背景技術(shù)：

1、重組腺相關(guān)病毒(raav)提供用于體內(nèi)遞送基因療法的主要平臺。目前的臨床試驗采用有限數(shù)量的aav衣殼，主要來自天然存在的人或靈長類血清型，諸如aav1、aav2、aav5、aav6、aav8、aav9、aavrh.10、aav4rh.74和aavhu.67。由于所關(guān)注組織的低感染性和競爭性肝向性，這些衣殼通常提供對所關(guān)注組織的次優(yōu)靶向。增加劑量以確保所需組織的感染可導(dǎo)致劑量依賴性肝毒性。此外，使用天然存在的衣殼會帶來免疫記憶方面的挑戰(zhàn)，即免疫前患者群體被排除在治療之外，并且在先前未免疫患者中重復(fù)給藥通常是不可能的。因此，需要用于基因療法的另外的aav衣殼，特別是賦予raav對特定組織(諸如肌肉組織和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的組織)的高感染性和低肝向性的衣殼。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本文描述了用于高通量工程化對各種組織具有改變的向性的功能性aav衣殼和對靶組織(諸如肌肉或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織)具有增加的向性的衣殼變體的系統(tǒng)。

2、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠以是野生型aav9的至少100倍的dna富集優(yōu)先靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織。

3、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2028、seq?id?no:2791、seqid?no:424、seq?id?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:415、seq?id?no:3846、seq?idno:3283、seq?id?no:1956、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?idno:1576、seq?id?no:425、seq?id?no:709、seq?id?no:2168、seq?id?no:54、seq?id?no:429、seq?id?no:708、seq?id?no:428、seq?id?no:4119、seq?id?no:3906、seq?id?no:2456、seq?id?no:2278、seq?id?no:5006、seq?id?no:426、seq?id?no:307、seq?id?no:5155、seqid?no:2640、seq?id?no:4317、seq?id?no:1145、seq?id?no:430和seq?id?no:885。在一些方面，所述重組病毒衣殼能夠以是所述野生型aav9的至少200倍的dna富集優(yōu)先靶向所述cns組織。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2028、seq?id?no:2791、seqid?no:424、seq?id?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:415、seq?id?no:3846、seq?idno:3283、seq?id?no:1956和seq?id?no:3297。在一些方面，所述重組病毒衣殼能夠以是所述野生型aav9的至少1000倍的dna富集優(yōu)先靶向所述cns組織。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有seq?id?no:18的序列。

4、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠以是野生型aav9的至少100倍的rna富集優(yōu)先靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織。

5、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2028、seq?id?no:2791、seqid?no:424、seq?id?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:415、seq?id?no:3283、seq?idno:1956、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?idno:425、seq?id?no:709、seq?id?no:54、seq?id?no:429、seq?id?no:428、seq?id?no:426和seq?id?no:430。在一些方面，所述重組病毒衣殼能夠以是所述野生型aav9的至少200倍或更高的rna富集優(yōu)先靶向所述cns組織。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?idno:2028、seq?id?no:2791、seq?id?no:424、seq?id?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:415、seq?id?no:3283、seq?id?no:1956、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?id?no:425、seq?id?no:709、seq?id?no:54、seq?id?no:430、seq?id?no:569和seq?id?no:719。在一些方面，所述重組病毒衣殼能夠以是所述野生型aav9的至少500倍或更高的rna富集優(yōu)先靶向所述cns組織。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?idno:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262和seq?id?no:2028。

6、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠以是野生型aav5的至少5倍的dna富集優(yōu)先靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織。

7、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2028、seq?id?no:2791、seqid?no:424、seq?id?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:415、seq?id?no:3846、seq?idno:3283、seq?id?no:1956、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661和seq?idno:1576。在一些方面，所述重組病毒衣殼能夠以是所述野生型aav5的至少10倍的dna富集優(yōu)先靶向所述cns組織。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2028、seqid?no:2791和seq?id?no:424。

8、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠以是野生型aav5的至少5倍的rna富集優(yōu)先靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織。

9、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2028、seq?id?no:2791、seqid?no:424、seq?id?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:415、seq?id?no:3283、seq?idno:1956、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?idno:425、seq?id?no:709、seq?id?no:54、seq?id?no:429、seq?id?no:708、seq?id?no:428、seq?id?no:426、seq?id?no:307、seq?id?no:4317、seq?id?no:430和seq?id?no:885。在一些方面，所述重組病毒衣殼能夠以是所述野生型aav5的至少20倍的rna富集優(yōu)先靶向所述cns組織。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2028、seq?id?no:2791、seqid?no:424、seq?id?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:415、seq?id?no:3283、seq?idno:1956、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?id?no:425、seq?id?no:709、seq?id?no:54、seq?id?no:430、seq?id?no:569和seq?id?no:719。

10、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域；其中所述581-589區(qū)域具有與以下序列具有至少85％同一性的序列：(a)seq?id?no:18，(b)seq?id?no:3472，(c)seq?id?no:262，(d)seq?id?no:3306，(e)seq?id?no:2028，(f)seq?id?no:2791，(g)seq?id?no:424，(h)seqid?no:2536，(i)seq?id?no:1971，(j)seq?id?no:415，(k)seq?id?no:3846，(l)seq?id?no:3283，(m)seq?id?no:1956，(n)seq?id?no:3297，(o)seq?id?no:4545，(p)seq?id?no:2661，(q)seq?id?no:1576，(r)seq?id?no:425，(s)seq?idno:709，(t)seq?id?no:2168，(u)seqid?no:54，(v)seq?id?no:429，(w)seq?id?no:708，(x)seq?id?no:428，(y)seq?id?no:4119，(z)seq?id?no:3906，(aa)seq?id?no:2456，(bb)seq?id?no:2278，(cc)seq?id?no:5006，或(dd)seq?id?no:426。

11、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有以下的序列：(a)seq?id?no:18，(b)seq?idno:3472，(c)seq?id?no:262，(d)seq?id?no:3306，(e)seq?id?no:2028，(f)seq?id?no:2791，(g)seq?id?no:424，(h)seq?id?no:2536，(i)seq?id?no:1971，(j)seq?id?no:415，(k)seq?id?no:3846，(l)seq?id?no:3283，(m)seq?id?no:1956，(n)seq?id?no:3297，(o)seq?id?no:4545，(p)seq?id?no:2661，(q)seq?id?no:1576，(r)seq?id?no:425，(s)seq?idno:709，(t)seq?id?no:2168，(u)seq?id?no:54，(v)seq?id?no:429，(w)seq?id?no:708，(x)seq?id?no:428，(y)seq?id?no:4119，(z)seq?id?no:3906，(aa)seq?id?no:2456，(bb)seq?id?no:2278，(cc)seq?id?no:5006，或(dd)seq?id?no:426。

12、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，581-589其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域；其中所述581-589區(qū)域具有與seqid?no:12-seq?id?no:3937或seq?id?no:3938-seq?id?no:4237中的任一者具有至少85％同一性的序列。

13、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有seq?id?no:12-seq?id?no:3937或seq?id?no:3938-seq?id?no:4237中的任一者的序列。在一些方面，所述vp衣殼多肽能夠組裝成重組病毒衣殼。

14、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽能夠組裝成重組病毒衣殼，并且其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域；其中所述581-589區(qū)域：與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且以是seq?id?no:1的野生型vp衣殼多肽的至少3倍的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)向性賦予所述重組病毒衣殼對cns組織的感染率；其中所述vp衣殼多肽與seq?id?no:3、seq?id?no:4、seq?idno:5、seq?id?no:6、seq?id?no:7和seq?id?no:8中的每一者相比包含至少一個氨基酸取代。

15、在一些方面，所述581-589區(qū)域包含序列x1x2x3x4x5x6x7x8x9，其中x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8和x9各自獨(dú)立地選自a、r、n、d、c、e、q、g、h、i、l、k、m、f、p、s、t、w、y和v。在一些方面，所述vp衣殼多肽具有seq?id?no:2的序列，其中seq?id?no:2的殘基581至589(x1x2x3x4x5x6x7x8x9)對應(yīng)于所述581-589區(qū)域。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有與seq?idno:12-seq?id?no:3937中的任一者具有至少70％、至少77％、至少80％、至少88％、至少90％或至少95％同一性的序列。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有seq?id?no:12-seq?idno:3937中的任一者的序列。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有與seq?id?no:3938-seq?idno:4237中的任一者具有至少70％、至少77％、至少80％、至少88％、至少90％或至少95％同一性的序列。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有seq?id?no:3938-seq?id?no:4237中的任一者的序列。

16、在一些方面，所述vp衣殼多肽包含與seq?id?no:1具有至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少97％、至少98％、至少98.5％、至少99％或至少99.5％同一性的氨基酸序列。在一些方面，對cns組織的感染率是野生型vp衣殼多肽對cns組織的感染率的至少2.5倍、至少3倍、至少3.5倍、至少4倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少50倍、至少75倍、至少100倍、至少200倍、至少500倍或至少1000倍。在一些方面，與包含seq?id?no:1的肽的野生型aav5衣殼相比，所述581-589區(qū)域賦予由vp衣殼多肽組裝的重組病毒衣殼改善的穩(wěn)定性。在一些方面，與seq?id?no:1的野生型vp衣殼多肽相比，所述581-589區(qū)域在施用于受試者時賦予更低的毒性。在一些方面，所述cns組織選自前腦皮層、枕葉皮層、顳葉皮層、丘腦、下丘腦、黑質(zhì)、海馬體dg、海馬體ca1、海馬體ca3、小腦以及它們的任何組合。

17、在各個方面，本公開提供了一種藥物組合物，其包含如本文所述的vp衣殼多肽。

18、在一些方面，所述vp衣殼多肽組裝成重組病毒衣殼。在一些方面，所述藥物組合物還包含被重組病毒衣殼包封的有效負(fù)載。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼治療性多核苷酸或治療性肽。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼指導(dǎo)rna、trna、阻抑trna、sirna、mirna、mrna、shrna、環(huán)狀rna或反義寡核苷酸(aso)、核酶、dna酶、適體或它們的任何組合。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼crispr/cas系統(tǒng)的組分、作用于rna(adar)酶的腺苷脫氨酶、轉(zhuǎn)錄活化子或轉(zhuǎn)錄抑制子。

19、在各個方面，本公開提供了一種重組腺相關(guān)病毒(raav)，其包含組裝成重組病毒衣殼的如本文所述的vp衣殼多肽和被所述重組病毒衣殼包封的有效負(fù)載。

20、在一些方面，所述raav還包含含有581-589區(qū)域的vp2多肽和含有581-589區(qū)域的vp3多肽。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼治療性多核苷酸或治療性肽。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼指導(dǎo)rna、trna、阻抑trna、sirna、mirna、mrna、shrna、環(huán)狀rna或反義寡核苷酸(aso)、核酶、dna酶、適體或它們的任何組合。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼crispr/cas系統(tǒng)的組分、作用于rna(adar)酶的腺苷脫氨酶、轉(zhuǎn)錄活化子或轉(zhuǎn)錄抑制子。

21、在各個方面，本公開提供了一種將有效負(fù)載遞送至受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封所述有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?idno:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述cns組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav9的至少100倍的dna富集遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

22、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少200倍。在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少1000倍。

23、在各個方面，本公開提供了一種在受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織中轉(zhuǎn)錄有效負(fù)載的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封所述有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述cns組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav9的至少100倍的rna富集轉(zhuǎn)錄至被所述raav感染的所述cns組織。

24、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少200倍。在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少500倍。

25、在各個方面，本公開提供了一種將有效負(fù)載遞送至受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封所述有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述cns組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav5的至少5倍的dna富集遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

26、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav5的至少10倍。

27、在各個方面，本公開提供了一種在受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織中轉(zhuǎn)錄有效負(fù)載的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封所述有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述cns組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav5的至少5倍的rna富集轉(zhuǎn)錄至被所述raav感染的所述cns組織。

28、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav5的至少20倍。

29、在各個方面，本公開提供了一種將有效負(fù)載遞送至受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封所述有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域具有與以下序列具有至少85％同一性的序列：(a)seq?id?no:18，(b)seq?id?no:3472，(c)seq?id?no:262，(d)seq?id?no:3306，(e)seq?id?no:2028，(f)seq?id?no:2791，(g)seq?id?no:424，(h)seq?id?no:2536，(i)seqid?no:1971，(j)seq?id?no:415，(k)seq?id?no:3846，(l)seq?id?no:3283，(m)seq?id?no:1956，(n)seq?id?no:3297，(o)seq?id?no:4545，(p)seq?id?no:2661，(q)seq?id?no:1576，(r)seq?id?no:425，(s)seq?id?no:709，(t)seq?id?no:2168，(u)seq?id?no:54，(v)seq?idno:429，(w)seq?id?no:708，(x)seq?id?no:428，(y)seq?id?no:4119，(z)seq?id?no:3906，(aa)seq?id?no:2456，(bb)seq?id?no:2278，(cc)seq?id?no:5006，或(dd)seq?id?no:426；用與包含seq?id?no:1的肽的野生型aav5衣殼相比具有至少3倍的cns組織向性的所述raav感染所述cns組織；以及將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

30、在各個方面，本公開提供了一種將有效負(fù)載遞送至受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封所述有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:1的殘基581至589相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中所述vp衣殼多肽與seq?id?no:3、seq?id?no:4、seq?idno:5、seq?id?no:6、seq?id?no:7和seq?id?no:8中的每一者相比包含至少一個氨基酸取代；用與包含seq?id?no:1的肽的野生型aav5衣殼相比具有至少3倍的cns組織向性的所述raav感染所述cns組織；以及將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

31、在各個方面，本公開提供了一種將有效負(fù)載遞送至受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封所述有效負(fù)載，并且其中所述raav包含如本文所述的vp衣殼多肽；用所述raav感染所述cns組織；以及將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

32、在一些方面，所述方法還包括在被所述raav感染的所述cns組織中表達(dá)由所述有效負(fù)載編碼的治療性多肽或治療性多核苷酸。在一些方面，所述方法還包括在所述受試者的所述cns組織中產(chǎn)生治療效果。在一些方面，所述治療效果在每kg受試者體重施用1×105至5×1014個raav時產(chǎn)生。在一些方面，所述方法包括施用足以在所述受試者中產(chǎn)生治療效果而不產(chǎn)生毒性的量的所述raav。在一些方面，所述cns組織包括前腦皮層、枕葉皮層、顳葉皮層、丘腦、下丘腦、黑質(zhì)、海馬體dg、海馬體ca1、海馬體ca3、小腦或它們的組合。

33、在各個方面，本公開提供了一種治療受試者的疾患的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav9的至少100倍的dna富集遞送至被所述raav感染的所述cns組織；以及在所述cns組織中產(chǎn)生治療效果，從而治療所述疾患。

34、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少200倍。在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少1000倍。

35、在各個方面，本公開提供了一種治療受試者的疾患的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav9的至少100倍的rna富集轉(zhuǎn)錄至被所述raav感染的所述cns組織；以及在所述cns組織中產(chǎn)生治療效果，從而治療所述疾患。

36、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少200倍。在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav9的至少500倍。

37、在各個方面，本公開提供了一種治療受試者的疾患的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav5的至少5倍的dna富集遞送至被所述raav感染的所述cns組織；以及在所述cns組織中產(chǎn)生治療效果，從而治療所述疾患。

38、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav5的至少10倍。

39、在各個方面，本公開提供了一種治療受試者的疾患的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav5的至少5倍的rna富集轉(zhuǎn)錄至被所述raav感染的所述cns組織；以及在所述cns組織中產(chǎn)生治療效果，從而治療所述疾患。

40、在一些方面，所述dna富集是所述野生型aav5的至少20倍。

41、在各個方面，本公開提供了一種治療受試者的疾患的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域具有與以下序列具有至少85％同一性的序列：(a)seq?id?no:18，(b)seq?idno:3472，(c)seq?id?no:262，(d)seq?id?no:3306，(e)seq?id?no:2028，(f)seq?id?no:2791，(g)seq?id?no:424，(h)seq?id?no:2536，(i)seq?id?no:1971，(j)seq?id?no:415，(k)seq?id?no:3846，(l)seq?id?no:3283，(m)seq?id?no:1956，(n)seq?id?no:3297，(o)seq?id?no:4545，(p)seq?id?no:2661，(q)seq?id?no:1576，(r)seq?id?no:425，(s)seq?idno:709，(t)seq?id?no:2168，(u)seq?id?no:54，(v)seq?id?no:429，(w)seq?id?no:708，(x)seq?id?no:428，(y)seq?id?no:4119，(z)seq?id?no:3906，(aa)seq?id?no:2456，(bb)seq?id?no:2278，(cc)seq?id?no:5006，或(dd)seq?id?no:426；用所述raav感染所述受試者的cns組織；將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織；以及在所述cns組織中產(chǎn)生治療效果，從而治療所述疾患。

42、在各個方面，本公開提供了一種治療受試者的疾患的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:1的殘基581至589相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中所述vp衣殼多肽不具有seq?id?no:3、seq?id?no:4、seq?id?no:5、seq?id?no:6、seq?id?no:7或seq?id?no:8中的任一者的序列；用與包含seq?id?no:1的肽的野生型aav5衣殼相比具有至少3倍的cns組織向性的所述raav感染所述受試者的cns組織；將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織；以及在所述cns組織中產(chǎn)生治療效果，從而治療所述疾患。

43、在各個方面，本公開提供了一種治療受試者的疾患的方法，所述方法包括：向所述受試者施用重組腺相關(guān)病毒(raav)，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含如本文所述的vp衣殼多肽；用所述raav感染所述受試者的cns組織；將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織；以及在所述cns組織中產(chǎn)生治療效果，從而治療所述疾患。

44、在一些方面，所述疾患是神經(jīng)疾患。在一些方面，所述神經(jīng)疾患是芳族l-氨基酸脫羧酶(aadc)缺乏癥、阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease)、tau蛋白病、突觸核蛋白病、巴藤病(batten?disease)、iii型黏多糖病、額顳癡呆、帕金森病(parkinson’s?disease)、皮質(zhì)基底節(jié)變性、進(jìn)行性核上性麻痹、慢性創(chuàng)傷性腦病、戈謝病(gaucher?disease)、卡納萬病(canavan?disease)、泰伊-薩克斯二氏病(tay-sachs?disease)、亨廷頓病(huntington’sdisease)、普羅托克-羅普斯基綜合征(protocki-lupski?syndrome)、肌萎縮性側(cè)索硬化、唐氏綜合征(down?syndrome)、a型山菲利普病(sanfilippo?disease?type?a)、b型山菲利普病或瑞特綜合征(rett?syndrome)。在一些方面，所述疾患是瑞特綜合征。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼靶向由mecp2編碼的mrna的指導(dǎo)rna或靶向mecp2中的過早終止密碼子的trna。在一些方面，所述疾患是帕金森病。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼指導(dǎo)rna，所述指導(dǎo)rna靶向編碼lrrk2、gba、α-突觸核蛋白、aadc、gdnf、神經(jīng)秩蛋白(neurturin)、gad、foxg1、kv7.2、脆性x智力低下蛋白、tau或laforin的mrna。在一些方面，所述疾患是阿爾茨海默病。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼指導(dǎo)rna，所述指導(dǎo)rna靶向編碼淀粉樣前體蛋白(app)、α-突觸核蛋白(snca)、tau蛋白(mapt)或載脂蛋白e(apoe)的mrna。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼轉(zhuǎn)基因，所述轉(zhuǎn)基因編碼淀粉樣前體蛋白(app)、α-突觸核蛋白(snca)、tau蛋白(mapt)或載脂蛋白e(apoe)。

45、在一些方面，所述方法包括每kg受試者體重施用1×105至5×1014個raav。在一些方面，所述方法包括用是包含seq?id?no:1的肽的野生型aav5衣殼的至少2.5倍、至少3倍、至少3.5倍、至少4倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少50倍、至少75倍、至少100倍、至少200倍、至少500倍或至少1000倍的組織向性來感染所述cns組織。

46、在一些方面，所述有效負(fù)載編碼治療性蛋白質(zhì)、治療性多核苷酸、指導(dǎo)rna、trna、阻抑trna、sirna、mirna、mrna、shrna、環(huán)狀rna、反義寡核苷酸(aso)、核酶、dna酶、適體或它們的任何組合。在一些方面，所述指導(dǎo)rna是crispr/cas指導(dǎo)rna或adar指導(dǎo)rna。在一些方面，所述治療性蛋白質(zhì)選自由以下組成的組：芳族l-氨基酸脫羧酶(aadc)、淀粉樣前體蛋白(app)、α-突觸核蛋白、微管相關(guān)蛋白tau(mapt)、apoe、神經(jīng)生長因子(ngf)、端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(tert)、cln2、cln3、cln6、n-乙?；?α-氨基葡萄糖苷酶(naglu)、顆粒體蛋白、葡糖神經(jīng)酰胺酶β(gba)、天冬氨酸?；?、gdnf、神經(jīng)秩蛋白(ntn)、谷氨酸脫羧酶(gad)、foxg1、kv7.2、laforin、富亮氨酸重復(fù)激酶2(lrrk2)、己糖胺酶a(hexa)、己糖胺酶b(hexb)、亨廷頓蛋白(huntingtin)、膽固醇24-羥化酶、c9orf72、超氧化物歧化酶1(sod1)、雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1a(dyrka1)、n-磺基葡糖胺磺基水解酶(sgsh)、過量基因座蛋白1(surf1)、gaba轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(gat1)和甲基-cpg結(jié)合蛋白2(mecp2)。在一些方面，所述治療性多核苷酸靶向編碼選自由以下組成的組的蛋白質(zhì)的mrna：芳族l-氨基酸脫羧酶(aadc)、淀粉樣前體蛋白(app)、α-突觸核蛋白、微管相關(guān)蛋白tau(mapt)、apoe、神經(jīng)生長因子(ngf)、端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(tert)、cln2、cln3、cln6、n-乙?；?α-氨基葡萄糖苷酶(naglu)、顆粒體蛋白、葡糖神經(jīng)酰胺酶β(gba)、天冬氨酸酰化酶、gdnf、神經(jīng)秩蛋白(ntn)、谷氨酸脫羧酶(gad)、foxg1、kv7.2、laforin、富亮氨酸重復(fù)激酶2(lrrk2)、己糖胺酶a(hexa)、己糖胺酶b(hexb)、亨廷頓蛋白(huntingtin)、膽固醇24-羥化酶、c9orf72、超氧化物歧化酶1(sod1)、雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1a(dyrka1)、n-磺基葡糖胺磺基水解酶(sgsh)、過量基因座蛋白1(surf1)、gaba轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(gat1)和甲基-cpg結(jié)合蛋白2(mecp2)。在一些方面，所述有效負(fù)載編碼crispr/cas系統(tǒng)的組分、作用于rna(adar)酶的腺苷脫氨酶、轉(zhuǎn)錄活化子或轉(zhuǎn)錄抑制子。在一些方面，所述crispr/cas系統(tǒng)的組分包括cas3、cas8、cas10、cas9、cas4、cas12、cas13、指導(dǎo)rna或它們的組合。在一些方面，所述adar酶是adar1或adar2。在一些方面，所述轉(zhuǎn)錄活化子是vp64。在一些方面，所述轉(zhuǎn)錄抑制子是krab。

47、在一些方面，所述方法包括向受試者全身性施用raav。在一些方面，所述方法包括通過靜脈內(nèi)施用、肌內(nèi)施用、腹膜內(nèi)施用或口服施用來施用raav。在一些方面，所述方法還包括在被raav感染的cns組織中表達(dá)由有效負(fù)載編碼的治療性多肽或治療性多核苷酸。在一些方面，所述方法包括表達(dá)與包含seq?id?no:1的肽的野生型aav5衣殼相比具有更高的cns組織向性的治療性多肽或治療性多核苷酸。在一些方面，所述方法包括表達(dá)與野生型aav5衣殼相比具有至少3倍、至少3.5倍、至少4倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少50倍、至少75倍、至少100倍、至少200倍、至少500倍或至少1000倍的向性的治療性多肽或治療性多核苷酸。

48、在一些方面，所述方法包括在受試者中產(chǎn)生比全身性施用相當(dāng)數(shù)量的包含seq?idno:1的vp衣殼多肽的野生型aav5衣殼產(chǎn)生的毒性更低的毒性。在一些方面，所述方法包括在受試者中產(chǎn)生比全身性施用一定數(shù)量的足以將相當(dāng)數(shù)量的有效負(fù)載遞送至cns組織的包含seq?id?no:1的vp衣殼多肽的野生型aav5衣殼時產(chǎn)生的毒性更低的毒性。在一些方面，所述方法包括在受試者中產(chǎn)生比全身性施用相當(dāng)數(shù)量的包含seq?id?no:1的vp衣殼多肽的野生型aav5衣殼時產(chǎn)生的中和抗體濃度更低的中和抗體濃度。在一些方面，所述方法包括在受試者中產(chǎn)生比玻璃體內(nèi)施用相當(dāng)數(shù)量的野生型aav2衣殼時產(chǎn)生的中和抗體濃度更低的中和抗體濃度。在一些方面，所述方法包括在受試者中產(chǎn)生的中和抗體的濃度低于玻璃體內(nèi)施用相當(dāng)數(shù)量的野生型aav8衣殼時產(chǎn)生的中和抗體的濃度。在一些方面，所述方法包括在受試者中產(chǎn)生比玻璃體內(nèi)施用相當(dāng)數(shù)量的野生型aav9衣殼時產(chǎn)生的中和抗體濃度更低的中和抗體濃度。在一些方面，所述vp衣殼多肽還包含581-589區(qū)域外的有助于相對于野生型aav衣殼減少中和抗體的產(chǎn)生的一個或多個突變。在一些方面，所述方法包括在受試者中產(chǎn)生比全身性施用一定數(shù)量的足以將相當(dāng)數(shù)量的有效負(fù)載遞送至所述cns組織的包含seqid?no:1的vp衣殼多肽的野生型aav5衣殼時產(chǎn)生的中和抗體濃度更低的中和抗體濃度。

49、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠優(yōu)先靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織和心肌組織。

50、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有與選自由以下組成的組的序列具有至少85％序列同一性的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:2536、seq?id?no:3846、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?id?no:4317、seq?id?no:23、seq?id?no:22、seq?idno:964、seq?id?no:4288、seq?id?no:4338、seq?id?no:5037和seq?id?no:4936。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:2536、seq?id?no:3846、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?id?no:4317、seq?id?no:23、seq?id?no:22、seq?id?no:964、seq?id?no:4288、seq?id?no:4338、seq?idno:5037和seq?id?no:4936。

51、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠優(yōu)先靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織和骨骼肌組織。

52、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有與選自由以下組成的組的序列具有至少85％序列同一性的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seqid?no:2536、seq?id?no:1971、seq?id?no:3283、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?idno:2661、seq?id?no:307、seq?id?no:4317、seq?id?no:1268、seq?id?no:4288、seq?id?no:724和seq?id?no:5037。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:3306、seq?id?no:2536、seqid?no:1971、seq?id?no:3283、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?idno:307、seq?id?no:4317、seq?id?no:1268、seq?id?no:4288、seq?id?no:724和seq?id?no:5037。

53、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠優(yōu)先靶向中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織和肌肉組織。

54、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有與選自由以下組成的組的序列具有至少85％序列同一性的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:2536、seqid?no:3846、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?idno:4317、seq?id?no:23、seq?id?no:22、seq?id?no:964、seq?id?no:4288、seq?id?no:4290、seq?id?no:4338和seq?id?no:5037。在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:18、seq?id?no:3472、seq?id?no:262、seq?id?no:2536、seqid?no:3846、seq?id?no:3297、seq?id?no:4545、seq?id?no:2661、seq?id?no:1576、seq?idno:4317、seq?id?no:23、seq?id?no:22、seq?id?no:964、seq?id?no:4288、seq?id?no:4290、seq?id?no:4338和seq?id?no:5037。

55、在各個方面，本公開提供了一種用于治療受試者的疾患的方法中的重組腺相關(guān)病毒(raav)，所述方法包括：向所述受試者施用raav，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav9的至少100倍的dna富集遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

56、在各個方面，本公開提供了一種用于治療受試者的疾患的方法中的重組腺相關(guān)病毒(raav)，所述方法包括：向所述受試者施用raav，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav9的至少100倍的rna富集轉(zhuǎn)錄至被所述raav感染的所述cns組織。

57、在各個方面，本公開提供了一種用于治療受試者的疾患的方法中的重組腺相關(guān)病毒(raav)，所述方法包括：向所述受試者施用raav，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav5的至少5倍的dna富集遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

58、在各個方面，本公開提供了一種用于治療受試者的疾患的方法中的重組腺相關(guān)病毒(raav)，所述方法包括：向所述受試者施用raav，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代；用所述raav感染所述受試者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)組織；以及優(yōu)先將所述有效負(fù)載以是野生型aav5的至少5倍的rna富集轉(zhuǎn)錄至被所述raav感染的所述cns組織。

59、在各個方面，本公開提供了一種用于治療受試者的疾患的方法中的重組腺相關(guān)病毒(raav)，所述方法包括：向所述受試者施用raav，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域具有與以下序列具有至少85％同一性的序列：(a)seq?id?no:18，(b)seq?id?no:3472，(c)seq?id?no:262，(d)seq?id?no:3306，(e)seq?id?no:2028，(f)seq?id?no:2791，(g)seq?id?no:424，(h)seq?id?no:2536，(i)seq?id?no:1971，(j)seq?idno:415，(k)seq?id?no:3846，(l)seq?id?no:3283，(m)seq?id?no:1956，(n)seq?id?no:3297，(o)seq?id?no:4545，(p)seq?id?no:2661，(q)seq?id?no:1576，(r)seq?id?no:425，(s)seq?id?no:709，(t)seq?id?no:2168，(u)seq?id?no:54，(v)seq?id?no:429，(w)seq?idno:708，(x)seq?id?no:428，(y)seq?id?no:4119，(z)seq?id?no:3906，(aa)seq?id?no:2456，(bb)seq?id?no:2278，(cc)seq?id?no:5006，或(dd)seq?id?no:426；用所述raav感染所述受試者的cns組織；以及將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

60、在各個方面，本公開提供了一種用于治療受試者的疾患的方法中的重組腺相關(guān)病毒(raav)，所述方法包括：向所述受試者施用raav，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含vp衣殼多肽，所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:1的殘基581至589相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中所述vp衣殼多肽不具有seq?id?no:3、seq?id?no:4、seq?id?no:5、seq?id?no:6、seq?id?no:7或seq?id?no:8中的任一者的序列；用與包含seq?id?no:1的肽的野生型aav5衣殼相比具有至少3倍的cns組織向性的所述raav感染所述受試者的cns組織；以及將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

61、在各個方面，本公開提供了一種用于治療受試者的疾患的方法中的重組腺相關(guān)病毒(raav)，所述方法包括：向所述受試者施用raav，其中所述raav包封有效負(fù)載，并且其中所述raav包含如本文所述的vp衣殼多肽；用所述raav感染所述受試者的cns組織；以及將所述有效負(fù)載遞送至被所述raav感染的所述cns組織。

62、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠以是野生型aav9的至少25倍的dna富集優(yōu)先靶向心肌組織。

63、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:348、seq?id?no:2536、seq?id?no:1576、seq?id?no:4955、seq?id?no:5017、seq?id?no:4349、seq?id?no:4964、seq?id?no:293、seq?id?no:4314、seq?id?no:4995、seq?id?no:4366、seqid?no:4961、seq?id?no:4952、seq?id?no:5075、seq?id?no:4354、seq?id?no:5060、seq?idno:5138、seq?id?no:5206、seq?id?no:4288、seq?id?no:5092、seq?id?no:4059、seq?idno:4295、seq?id?no:5030、seq?id?no:4938、seq?id?no:2661、seq?id?no:5215、seq?idno:4960、seq?id?no:4969、seq?id?no:5023、seq?id?no:4934、seq?id?no:4545、seq?idno:4963、seq?id?no:4363、seq?id?no:5159和seq?id?no:4973。

64、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域；其中所述581-589區(qū)域具有與以下序列具有至少85％同一性的序列：(a)seq?id?no:348，(b)seq?id?no:2536，(c)seq?id?no:1576，(d)seq?id?no:4955，(e)seq?id?no:5017，(f)seq?id?no:4349，(g)seq?id?no:4964，(h)seq?id?no:293，(i)seq?id?no:4314，(j)seq?id?no:4995，(k)seq?id?no:4366，(l)seqid?no:4961，(m)seq?id?no:4952，(n)seq?id?no:5075，(o)seq?id?no:4354，(p)seq?idno:5060，(q)seq?id?no:5138，(r)seq?id?no:5206，(s)seq?id?no:4288，(t)seq?id?no:5092，(u)seq?id?no:4059，(v)seq?id?no:4295，(w)seq?id?no:5030，(x)seq?id?no:4938，(y)seq?id?no:2661，(z)seq?id?no:5215，(aa)seq?id?no:4960，(bb)seq?id?no:4969，(cc)seq?id?no:5023，或(dd)seq?id?no:4934。

65、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠以是野生型aav9的至少15倍的dna富集優(yōu)先靶向骨骼肌組織。

66、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:3472、seq?id?no:3297、seq?id?no:2661、seq?id?no:4545、seq?id?no:348、seq?id?no:18、seq?id?no:4349、seq?id?no:293、seq?id?no:5017、seq?id?no:4955、seq?id?no:4366、seqid?no:5092、seq?id?no:210、seq?id?no:4059、seq?id?no:2536、seq?id?no:5206和seq?idno:1971。

67、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域；其中所述581-589區(qū)域具有與以下序列具有至少85％同一性的序列：(a)seq?id?no:3472，(b)seq?id?no:3297，(c)seq?id?no:2661，(d)seq?id?no:4545，(e)seq?id?no:348，(f)seq?id?no:18，(g)seq?id?no:4349，(h)seq?id?no:293，(i)seq?id?no:5017，(j)seq?id?no:4955，(k)seq?id?no:4366，(l)seq?idno:5092，(m)seq?id?no:210，(n)seq?id?no:4059，(o)seq?id?no:2536，(p)seq?id?no:5206，(q)seq?id?no:1971，(r)seq?id?no:262，(s)seq?id?no:4343，(t)seq?id?no:4995，(u)seq?id?no:4009，(v)seq?id?no:5190，(w)seq?id?no:724，(x)seq?id?no:4288，(y)seqid?no:4973，(z)seq?id?no:4314，(aa)seq?id?no:1561，(bb)seq?id?no:5147，(cc)seq?idno:4238，或(dd)seq?id?no:4961。

68、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域與seq?id?no:9相比包含至少一個氨基酸取代，并且其中包含所述vp衣殼多肽的重組病毒衣殼能夠以是野生型aav9的至少20倍的dna富集優(yōu)先靶向肌肉組織。

69、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有選自由以下組成的組的序列：seq?id?no:348、seq?id?no:2536、seq?id?no:4955、seq?id?no:5017、seq?id?no:4349、seq?id?no:293、seqid?no:1576、seq?id?no:2661、seq?id?no:4964、seq?id?no:4314、seq?id?no:4995、seq?idno:4366、seq?id?no:4545、seq?id?no:4961、seq?id?no:5206、seq?id?no:5092、seq?idno:3472、seq?id?no:5075、seq?id?no:4059、seq?id?no:4354、seq?id?no:5060、seq?idno:4288、seq?id?no:4952、seq?id?no:5138、seq?id?no:18、seq?id?no:5030、seq?id?no:3297、seq?id?no:4295、seq?id?no:4363、seq?id?no:4963、seq?id?no:4973、seq?id?no:5159、seq?id?no:4960、seq?id?no:4938、seq?id?no:5157、seq?id?no:5023和seq?id?no:4969。

70、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域；其中所述581-589區(qū)域具有與以下序列具有至少85％同一性的序列：(a)seq?id?no:348，(b)seq?id?no:2536，(c)seq?id?no:4955，(d)seq?id?no:5017，(e)seq?id?no:4349，(f)seq?id?no:293，(g)seq?id?no:1576，(h)seq?id?no:2661，(i)seq?id?no:4964，(j)seq?id?no:4314，(k)seq?id?no:4995，(l)seq?id?no:4366，(m)seq?id?no:4545，(n)seq?id?no:4961，(o)seq?id?no:5206，(p)seqid?no:5092，(q)seq?id?no:3472，(r)seq?id?no:5075，(s)seq?id?no:4059，(t)seq?idno:4354，(u)seq?id?no:5060，(v)seq?id?no:4288，(w)seq?id?no:4952，(x)seq?id?no:5138，(y)seq?id?no:18，(z)seq?id?no:5030，(aa)seq?id?no:3297，(bb)seq?id?no:4295，(cc)seq?id?no:4363，或(dd)seq?id?no:4963。

71、在各個方面，本公開提供了一種病毒蛋白(vp)衣殼多肽，其中所述vp衣殼多肽包含對應(yīng)于vp1多肽的殘基581至589的581-589區(qū)域，其中所述581-589區(qū)域包含與seq?idno:4238-seq?id?no:4933或seq?id?no:4934-seq?id?no:5233中的任一者具有至少85％同一性的序列。

72、在一些方面，所述581-589區(qū)域具有seq?id?no:4238-seq?id?no:4933或seq?idno:4934-seq?id?no:5233中的任一者的序列。

73、通過引用并入

74、本文引用的所有參考文獻(xiàn)都通過引用并入，其程度如同每個單獨(dú)的出版物、數(shù)據(jù)庫條目(例如，genbank序列或geneid條目)、專利申請或?qū)＠急痪唧w且單獨(dú)地指示為出于所有目的通過引用整體并入一般。根據(jù)37c.f.r.§1.57(b)(1)，通過引用并入的陳述旨在由申請人涉及每一和每個單獨(dú)的出版物、數(shù)據(jù)庫條目(例如，genbank序列或geneid條目)、專利申請或?qū)＠?，其中的每一者都按?7c.f.r.§1.57(b)(2)進(jìn)行了明確的標(biāo)識，即使這樣的引用并不緊鄰?fù)ㄟ^引用并入的專用陳述。在說明書中包含通過引用并入的專用陳述(如果有的話)并不以任何方式削弱通過引用并入的一般陳述。本文引用的參考文獻(xiàn)并不旨在承認(rèn)所述參考文獻(xiàn)是相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)，也不構(gòu)成對這些出版物或文獻(xiàn)的內(nèi)容或日期的任何承認(rèn)。