中因子ix蛋白從內(nèi)源靶基因座表達(dá)，或者其中核酸構(gòu)建體被整合到內(nèi)源白蛋白基因座的內(nèi)含子1中，并且其中因子ix蛋白從內(nèi)源白蛋白基因座表達(dá)。一些此類細(xì)胞是人細(xì)胞。一些此類細(xì)胞是肝臟細(xì)胞(例如，人肝臟細(xì)胞)。任選地，肝臟細(xì)胞是肝細(xì)胞。在一些此類細(xì)胞中，細(xì)胞是新生兒細(xì)胞。在一些此類細(xì)胞中，新生兒細(xì)胞來自出生后24周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類細(xì)胞中，新生兒細(xì)胞來自出生后12周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類細(xì)胞中，新生兒細(xì)胞來自出生后8周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類細(xì)胞中，新生兒細(xì)胞來自出生后4周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類細(xì)胞中，細(xì)胞不是新生兒細(xì)胞。在一些此類細(xì)胞中，細(xì)胞是離體的或體外的。在一些此類細(xì)胞中，組織是體內(nèi)的。

143、在另一方面，提供了將因子9核酸引入細(xì)胞內(nèi)的方法、將因子9核酸構(gòu)建體整合到細(xì)胞中的靶基因內(nèi)的方法以及在細(xì)胞中表達(dá)因子ix的方法。一些此類方法用于將因子9核酸引入細(xì)胞中，包括向細(xì)胞施用任何上述組合物。一些此類方法用于將因子9核酸構(gòu)建體整合到細(xì)胞中的靶基因內(nèi)，包括向細(xì)胞施用任何上述組合物，其中核酸酶藥劑切割靶基因中的核酸酶靶位點(diǎn)以形成切割位點(diǎn)，核酸構(gòu)建體被插入切割位點(diǎn)以形成經(jīng)修飾的靶基因，并且因子ix蛋白從經(jīng)修飾的靶基因表達(dá)。一些此類方法用于在細(xì)胞中表達(dá)因子ix，包括向細(xì)胞施用任何上述組合物，其中核酸酶藥劑切割靶基因中的核酸酶靶位點(diǎn)以形成切割位點(diǎn)，核酸構(gòu)建體被插入切割位點(diǎn)以形成經(jīng)修飾的靶基因，并且因子ix蛋白從經(jīng)修飾的靶基因表達(dá)。

144、在一些此類方法中，核酸酶藥劑包含：(a)cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸；以及(b)向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna，其中向?qū)na包含靶向向?qū)na靶序列的dna靶向區(qū)段，并且其中向?qū)na與cas蛋白結(jié)合并且將cas蛋白靶向到向?qū)na靶序列。

145、在一些此類方法中，同時施用核酸構(gòu)建體、cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸以及向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體不與cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸和向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna同時施用。

146、在一些此類方法中，靶基因是白蛋白基因，并且核酸酶靶位點(diǎn)處于白蛋白基因的內(nèi)含子1中。在一些此類方法中，細(xì)胞是肝臟細(xì)胞。在一些此類方法中，細(xì)胞是肝細(xì)胞。在一些此類方法中，細(xì)胞是人細(xì)胞(例如，人肝臟細(xì)胞)。在一些此類方法中，細(xì)胞是新生兒細(xì)胞。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞來自出生后24周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞來自出生后12周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞來自出生后8周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞來自出生后4周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，細(xì)胞不是新生兒細(xì)胞。在一些此類方法中，組織是體內(nèi)的。在一些此類方法中，細(xì)胞是體外的或離體的。

147、在另一方面，提供了治療受試者的因子ix缺乏的方法、治療受試者的b型血友病的方法以及預(yù)防或抑制患有b型血友病的受試者的自發(fā)性出血的方法。一些此類方法用于治療受試者的因子ix缺乏，包括向受試者施用任何上述組合物。一些方法用于治療受試者的b型血友病，包括向受試者施用任何上述組合物。一些方法用于預(yù)防或抑制患有b型血友病的受試者的自發(fā)性出血，包括向受試者施用任何上述組合物。

148、在一些此類方法中，b型血友病是輕度b型血友病。在一些此類方法中，b型血友病是中度b型血友病。在一些此類方法中，b型血友病是重度b型血友病。

149、在一些此類方法中，核酸酶藥劑包含：(a)cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸；以及(b)向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna，其中向?qū)na包含靶向向?qū)na靶序列的dna靶向區(qū)段，并且其中向?qū)na與cas蛋白結(jié)合并且將cas蛋白靶向到向?qū)na靶序列。在一些此類方法中，向?qū)na靶序列處于白蛋白基因的內(nèi)含子1中。

150、在一些此類方法中，同時施用核酸構(gòu)建體、cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸以及向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體不與cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸和向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna同時施用。

151、在一些此類方法中，受試者是人受試者。在一些此類方法中，受試者是新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后24周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后12周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后8周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后4周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，受試者不是新生兒受試者。

152、在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中治療有效水平的循環(huán)因子ix蛋白。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中治療有效水平的循環(huán)因子ix凝血活性。在一些此類方法中，與包括向?qū)φ帐茉囌呤┯镁幋a因子ix蛋白的游離型表達(dá)載體的方法相比，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的表達(dá)增加。在一些此類方法中，與包括向?qū)φ帐茉囌呤┯镁幋a因子ix蛋白的游離型表達(dá)載體的方法相比，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平增加。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平為至少約1μg/ml、至少約2μg/ml、至少約3μg/ml、至少約4μg/ml或至少約5μg/ml。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平為至少約5μg/ml。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平介于約1μg/ml和約10μg/ml之間。

153、在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約1％、正常值的至少約5％、正常值的至少約10％、正常值的至少約15％、正常值的至少約20％、正常值的至少約25％、正常值的至少約30％、正常值的至少約35％、正常值的至少約40％、正常值的至少約45％或正常值的至少約50％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)介于正常值的約40％和約150％之間或介于約40％和約100％之間的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。

154、在一些此類方法中：(i)受試者患有重度血友病，并且該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約1％或超過約1％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平；(ii)受試者患有中度血友病，并且該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約5％或超過約5％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平；(iii)受試者患有輕度血友病，并且該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約35％、至少約40％、至少約45％、至少約50％、超過約10％、超過約15％、超過約20％、超過約25％、超過約30％、超過約35％、超過約40％、超過約45％或超過約50％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。

155、在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約15％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。

156、在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)小于正常值的約300％、小于約250％、小于約200％或小于約150％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。

157、在一些此類方法中，該方法使循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平比受試者的基線因子ix蛋白或凝血活性水平增加至少約1％、至少約5％、至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約35％、至少約40％、至少約45％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％、至少約90％或至少約100％。

158、在一些此類方法中，循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平在施用組合物后維持至少約1個月、至少約2個月、至少約3個月、至少約6個月、至少約1年或至少約2年。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后六個月時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少50％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后一年時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少50％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后六個月時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少60％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后兩年時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少50％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后兩年時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少60％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后六個月時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少60％。

159、在一些此類方法中，該方法還包括在向受試者施用組合物之前評估受試者的預(yù)先存在的aav免疫力。在一些此類方法中，預(yù)先存在的aav免疫力是預(yù)先存在的aav8免疫力。在一些此類方法中，評估預(yù)先存在的aav免疫力包括使用總抗體免疫測定或中和抗體測定來評估免疫原性。

160、本發(fā)明還提供了用于將編碼因子ix蛋白的核酸插入新生兒細(xì)胞、新生兒細(xì)胞群體或新生兒受試者中的靶基因組基因座內(nèi)或者用于從新生兒細(xì)胞、新生兒細(xì)胞群體或新生兒受試者中的靶基因組基因座表達(dá)編碼因子ix蛋白的核酸的組合物和方法。本發(fā)明還提供了治療因子ix缺乏的方法、預(yù)防或抑制自發(fā)性出血的方法以及治療受試者(例如，新生兒受試者)的b型血友病的方法。本發(fā)明還提供了包含插入靶基因組基因座中的編碼因子ix蛋白的核酸的新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體。

161、在一個方面，提供了將編碼因子ix蛋白的核酸插入新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中的靶基因組基因座內(nèi)的方法。一些此類方法包括向新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體施用：(a)核酸構(gòu)建體，該核酸構(gòu)建體包含因子ix蛋白編碼序列；以及(b)核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸，其中核酸酶藥劑靶向靶基因組基因座中的核酸酶靶位點(diǎn)，其中核酸酶藥劑切割核酸酶靶位點(diǎn)，并且核酸構(gòu)建體被插入靶基因組基因座中。在另一方面，提供了從新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中的靶基因組基因座表達(dá)因子ix蛋白的方法。一些此類方法包括向新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體施用：(a)核酸構(gòu)建體，該核酸構(gòu)建體包含因子ix蛋白編碼序列；以及(b)核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸，其中核酸酶藥劑靶向靶基因組基因座中的核酸酶靶位點(diǎn)，其中核酸酶藥劑切割核酸酶靶位點(diǎn)，核酸構(gòu)建體被插入靶基因組基因座中以形成經(jīng)修飾的靶基因組基因座，并且因子ix蛋白從經(jīng)修飾的靶基因組基因座表達(dá)。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是肝臟細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是肝臟細(xì)胞群體。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是肝細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是肝細(xì)胞群體。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是人細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是人細(xì)胞群體。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后24周內(nèi)的新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后12周內(nèi)的新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后8周內(nèi)的新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后4周內(nèi)的新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是體外的或離體的，或者新生兒細(xì)胞群體是體外的或離體的。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是新生兒受試者體內(nèi)的，或者新生兒細(xì)胞群體是新生兒受試者體內(nèi)的。

162、在另一方面，提供了將編碼因子ix蛋白的核酸插入新生兒受試者的新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中的靶基因組基因座內(nèi)的方法。一些此類方法包括向新生兒受試者施用：(a)核酸構(gòu)建體，該核酸構(gòu)建體包含因子ix蛋白編碼序列；以及(b)核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸，其中核酸酶藥劑靶向靶基因組基因座中的核酸酶靶位點(diǎn)，其中核酸酶藥劑切割核酸酶靶位點(diǎn)，并且核酸構(gòu)建體被插入靶基因組基因座中。在另一方面，提供了從新生兒受試者的新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中的靶基因組基因座表達(dá)因子ix蛋白的方法。一些此類方法包括向新生兒受試者施用：(a)核酸構(gòu)建體，該核酸構(gòu)建體包含因子ix蛋白編碼序列；以及(b)核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸，其中核酸酶藥劑靶向靶基因組基因座中的核酸酶靶位點(diǎn)，其中核酸酶藥劑切割核酸酶靶位點(diǎn)，核酸構(gòu)建體被插入靶基因組基因座中以形成經(jīng)修飾的靶基因組基因座，并且因子ix蛋白從經(jīng)修飾的靶基因組基因座表達(dá)。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是肝臟細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是肝臟細(xì)胞群體。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是肝細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是肝細(xì)胞群體。在一些此類方法中，新生兒細(xì)胞是人細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是人細(xì)胞群體。

163、在另一方面，提供了治療有需要的新生兒受試者的因子ix缺乏的方法。一些此類方法包括向新生兒受試者施用：(a)核酸構(gòu)建體，該核酸構(gòu)建體包含因子ix蛋白編碼序列；以及(b)核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸，其中核酸酶藥劑靶向靶基因組基因座中的核酸酶靶位點(diǎn)，其中核酸酶藥劑切割核酸酶靶位點(diǎn)，核酸構(gòu)建體被插入靶基因組基因座中以形成經(jīng)修飾的靶基因組基因座，并且因子ix蛋白從經(jīng)修飾的靶基因組基因座表達(dá)。在另一方面，提供了預(yù)防或抑制患有b型血友病的新生兒受試者的自發(fā)性出血的方法。一些此類方法包括向新生兒受試者施用：(a)核酸構(gòu)建體，該核酸構(gòu)建體包含因子ix蛋白編碼序列；以及(b)核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸，其中核酸酶藥劑靶向靶基因組基因座中的核酸酶靶位點(diǎn)，其中核酸酶藥劑切割核酸酶靶位點(diǎn)，核酸構(gòu)建體被插入靶基因組基因座中以形成經(jīng)修飾的靶基因組基因座，并且因子ix蛋白從經(jīng)修飾的靶基因組基因座表達(dá)并且預(yù)防或抑制新生兒受試者的自發(fā)性出血。在一些此類方法中，受試者患有b型血友病。在另一方面，提供了治療有需要的新生兒受試者的b型血友病的方法。一些此類方法包括向新生兒受試者施用：(a)核酸構(gòu)建體，該核酸構(gòu)建體包含因子ix蛋白編碼序列；以及(b)核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸，其中核酸酶藥劑靶向靶基因組基因座中的核酸酶靶位點(diǎn)，其中核酸酶藥劑切割核酸酶靶位點(diǎn)，核酸構(gòu)建體被插入靶基因組基因座中以形成經(jīng)修飾的靶基因組基因座，并且因子ix蛋白從經(jīng)修飾的靶基因組基因座表達(dá)，從而治療b型血友病。在一些此類方法中，受試者患有輕度b型血友病。在一些此類方法中，受試者患有中度b型血友病。在一些此類方法中，受試者患有重度b型血友病。

164、在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后24周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后12周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后8周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類方法中，新生兒受試者是出生后4周內(nèi)的人類新生兒受試者。

165、在一些此類方法中，與包括向?qū)φ帐茉囌呤┯镁幋a因子ix蛋白的游離型表達(dá)載體的方法相比，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的表達(dá)增加。在一些此類方法中，與包括向?qū)φ帐茉囌呤┯镁幋a因子ix蛋白的游離型表達(dá)載體的方法相比，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平增加。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平為至少約1μg/ml、至少約2μg/ml、至少約3μg/ml、至少約4μg/ml或至少約5μg/ml。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平為至少約5μg/ml。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中因子ix蛋白的血清水平介于約1μg/ml和約10μg/ml之間。在一些此類方法中，該方法使因子ix蛋白的表達(dá)比受試者的因子ix蛋白基線表達(dá)增加至少約1％、至少約5％、至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約35％、至少約40％、至少約45％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％、至少約90％或至少約100％。在一些此類方法中，該方法使血清中的因子ix蛋白水平比受試者的因子ix蛋白基線血清水平增加至少約1％、至少約5％、至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約35％、至少約40％、至少約45％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％、至少約90％或至少約100％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后六個月時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少50％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后一年時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少50％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后六個月時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少60％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后兩年時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少50％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后兩年時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少60％。在一些此類方法中，因子ix蛋白的表達(dá)或活性在施用后六個月時是針對人類受試者測量的峰值表達(dá)水平處的因子ix蛋白的表達(dá)或活性的至少60％。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中治療有效水平的循環(huán)因子ix蛋白。在一些此類方法中，該方法導(dǎo)致受試者中治療有效水平的循環(huán)因子ix凝血活性。在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約1％、正常值的至少約5％、正常值的至少約10％、正常值的至少約15％、正常值的至少約20％、正常值的至少約25％、正常值的至少約30％、正常值的至少約35％、正常值的至少約40％、正常值的至少約45％或正常值的至少約50％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)介于正常值的約40％和約150％之間或介于約40％和約100％之間的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，受試者患有重度血友病，并且該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約1％或超過約1％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，受試者患有中度血友病，并且該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約5％或超過約5％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，受試者患有輕度血友病，并且該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約35％、至少約40％、至少約45％、至少約50％、超過約10％、超過約15％、超過約20％、超過約25％、超過約30％、超過約35％、超過約40％、超過約45％或超過約50％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)正常值的至少約15％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，該方法實(shí)現(xiàn)小于正常值的約300％、小于約250％、小于約200％或小于約150％的循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此類方法中，該方法使循環(huán)因子ix蛋白或凝血活性水平比受試者的基線因子ix蛋白或凝血活性水平增加至少約1％、至少約5％、至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約35％、至少約40％、至少約45％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％、至少約90％或至少約100％。在一些此類方法中，受試者是人受試者。

166、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體與核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸同時施用。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體不與核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸同時施用。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體在核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸之前施用。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體在核酸酶藥劑或編碼該核酸酶藥劑的一種或多種核酸之后施用。

167、在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?id?no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166、165、164和167-171中的任一者至少95％相同，任選地其中因子ix蛋白編碼序列是cpg耗盡的并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(ii)與seq?id?no:159、160和161中的任一者至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；(ii)與seq?id?no:165至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(iii)與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(ii)與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166、165或159。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166、165或159組成。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166或159。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166或159組成。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166組成。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列由seqid?no:159組成。

168、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列上游的剪接受體位點(diǎn)。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列下游的聚腺苷酸化信號。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列上游的剪接受體，并且核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列下游的聚腺苷酸化信號。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類方法中，經(jīng)由非同源末端接合將核酸構(gòu)建體插入靶基因組基因座中。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體包含同源臂。在一些此類方法中，經(jīng)由同源定向修復(fù)將核酸構(gòu)建體插入靶基因組基因座中。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子。

169、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，并且因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列和第二因子ix蛋白編碼序列是不同的，但編碼相同的因子ix蛋白序列，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?idno:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?idno:166至少95％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少95％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的，并且第二因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?id?no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體，并且第二因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?idno:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白，并且第二因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類方法中，第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:159組成，并且第二因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166組成。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166組成，并且第二因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:159組成。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列。在一些此類方法中，第一因子ix蛋白編碼序列和第二因子ix蛋白編碼序列是不同的，但編碼相同的因子ix蛋白序列，并且其中第一聚腺苷酸化信號和第二聚腺苷酸化信號是不同的。

170、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，其中因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列，并且雙向構(gòu)建體還包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體包含seq?id?no:210或180或其反向互補(bǔ)序列。

171、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna或雙鏈dna。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna。

172、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體或脂質(zhì)納米顆粒中。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體中。在一些此類方法中，核酸載體是病毒載體。在一些此類方法中，核酸載體是腺相關(guān)病毒(aav)載體，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類方法中，aav載體是單鏈aav(ssaav)載體。在一些此類方法中，aav載體來源于aav8載體、aav3b載體、aav5載體、aav6載體、aav7載體、aav9載體、aavrh.74載體或aavhu.37載體。在一些此類方法中，aav載體是重組aav8(raav8)載體。在一些此類方法中，aav載體是單鏈raav8載體。

173、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，其中因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列，并且雙向構(gòu)建體還包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。

174、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是單向構(gòu)建體。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是包含因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?idno:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

175、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna或雙鏈dna。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是單鏈dna。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體或脂質(zhì)納米顆粒中。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體處于核酸載體中。在一些此類方法中，核酸載體是病毒載體。在一些此類方法中，核酸載體是腺相關(guān)病毒(aav)載體，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類方法中，aav載體是單鏈aav(ssaav)載體。在一些此類方法中，aav載體來源于aav8載體、aav3b載體、aav5載體、aav6載體、aav7載體、aav9載體、aavrh.74載體或aavhu.37載體。在一些此類方法中，aav載體是重組aav8(raav8)載體。在一些此類方法中，aav載體是單鏈raav8載體。

176、在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是包含因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seqid?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

177、在一些此類方法中，靶基因組基因座是白蛋白基因，任選地其中白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此類方法中，核酸酶靶位點(diǎn)處于白蛋白基因的內(nèi)含子1中。在一些此類方法中，核酸酶藥劑包含：(a)鋅指核酸酶(zfn)；(b)轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶(talen)；或者(c)(i)cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸；以及(ii)向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna，其中向?qū)na包含靶向向?qū)na靶序列的dna靶向區(qū)段，并且其中向?qū)na與cas蛋白結(jié)合并且將cas蛋白靶向到向?qū)na靶序列。

178、在一些此類方法中，核酸酶藥劑包含：(a)cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸；以及(b)向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna，其中向?qū)na包含靶向向?qū)na靶序列的dna靶向區(qū)段，并且其中向?qū)na與cas蛋白結(jié)合并且將cas蛋白靶向到向?qū)na靶序列。在一些此類方法中，向?qū)na靶序列處于白蛋白基因的內(nèi)含子1中。在一些此類方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:30-61中的任一者所示序列中的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸，任選地其中dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36、30、33和41中的任一者所示序列中的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段與seq?id?no:30-61中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同，任選地其中dna靶向區(qū)段與seq?id?no:36、30、33和41中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:30-61中的任一者，任選地其中dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36、30、33和41中的任一者。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段由seq?id?no:30-61中的任一者組成，任選地其中dna靶向區(qū)段由seq?id?no:36、30、33和41中的任一者組成。在一些此類方法中，向?qū)na包含seq?idno:62-125中的任一者，任選地其中向?qū)na包含seq?id?no:68、100、62、94、65、97、73和105中的任一者。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36的至少17個、至少18個、至少19個或至少20個連續(xù)核苷酸。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段與seq?id?no:36至少90％或至少95％相同。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段包含seq?id?no:36。在一些此類方法中，dna靶向區(qū)段由seq?id?no:36組成。在一些此類方法中，向?qū)na包含seq?id?no:68或100。

179、在一些此類方法中，該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na。在一些此類方法中，向?qū)na包含至少一種修飾。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括向?qū)na的5'端處的前五個核苷酸中的一個或多個核苷酸處的修飾。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括向?qū)na的3'端處的最后五個核苷酸中的一個或多個核苷酸處的修飾。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。在一些此類方法中，該至少一種修飾包括：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。在一些此類方法中，向?qū)na是單向?qū)na(sgrna)。在一些此類方法中，該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸。

180、在一些此類方法中，cas蛋白是cas9蛋白。在一些此類方法中，cas9蛋白來源于釀膿鏈球菌cas9蛋白、金黃色葡萄球菌(staphylococcus?aureus)cas9蛋白、空腸彎曲桿菌(campylobacter?jejuni)cas9蛋白、嗜熱鏈球菌(streptococcus?thermophilus)cas9蛋白或腦膜炎奈瑟氏球菌(neisseria?meningitidis)cas9蛋白。在一些此類方法中，cas蛋白來源于釀膿鏈球菌cas9蛋白。在一些此類方法中，cas蛋白包含seq?id?no:11所示的序列。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的核酸被密碼子優(yōu)化以在哺乳動物細(xì)胞或人細(xì)胞中表達(dá)。在一些此類方法中，該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna包含至少一種修飾。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna被修飾以在一個或多個或所有尿苷位置處包含經(jīng)修飾的尿苷。在一些此類方法中，經(jīng)修飾的尿苷是假尿苷或n1-甲基-假尿苷，任選地n1-甲基-假尿苷。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna被修飾以在一個或多個或所有尿苷位置處包含經(jīng)修飾的尿苷。在一些此類方法中，經(jīng)修飾的尿苷是假尿苷。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna包含5'帽。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna包含poly(a)尾。在一些此類方法中，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列。在一些此類方法中，該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類方法中該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

181、在一些此類方法中，該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，并且其中該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列。在一些此類方法中，該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類方法中，該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，并且其中該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，其中因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列，并且其中雙向構(gòu)建體還包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seqid?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是包含因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，其中因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列，并且其中雙向構(gòu)建體還包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是包含因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166；其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

182、在一些此類方法中，cas蛋白或編碼cas蛋白的核酸和向?qū)na或編碼向?qū)na的一種或多種dna與脂質(zhì)納米顆粒締合。在一些此類方法中，脂質(zhì)納米顆粒包含陽離子脂質(zhì)、中性脂質(zhì)、輔助脂質(zhì)和隱形脂質(zhì)。在一些此類方法中，陽離子脂質(zhì)是脂質(zhì)a((9z,12z)-3-((4,4-雙(辛氧基)丁?；?氧基)-2-((((3-(二乙氨基)丙氧基)羰基)氧基)甲基)丙基十八-9,12-二烯酸酯)。在一些此類方法中，中性脂質(zhì)是二硬脂酰磷脂酰膽堿或1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸膽堿(dspc)。在一些此類方法中，輔助脂質(zhì)是膽固醇。在一些此類方法中，隱形脂質(zhì)是peg2k-dmg。在一些此類方法中，陽離子脂質(zhì)是脂質(zhì)a，中性脂質(zhì)是dspc，輔助脂質(zhì)是膽固醇，并且隱形脂質(zhì)是peg2k-dmg。在一些此類方法中，脂質(zhì)納米顆粒包含以下摩爾比的四種脂質(zhì)：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。

183、在一些此類方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na，并且該向?qū)na包含seq?id?no:68或100，其中該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，并且編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?id?no:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任選地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中該方法包括施用呈rna形式的向?qū)na，該向?qū)na包含seq?idno:100，并且該向?qū)na包含：(i)向?qū)na的5'端處的前四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(ii)向?qū)na的3'端處的最后四個核苷酸之間的硫代磷酸酯鍵；(iii)向?qū)na的5'端處的前三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸；以及(iv)向?qū)na的3'端處的最后三個核苷酸處的經(jīng)2'-o-甲基修飾的核苷酸，其中該方法包括施用編碼cas蛋白的核酸，其中該核酸包含編碼cas蛋白的mrna，編碼cas蛋白的mrna包含seq?id?no:226、225或12所示的序列，并且編碼cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向?qū)na和編碼cas蛋白的mrna與脂質(zhì)納米顆粒締合，該脂質(zhì)納米顆粒任選地以下列摩爾比包含脂質(zhì)a、dspc、膽固醇和peg2k-dmg：約50摩爾％脂質(zhì)a、約9摩爾％dspc、約38摩爾％膽固醇和約3摩爾％peg2k-dmg。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，其中因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列，并且其中雙向構(gòu)建體還包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是包含因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中因子ix蛋白編碼序列包含seq?idno:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?idno:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，其中因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列，并且其中雙向構(gòu)建體還包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類方法中，核酸構(gòu)建體是包含因子ix蛋白編碼序列的單向構(gòu)建體，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：剪接受體、因子ix蛋白編碼序列和聚腺苷酸化信號，其中因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159或seq?id?no:166，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中核酸構(gòu)建體不包含同源臂，并且其中核酸構(gòu)建體處于單鏈raav8載體中，任選地其中核酸構(gòu)建體在每一端側(cè)接有反向末端重復(fù)序列(itr)，任選地其中至少一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:198、基本上由其組成或由其組成，或者任選地其中至少一端的itr包含seq?idno:196、基本上由其組成或由其組成，并且任選地其中每一端的itr包含seq?id?no:196、基本上由其組成或由其組成。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類方法中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。

184、在一些此類方法中，該方法還包括在向受試者施用組合物之前評估受試者的預(yù)先存在的aav免疫力。在一些此類方法中，預(yù)先存在的aav免疫力是預(yù)先存在的aav8免疫力。在一些此類方法中，評估預(yù)先存在的aav免疫力包括使用總抗體免疫測定或中和抗體測定來評估免疫原性。

185、在另一方面，提供了通過任何上述方法制備的新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體。在另一方面，提供了包含核酸構(gòu)建體的新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體，該核酸構(gòu)建體包含插入靶基因組基因座中的因子ix蛋白編碼序列。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞是肝臟細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是肝臟細(xì)胞群體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞是肝細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是肝細(xì)胞群體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞是人細(xì)胞，或者新生兒細(xì)胞群體是人細(xì)胞群體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后24周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后12周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后8周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體來自出生后4周內(nèi)的人類新生兒受試者。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞是體外的或離體的，或者新生兒細(xì)胞群體是體外的或離體的。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，新生兒細(xì)胞是受試者體內(nèi)的，或者新生兒細(xì)胞群體是受試者體內(nèi)的。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白被表達(dá)。

186、在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?idno:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166、165、164和167-171中的任一者至少95％相同，任選地其中因子ix蛋白編碼序列是cpg耗盡的并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(ii)與seq?id?no:159、160和161中的任一者至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列：

187、(i)與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；(ii)與seq?id?no:165至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(iii)與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列：(i)與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；或者(ii)與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166、165或159。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166、165或159組成。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166或159。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列由seq?idno:166或159組成。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列由seqid?no:166組成。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，因子ix蛋白編碼序列由seqid?no:159組成。

188、在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列上游的剪接受體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列下游的聚腺苷酸化信號。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列上游的剪接受體，并且核酸構(gòu)建體包含位于因子ix蛋白編碼序列下游的聚腺苷酸化信號。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中因子ix蛋白編碼序列可操作地連接到靶基因組基因座處的內(nèi)源啟動子。

189、在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，并且因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第一因子ix蛋白編碼序列。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列和第二因子ix蛋白編碼序列是不同的，但編碼相同的因子ix蛋白序列，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少95％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少95％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗盡的；(ii)被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變；或者(iii)cpg耗盡的并被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，(i)第一因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:166至少99％相同，是cpg耗盡的，并且是密碼子優(yōu)化的，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體；并且(ii)第二因子ix蛋白編碼序列與seq?id?no:159至少99％相同，是cpg耗盡的，并且被修飾以使一個或多個隱蔽剪接供體序列突變，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的，并且第二因子ix蛋白編碼序列已去除一個cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗盡的。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?id?no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體，并且第二因子ix蛋白編碼序列編碼與seq?id?no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任選地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix變體。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白，并且第二因子ix蛋白編碼序列編碼包含seq?id?no:195的因子ix蛋白。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?idno:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:159組成，并且第二因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166組成。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:166組成，并且第二因子ix蛋白編碼序列由seq?id?no:159組成。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，第一因子ix蛋白編碼序列和第二因子ix蛋白編碼序列是不同的，但編碼相同的因子ix蛋白序列，并且其中第一聚腺苷酸化信號和第二聚腺苷酸化信號是不同的。

190、在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體是雙向構(gòu)建體，其中因子ix蛋白編碼序列是第一因子ix蛋白編碼序列，并且雙向構(gòu)建體還包含第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列，其中核酸構(gòu)建體從5'至3'包含：第一剪接受體、第一因子ix蛋白編碼序列、第一聚腺苷酸化信號、第二聚腺苷酸化信號的反向互補(bǔ)序列、第二因子ix蛋白編碼序列的反向互補(bǔ)序列和第二剪接受體的反向互補(bǔ)序列，其中：(i)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:166，并且第二因子ix蛋白編碼序列包含seq?id?no:159，其中核酸構(gòu)建體不包含驅(qū)動因子ix蛋白的表達(dá)的啟動子，并且其中因子ix蛋白編碼序列可操作地連接到靶基因組基因座處的內(nèi)源啟動子。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸構(gòu)建體包含seq?id?no:210或180或其反向互補(bǔ)序列。

191、在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，靶基因組基因座是白蛋白基因，任選地其中白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此類新生兒細(xì)胞或新生兒細(xì)胞群體中，核酸酶靶位點(diǎn)處于白蛋白基因的內(nèi)含子1中。