本發(fā)明涉及腺苷受體拮抗劑合成，尤其是涉及一類2-胺基嘧啶類衍生物、其制備方法及含有該衍生物的藥物組合物以及其作為治療劑，特別是作a2br拮抗劑的用途和在制備用于治療通過對a2br的抑制而改善的病況或病癥的藥物中的用途。

背景技術(shù)：

1、腺苷(adenosine)，一種由腺嘌呤的n-9與d-核糖的c-1通過β-糖苷鍵連接而成的化合物，是許多生理功能的內(nèi)源性調(diào)節(jié)劑。腺苷與腺苷受體(adenosine?receptor,ar)結(jié)合引起胞內(nèi)下游信號變化，在心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)、呼吸系統(tǒng)、腎臟、脂肪和血小板的功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。腺苷受體是g蛋白偶聯(lián)受體(g-protein?coupled?receptor,gpcr)，具有典型的七次跨膜結(jié)構(gòu)，目前發(fā)現(xiàn)腺苷受體有4種亞型，分別是a1r、a2ar、a2br、a3r，這些受體被廣泛認(rèn)為是治療不同神經(jīng)、代謝和炎癥疾病的藥物靶點(diǎn)。這四個亞型中，a1r與a3r偶聯(lián)gi/o通路，激活后抑制腺苷酸環(huán)化酶(adenylyl?cyclase,ac)活性，降低胞內(nèi)camp水平；而a2ar和a2br偶聯(lián)gs通路，激活后增強(qiáng)腺苷酸環(huán)化酶活性，促進(jìn)camp的產(chǎn)生(borea?p?a,gessi?s,merighi?s,et?al.pharmacology?of?adenosine?receptors:the?state?of?the?art[j].physiological?reviews,2018,98(3):1591-625)。

2、腺苷受體廣泛分布于人體各系統(tǒng)，但不同亞型受體的組織分布有所差異。a1r在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心臟、腎臟和膀胱等部位相對富集，a2ar在紋狀體、嗅結(jié)節(jié)和免疫系統(tǒng)中有較高水平的表達(dá)，a3r在外周中的分布比中樞神經(jīng)系統(tǒng)豐富，存在于結(jié)腸粘膜、肺實(shí)質(zhì)和支氣管中，并廣泛分布在炎性細(xì)胞，包括肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等，a2br在中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)較少，主要分布在外周組織，包括近端結(jié)腸、眼球、肺、子宮、支氣管和膀胱等組織器官(dixona?k,gubitz?ak,sirinathsinghji?d?j?s,et?al.tissue?distribution?of?adenosinereceptor?mrnas?in?the?rat.1996,118(6),1461-1468)。不同亞型的腺苷受體對腺苷的親合力也不同，a1r、a2ar與a3r與腺苷的親合力較高，在生理?xiàng)l件下就能被激活而發(fā)揮作用，而a2br對腺苷的親合力較低，只有在腺苷濃度急劇升高的情況(如炎癥、腫瘤)下才能激活(vijayan?d,young?a,teng?m?w?l,et?al.targeting?immunosuppressive?adenosine?incancer[j].nature?reviews?cancer,2017,17(12):709-24)。

3、由于a2br對腺苷的親合力遠(yuǎn)低于其他三種腺苷受體，所以最初對a2br的研究較少，但是越來越多的證據(jù)表明這種亞型在癌癥、糖尿病以及腎臟、肺部和血管疾病的炎癥和免疫反應(yīng)方面發(fā)揮著重要作用。例如：deepakmittal等人研究發(fā)現(xiàn)，a2br在多種腫瘤中過度表達(dá)，與三陰性乳腺癌、多發(fā)性骨髓瘤和急性髓性白血病的不良預(yù)后相關(guān)；a2br的過表達(dá)促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖和迀移；a2br抑制劑與化療藥物或免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)用可以顯著降低小鼠三陰性乳腺癌模型中的腫瘤轉(zhuǎn)移；敲除小鼠體內(nèi)或人結(jié)腸癌細(xì)胞系中的a2br顯著降低結(jié)腸癌的轉(zhuǎn)移和細(xì)胞的成瘤性。這些結(jié)果均表明，抑制a2br可抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移，因此a2br有望成為治療腫瘤的一個理想靶點(diǎn)(mittal?d,sinha?d,barkauskas?d,young?a,kalimuthom,stannard?k,caramia?f,et?al.adenosine?2b?receptor?expression?on?cancer?cellspromotes?metastasis.cancer?research?2016,76(15),4372-4382)。此外，a2br還與炎癥相關(guān)。臨床研究顯示，在哮喘患者的支氣管肺泡灌洗液中存在高濃度的腺苷，這些腺苷會引發(fā)哮喘病人的支氣管收縮(singh?patidar?b,meena?a,kumar?m,et?al.adenosinemetabolism?in?copd:a?study?on?adenosine?levels,5'-nucleotidase,adenosinedeaminase?and?its?isoenzymes?activity?in?serum,lymphocytes?and?erythrocytes[j].copd,2018,15(6):559-71)。而a2br介導(dǎo)的肥大細(xì)胞、氣道和支氣管上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、腸上皮細(xì)胞、單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞中幾種炎癥細(xì)胞因子(il-4,il-6,il-8,il-10和內(nèi)皮素等)的釋放，在哮喘中起到了關(guān)鍵的病理作用(karmouty-quintana?h,zhong?h,acero?l,et?al.the?a2b?adenosine?receptor?modulates?pulmonaryhypertension?associated?with?interstitial?lung?disease[j].the?faseb?journal,2012,26(6):2546-57)，因此研究人員認(rèn)為a2br可能是腺苷在人類哮喘中的作用的主要媒介。綜上，a2br拮抗劑在抗腫瘤及炎癥相關(guān)疾病的治療中具有廣闊的前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的之一在于提供一種2-胺基嘧啶類衍生物化合物，具有選擇性拮抗a2br腺苷受體的功能。

2、本發(fā)明的目的之二在于提供一種上述化合物的制備方法。

3、本發(fā)明的目的之三在于提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含作為有效成分的上述化合物以及任選的藥學(xué)上可接受的輔料。

4、本發(fā)明的目的之四在于提供一種上述化合物或包含其的組合物在制備a2br拮抗劑中的用途。

5、本發(fā)明的目的之五在于提供一種上述化合物或包含其的組合物在制備用于預(yù)防和/或治療通過對a2br的抑制而改善的疾病的藥物中的用途。

6、本發(fā)明一方面提供了一種式i化合物，或其互變異構(gòu)體、對映體、非對映體、消旋體，其氘代物或可藥用的鹽，

7、

8、其中：

9、x選自o或nh；

10、r1和r2各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、c1-c6烷基；或者，r1和r2連同與其相連的碳原子共同構(gòu)成c3-c10環(huán)烷基；優(yōu)選為氫、鹵素、c1-c3烷基；

11、n為0，1，2或3，優(yōu)選為1；

12、環(huán)a和環(huán)b各自獨(dú)立地選自c3-c10環(huán)烷基、含有選自n、o和s的1至3個雜原子的3-10元雜環(huán)基、c6-c10芳基、含有選自n、o和s的1至3個雜原子的5-10元雜芳基；

13、每次出現(xiàn)時，各個r3相同或者不同，各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、c1-c6烷基、鹵代c1-c6烷基、c3-c10環(huán)烷基、3-10元雜環(huán)基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、羥基、-or5、氰基、氨基、-so2r6、-nr7r8、-nhr7、硝基；

14、每次出現(xiàn)時，各個r4相同或者不同，各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、c1-c6烷基、鹵代c1-c6烷基、c3-c10環(huán)烷基、含有選自n、o和s的1至3個雜原子的3-10元雜環(huán)基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、羥基、-or5、氰基、氨基、-so2r6、-nr7r8、-nhr7、硝基；

15、r5和r6各自獨(dú)立地選自c1-c6烷基、鹵代c1-c6烷基、c3-c10環(huán)烷基、含有選自n、o和s的1至3個雜原子的3-10元雜環(huán)基、c6-c10芳基或含有選自n、o和s的1至3個雜原子的5-10元雜芳基；

16、r7和r8各自獨(dú)立地選自c1-c6烷基、鹵代c1-c6烷基、c3-c10環(huán)烷基、含有選自n、o和s的1至3個雜原子的3-10元雜環(huán)基、c6-c10芳基或含有選自n、o和s的1至3個雜原子的5-10元雜芳基；或者，r7和r8連同與其相連的氮原子共同構(gòu)成3-10元雜環(huán)基；

17、a為0，1，2或3；

18、b為0，1，2或3。

19、在一些實(shí)施方式中，環(huán)a和環(huán)b各自獨(dú)立選自c6-c10芳基、含有選自n、o和s的1或2個雜原子的5-6元雜芳基；c6-c10芳基優(yōu)選為苯基；含有選自n、o和s的1或2個雜原子的5-6元雜芳基優(yōu)選為

20、在一些實(shí)施方式中，式i化合物選自如下式i-a或i-b或i-c化合物：

21、

22、其中，x、r1、r2、r3、r4的定義與前述相同；y選自o或s；z1、z2、z3其中之一為n，其余為ch(即z1＝n，z2、z3＝ch；或z2＝n，z1、z3＝ch；或z3＝n，z1、z2＝ch)。

23、在一些實(shí)施方式中，每次出現(xiàn)時，各個r3各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、c1-c3烷基、鹵代c1-c3烷基、氰基、-or5、-nr7r8、-nhr7；

24、每次出現(xiàn)時，各個r4各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、c1-c3烷基、鹵代c1-c3烷基、氰基、-or5、-nr7r8、-nhr7；

25、r5選自c1-c3烷基、c3-c6環(huán)烷基、氯代c1-c3烷基；

26、r7和r8各自獨(dú)立選自c1-c3烷基。

27、在一些實(shí)施方式中，式i-a化合物選自如下式i-a-1或式i-a-2化合物：

28、

29、其中，x、r1、r2、r3、r4的定義與前述相同。

30、在一些實(shí)施方式中，式i-b化合物選自如下式i-b-1化合物：

31、

32、其中，x、r1、r2、r3、y的定義與前述相同。

33、在一些實(shí)施方式中，式i-c化合物選自如下式i-c-1化合物：

34、

35、其中，x、r1、r2、z1、z2、z3的定義與前述相同。

36、本發(fā)明的典型化合物包括但不限于：

37、

38、

39、

40、

41、

42、本發(fā)明中的術(shù)語定義如下：

43、“鹵素”可以為氟、氯、溴或碘。

44、“c1-c6烷基”是指具有1-6個碳原子的鏈狀烷基；其具體實(shí)例可以包括甲基、乙基、丙基、正丙基、異丙基、丁基、正丁基、異丁基、叔丁基、1-甲基-丁基、1-乙基-丁基、戊基、正戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、己基、正己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、4-甲基-2-戊基、3,3-二甲基丁基、2-乙基丁基以及類似基團(tuán)，但不限于此。c1-c3烷基的含義以此類推。

45、“鹵代c1-c6烷基”為烷基的任意碳(伯、仲或叔)被鹵素中的的一種或一種以上基團(tuán)置換所得的基團(tuán)，具有1～6個碳原子。

46、“c2-c6烯基”是指具有2-6個碳原子的烯基；其具體實(shí)例可以包括乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、戊烯基、異戊烯基、己烯基等。

47、“c2-c6炔基”是指具有2-6個碳原子的炔基；其具體實(shí)例可以包括乙炔基、丙炔基、異丙炔基、丁炔基、異丁炔基、戊炔基、異戊炔基、己炔基等。

48、“c3-c10環(huán)烷基”是指包含3-10個環(huán)碳原子的完全飽和的1價(jià)環(huán)狀烴類化合物基團(tuán)，其具體實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基。c3-c6環(huán)烷基的含義以此類推。

49、“3-10元雜環(huán)基”是指環(huán)上含有1至4個選自氮、氧、硫、s(＝o)、s(＝o)2中的雜原子的3-10元非芳香性環(huán)狀基團(tuán)，其具體實(shí)例包括氧雜環(huán)丁烷、四氫咪唑、四氫呋喃。5-6元雜環(huán)基的含義以此類推。

50、“c6-c10芳基”是指具有6至10個碳原子的單環(huán)或多環(huán)芳基；其具體實(shí)例包括苯基。

51、“5-10元雜芳基”是指環(huán)上含有1至4個選自氮、氧、硫、s(＝o)、s(＝o)2中的雜原子的環(huán)原子數(shù)為5-10的芳族基團(tuán)，其具體實(shí)例包括吡啶、噠嗪、嘧啶、吡咯等。5-6元雜芳基的含義以此類推。

52、“氘代物”是指化合物結(jié)構(gòu)中的一個或多個氫(1h)被氘(2h)取代所形成的結(jié)構(gòu)。

53、“可藥用的鹽”是指保留了特定化合物的游離酸或堿的生物學(xué)效力而沒有生物學(xué)不良作用的鹽，例如酸(包括有機(jī)酸和無機(jī)酸)加成鹽或堿(包括有機(jī)堿和無機(jī)堿)加成鹽。本發(fā)明可藥用的鹽可由含有酸根或堿基的母體化合物通過常規(guī)化學(xué)方法合成，一般情況下，其制備方法是：在水或有機(jī)溶劑或兩者的混合物中，由游離酸或堿形式的母體化合物與化學(xué)計(jì)量適當(dāng)?shù)膲A或酸反應(yīng)來制備。可藥用的鹽包括但不限于鹽酸鹽、甲磺酸鹽、馬來酸鹽等。

54、本技術(shù)所涉及的化合物及其氘代物、可藥用的鹽可具有異構(gòu)體或消旋體，例如光學(xué)異構(gòu)體(包括非對映異構(gòu)體和對映異構(gòu)體)、互變異構(gòu)體以及它們的混合物等，但不限于此。這些異構(gòu)體也包含在本發(fā)明的權(quán)利要求所限定的范圍中。

55、本發(fā)明的另一方面涉及一種制備式i化合物的方法，包括以下步驟：

56、式(1)化合物與式(2)化合物反應(yīng)的步驟：

57、

58、其中r1、r2、r3、r4、x、n、環(huán)a、環(huán)b、a、b的定義如上所述。

59、式(1)的化合物與式(2)的化合物發(fā)生縮合反應(yīng)，得到式ⅰ化合物。

60、所述縮合條件為式(1)的化合物與式(2)的化合物堿性條件下與縮合劑在溶劑中反應(yīng)。

61、優(yōu)選地，所述堿性條件所用的堿包括三乙胺、二異丙基乙胺、dbu的一種或兩種以上；

62、優(yōu)選地，所述縮合劑包括edci、hobt、hatu、hbtu、hctu、hobt、dcc中的一種或兩種以上；

63、優(yōu)選地，所述溶劑包括二氯甲烷、乙腈、dmf、dmso中的一種或兩種以上。

64、在一些實(shí)施方式中，所述方法包括下述的合成路線：

65、主要通過合成路線ⅰ合成：

66、

67、合成路線ⅰ包括以下步驟：

68、步驟1：向圓底燒瓶中加入化合物ι-1、nah、ea和thf，用油浴加熱進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)溫度為60℃；反應(yīng)6小時結(jié)束，純化即可得到化合物i-2；化合物ι-1、nah和ea的當(dāng)量比為1:2:1。

69、步驟2：向圓底燒瓶中加入化合物ι-2、naoh、碳酸胍和h2o，用油浴加熱進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)溫度為100℃；反應(yīng)10小時后，冷卻至室溫，加入鹽酸調(diào)節(jié)ph＝2，攪拌1小時后反應(yīng)結(jié)束，純化即可得到化合物i-3；化合物ι-2、naoh和碳酸胍的當(dāng)量比為1:3:0.5。

70、步驟3：向圓底燒瓶中加入化合物ι-3、h2so4和ch3oh，用油浴加熱進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)溫度為70℃；反應(yīng)10小時結(jié)束，純化即可得到化合物i-4；化合物ι-3和h2so4的當(dāng)量比為1:3。

71、步驟4：向圓底燒瓶中加入化合物ι-4、tmscl、ki和ch3cn，室溫?cái)嚢?4小時，反應(yīng)結(jié)束，純化即可得到化合物i-5；化合物ι-4、tmscl和ki的當(dāng)量比為1:1:1。

72、步驟5：向圓底燒瓶中加入化合物ι-5、clso3h和pocl3，用油浴加熱進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)溫度為90℃；反應(yīng)3小時結(jié)束，純化即可得到化合物i-6；化合物ι-5、clso3h和pocl3的當(dāng)量比為1:0.3:15。

73、步驟6：向圓底燒瓶中加入化合物ι-6、ι-7、pd(pph3)4、na2co3、dioxane和h2o，用油浴加熱進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)溫度為90℃；反應(yīng)8小時后，冷卻至室溫，加入飽和lioh溶液，攪拌2小時后反應(yīng)結(jié)束，純化即可得到式(1)化合物；化合物ι-6、ι-7、pd(pph3)4和na2co3的當(dāng)量比為1:1.2:0.1:3。

74、步驟7：向圓底燒瓶中加入式(1)化合物、式(2)化合物、hatu、dipea和dmf，室溫?cái)嚢?小時，反應(yīng)結(jié)束，純化即可得到化合物i-8；式(1)化合物、式(2)化合物、hatu和dipea的當(dāng)量比為1:1.2:1.2:3。

75、其中，式(1)化合物的合成路線按照以下兩條路線：

76、當(dāng)x為o時，式(1)化合物主要通過合成路線ⅱ合成：

77、

78、合成路線ⅱ包括以下步驟：

79、步驟1：向雙頸瓶中加入化合物ⅱ-1、ⅱ-2、pph3和thf，用氬氣置換空氣，室溫?cái)嚢?分鐘，滴加diad，室溫反應(yīng)2小時。反應(yīng)結(jié)束后，柱層析純化即可得到化合物ⅱ-3；化合物ⅱ-1、ⅱ-2、pph3和diad的當(dāng)量比為1:1.2:2:1.2。

80、步驟2：向圓底燒瓶中加入化合物ⅱ-3和ch3oh，之后加入水合肼，60℃反應(yīng)2小時。反應(yīng)結(jié)束后，柱層析純化即可得到化合物ⅱ-4。

81、當(dāng)x為nh時，式(1)化合物通過合成路線ⅲ合成：

82、

83、合成路線ⅲ包括以下步驟：

84、步驟1：向圓底燒瓶中加入化合ⅲ-1、k2co3、dmf和nh2nhboc，60℃攪拌2小時，反應(yīng)結(jié)束，純化即可得到化合物ⅲ-2；化合物ⅲ-1、nah和nh2nhboc的當(dāng)量比為1:2:2。

85、步驟2：向圓底燒瓶中加入化合ⅲ-2、hcl/dioxane和ch3oh，60℃攪拌8小時，反應(yīng)結(jié)束，純化即可得到化合物ⅲ-3；化合物ⅲ-2和hcl/dioxane的當(dāng)量比為1:20。

86、本發(fā)明的另一目的是提供了一種藥物組合物，其包含治療有效量的選自式i化合物，其互變異構(gòu)體、對映體、非對映體、消旋體，其氘代物和可藥用的鹽中的一種或幾種，所述藥物組合物還可以包含藥學(xué)上可接受的載體。

87、本發(fā)明的另一目的是提供了一種式i化合物，或其互變異構(gòu)體、對映體、非對映體、消旋體，其氘代物或可藥用的鹽，或，上述藥物組合物在制備a2br拮抗劑中的用途。

88、本發(fā)明的另一目的是提供了一種式i化合物，或其互變異構(gòu)體、對映體、非對映體、消旋體，其氘代物或可藥用的鹽，或，上述藥物組合物在制備用于預(yù)防和/或治療通過對a2br的抑制而改善的疾病的藥物中的用途。所述通過對a2br的抑制而改善的疾病包括腫瘤或炎癥相關(guān)疾病。特別地，所述腫瘤包括實(shí)體瘤、黑色素瘤、腦瘤、食管癌、肝細(xì)胞癌、胃癌、胰腺癌、結(jié)直腸癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、口腔癌、鱗狀細(xì)胞癌、乳腺癌、和非小細(xì)胞肺癌等；所述炎癥相關(guān)疾病包括過敏性哮喘、肺纖維化和糖尿病足潰病等。

89、本發(fā)明的另一目的是提供了一種預(yù)防和/或治療通過對a2br的抑制而改善的疾病的方法，所述方法包括施用治療有效量的選自式i化合物，其互變異構(gòu)體、對映體、非對映體、消旋體，其氘代物和可藥用的鹽中的一種或幾種或上述藥物組合物給患者。

90、本發(fā)明具有以下有益效果：

91、本發(fā)明的化合物對a2br具有較好的抑制活性，是一種高效的a2br拮抗劑，在抗腫瘤及炎癥相關(guān)疾病的治療中具有廣闊的前景。此類化合物可以降低腫瘤病灶的il-10、mcp-1及cd11b+gr1+細(xì)胞的水平，逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境中的免疫抑制。此類化合物可以抑制il-6產(chǎn)生及th17的分化，減輕eae的癥狀。

92、在上文中已經(jīng)詳細(xì)地描述了本發(fā)明，但是上述實(shí)施方式本質(zhì)上僅是例示性，且并不欲限制本發(fā)明。此外，本文并不受前述現(xiàn)有技術(shù)或
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
或以下實(shí)施例中所描述的任何理論的限制。