本公開涉及抗體或其抗原結(jié)合片段、抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體(例如雙特異性抗體)和抗體藥物綴合物。

背景技術(shù)：

1、癌癥是目前具有最高人類死亡率的疾病之一。根據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，在2012年，全球癌癥發(fā)病率和死亡病例的數(shù)量分別達(dá)1400萬和820萬。

2、最近抗癌抗體在臨床和商業(yè)上取得的成功引起了人們對(duì)基于抗體的治療的極大興趣。需要進(jìn)一步開發(fā)用于治療癌癥的抗體和抗體藥物綴合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本公開涉及抗her2抗體或其抗原結(jié)合片段、抗trop2抗體或其抗原結(jié)合片段、特異性結(jié)合兩個(gè)不同抗原(例如her2和trop2)的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體(例如雙特異性抗體或其抗原結(jié)合片段)和涉及這些抗體或其抗原結(jié)合片段的抗體藥物綴合物。

2、在一方面，本公開涉及結(jié)合her2(人表皮生長因子受體2)的抗體或其抗原結(jié)合片段，該抗體或其抗原結(jié)合片段包括：

3、重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，其中該vh?cdr1區(qū)包括與選擇的vh?cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh?cdr2區(qū)包括與選擇的vh?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh?cdr3區(qū)包括與選擇的vh?cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列；和

4、輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括cdr1、2和3，其中該vl?cdr1區(qū)包括與選擇的vl?cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl?cdr2區(qū)包括與選擇的vl?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl?cdr3區(qū)包括與選擇的vl?cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，

5、其中所選的vh?cdr1、2和3氨基酸序列以及所選的vl?cdr1、2和3氨基酸序列是以下項(xiàng)中的一者：

6、(1)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:7-9所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

7、(2)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:10-12所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

8、(3)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:13-15所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

9、(4)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:16-18所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

10、(5)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:19-21所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

11、(6)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:22-24所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

12、(7)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:25-27所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

13、(8)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:28-30所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

14、(9)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:31-33所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

15、(10)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:34-36所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示。

16、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:7-9所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

17、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:10-12所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

18、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:13-15所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

19、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:16-18所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

20、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:19-21所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

21、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:22-24所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

22、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:25-27所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

23、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:28-30所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

24、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:31-33所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

25、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:34-36所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

26、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段特異性結(jié)合人her2或犬her2。

27、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是人或人源化抗體或其抗原結(jié)合片段。

28、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是單鏈可變片段(scfv)。

29、在一方面，本公開涉及結(jié)合her2的抗體或其抗原結(jié)合片段，該抗體或其抗原結(jié)合片段包括

30、重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括與選擇的vh序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，和輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括與選擇的vl序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，其中所選的vh序列和所選的vl序列是以下項(xiàng)中的一者：

31、(1)所選的vh序列是seq?id?no:38，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

32、(2)所選的vh序列是seq?id?no:39，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

33、(3)所選的vh序列是seq?id?no:40，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

34、(4)所選的vh序列是seq?id?no:41，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

35、(5)所選的vh序列是seq?id?no:42，并且所選的vl序列是seq?id?no:37。

36、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:38的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

37、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:39的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

38、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:40的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

39、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:41的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

40、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:42的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

41、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段特異性結(jié)合人her2或犬her2。

42、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是人或人源化抗體或其抗原結(jié)合片段。

43、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是單鏈可變片段(scfv)。

44、在一方面，本公開涉及一種與本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段交叉競爭的抗體或其抗原結(jié)合片段。

45、在一方面，本公開涉及結(jié)合her2的抗體或其抗原結(jié)合片段，該抗體或其抗原結(jié)合片段包括

46、重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括與所選的vh序列的vh?cdr1、vh?cdr2和vh?cdr3相同的vh?cdr1、vh?cdr2和vh?cdr3；和

47、輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括與所選的vl序列的vl?cdr1、vl?cdr2和vl?cdr3相同的vl?cdr1、vl?cdr2和vl?cdr3，

48、其中所選的vh序列和所選的vl序列是以下項(xiàng)中的一者：

49、(1)所選的vh序列是seq?id?no:38，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

50、(2)所選的vh序列是seq?id?no:39，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

51、(3)所選的vh序列是seq?id?no:40，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

52、(4)所選的vh序列是seq?id?no:41，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

53、(5)所選的vh序列是seq?id?no:42，并且所選的vl序列是seq?id?no:37。

54、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合片段是雙特異性或多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段。

55、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合片段還特異性結(jié)合trop2。

56、在一方面，本公開涉及一種包括編碼多肽的多核苷酸的核酸，該多肽包括：

57、(1)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:7-9所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)(vl)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

58、(2)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:10-12所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

59、(3)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:13-15所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

60、(4)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:16-18所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

61、(5)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:19-21所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

62、(6)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:22-24所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

63、(7)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:25-27所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

64、(8)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:28-30所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

65、(9)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:31-33所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

66、(10)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2、3，該cdr1、2、3分別包括如seq?id?no:34-36所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

67、(11)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:38所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

68、(12)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:39所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

69、(13)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:40所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

70、(14)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:41所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

71、(15)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:42所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

72、(16)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:38所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

73、(17)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:39所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

74、(18)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:40所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；

75、(19)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:41所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2；或

76、(20)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:42所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合her2。

77、在一些實(shí)施方案中，當(dāng)所述vh與vl配對(duì)時(shí)特異性結(jié)合人her2或犬her2。

78、在一些實(shí)施方案中，免疫球蛋白重鏈或其片段是人或人源化免疫球蛋白重鏈或其片段。

79、在一些實(shí)施方案中，核酸編碼單鏈可變片段(scfv)。

80、在一些實(shí)施方案中，核酸是cdna。

81、在一方面，本公開涉及結(jié)合trop2(滋養(yǎng)層細(xì)胞表面抗原2)的抗體或其抗原結(jié)合片段，該抗體或其抗原結(jié)合片段包括：

82、重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，其中該vh?cdr1區(qū)包括與選擇的vh?cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh?cdr2區(qū)包括與選擇的vh?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh?cdr3區(qū)包括與選擇的vh?cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列；和

83、輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括cdr1、2和3，其中該vl?cdr1區(qū)包括與選擇的vl?cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl?cdr2區(qū)包括與選擇的vl?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl?cdr3區(qū)包括與選擇的vl?cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，

84、其中所選的vh?cdr1、2和3氨基酸序列以及所選的vl?cdr1、2和3氨基酸序列是以下項(xiàng)中的一者：

85、(1)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:43-45所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

86、(2)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:46-48所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

87、(3)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:49-51所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

88、(4)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:52-54所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

89、(5)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:55-57所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

90、(6)所選的vh?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:58-60所示，并且所選的vlcdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示。

91、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:43-45所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

92、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:46-48所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

93、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:49-51所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

94、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:52-54所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

95、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:55-57所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

96、在一些實(shí)施方案中，根據(jù)chothia編號(hào)規(guī)則，vh包括分別具有如seq?id?no:58-60所示的氨基酸序列的cdr1、2、3，并且vl包括分別具有如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列的cdr1、2、3。

97、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段特異性結(jié)合人trop2或犬trop2。

98、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是人或人源化抗體或其抗原結(jié)合片段。

99、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是單鏈可變片段(scfv)。

100、在一方面，本公開涉及結(jié)合trop2的抗體或其抗原結(jié)合片段，該抗體或其抗原結(jié)合片段包括

101、重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括與選擇的vh序列具有至少90％的同一性的氨基酸序列，和輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括與選擇的vl序列具有至少90％的同一性的氨基酸序列，其中所選的vh序列和所選的vl序列是以下項(xiàng)中的一者：

102、(1)所選的vh序列是seq?id?no:61，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

103、(2)所選的vh序列是seq?id?no:62，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

104、(3)所選的vh序列是seq?id?no:63，并且所選的vl序列是seq?id?no:37。

105、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:61的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

106、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:62的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

107、在一些實(shí)施方案中，vh包括seq?id?no:63的序列，vl包括seq?id?no:37的序列。

108、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段特異性結(jié)合人trop2或犬trop2。

109、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是人或人源化抗體或其抗原結(jié)合片段。

110、在一些實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段是單鏈可變片段(scfv)。

111、在一方面，本公開涉及一種與本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段交叉競爭的抗體或其抗原結(jié)合片段。

112、在一方面，本公開涉及結(jié)合trop2的抗體或其抗原結(jié)合片段，該抗體或其抗原結(jié)合片段包括

113、重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括與所選的vh序列的vh?cdr1、vh?cdr2和vh?cdr3相同的vh?cdr1、vh?cdr2和vh?cdr3；和

114、輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括與所選的vl序列的vl?cdr1、vl?cdr2和vl?cdr3相同的vl?cdr1、vl?cdr2和vl?cdr3，

115、其中所選的vh序列和所選的vl序列是以下項(xiàng)中的一者：

116、(1)所選的vh序列是seq?id?no:61，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

117、(2)所選的vh序列是seq?id?no:62，并且所選的vl序列是seq?id?no:37；

118、(3)所選的vh序列是seq?id?no:63，并且所選的vl序列是seq?id?no:37。

119、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合片段是雙特異性或多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段。

120、在一些實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合片段還特異性結(jié)合her2。

121、在一方面，本公開涉及一種包括編碼多肽的多核苷酸的核酸，該多肽包括：

122、(1)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括重鏈可變區(qū)(vh)，該vh包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:43-45所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)(vl)配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

123、(2)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:46-48所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

124、(3)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:49-51所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；或

125、(4)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:52-54所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

126、(5)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:55-57所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

127、(6)免疫球蛋白重鏈或其片段，該免疫球蛋白重鏈或其片段包括vh，該vh包括cdr1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:58-60所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:37所示的氨基酸序列的vl配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

128、(7)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:61所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

129、(8)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:62所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

130、(9)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:1-3所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:63所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

131、(10)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:61所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

132、(11)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:62所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2；

133、(12)免疫球蛋白輕鏈或其片段，該免疫球蛋白輕鏈或其片段包括輕鏈可變區(qū)(vl)，該vl包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，該cdr1、2和3分別包括如seq?id?no:4-6所示的氨基酸序列，并且當(dāng)與包括如seq?id?no:63所示的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(vh)配對(duì)時(shí)結(jié)合trop2。

134、在一些實(shí)施方案中，當(dāng)所述vh與vl配對(duì)時(shí)特異性結(jié)合人trop2或犬trop2。

135、在一些實(shí)施方案中，免疫球蛋白重鏈或其片段是人或人源化免疫球蛋白重鏈或其片段。

136、在一些實(shí)施方案中，核酸編碼單鏈可變片段(scfv)。

137、在一些實(shí)施方案中，核酸是cdna。

138、在一方面，本公開涉及一種抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體，該抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體包括特異性結(jié)合her2的第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域和特異性結(jié)合trop2的第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

139、在一些實(shí)施方案中，第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括第一重鏈可變區(qū)(vh1)和第一輕鏈可變區(qū)(vl1)；并且第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括第二重鏈可變區(qū)(vh2)和第二輕鏈可變區(qū)(vl2)。

140、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)(vh1)包括互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)1、2和3，其中該vh1?cdr1區(qū)包括與選擇的vh1?cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh1?cdr2區(qū)包括與選擇的vh1?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh1?cdr3區(qū)包括與選擇的vh?cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列；并且

141、第一輕鏈可變區(qū)(vl1)包括cdr1、2和3，其中該vl1?cdr1區(qū)包括與選擇的vl1cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl1?cdr2區(qū)包括與選擇的vl1?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl1?cdr3區(qū)包括與選擇的vl?cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，

142、其中所選的vh1?cdr1、2和3氨基酸序列、所選的vl1?cdr1、2和3氨基酸序列是以下項(xiàng)中的一者：

143、(1)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:7-9所示，并且所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

144、(2)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:10-12所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

145、(3)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:13-15所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

146、(4)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:16-18所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

147、(5)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:19-21所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

148、(6)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:22-24所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

149、(7)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:25-27所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

150、(8)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:28-30所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

151、(9)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:31-33所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

152、(10)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:34-36所示，并且所選的vl1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示。

153、在一些實(shí)施方案中，第二重鏈可變區(qū)(vh2)包括cdr1、2和3，其中該vh2?cdr1區(qū)包括與選擇的vh2?cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh2?cdr2區(qū)包括與選擇的vh2?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vh2?cdr3區(qū)包括與選擇的vh2cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列；并且

154、第二輕鏈可變區(qū)(vl2)包括cdr1、2和3，其中該vl2?cdr1區(qū)包括與選擇的vl2cdr1氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl2?cdr2區(qū)包括與選擇的vl2?cdr2氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，該vl2?cdr3區(qū)包括與選擇的vl2?cdr3氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的氨基酸序列，其中所選的vh2?cdr1、2和3氨基酸序列以及所選的vl2?cdr1、2和3氨基酸序列是以下項(xiàng)中的一者：

155、(1)所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:43-45所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

156、(2)所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:46-48所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

157、(3)所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:49-51所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

158、(4)所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:52-54所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

159、(5)所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:55-57所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示；

160、(6)所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:58-60所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:4-6所示。

161、在一些實(shí)施方案中，

162、(1)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:10-12所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:49-51所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

163、(2)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:19-21所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:49-51所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

164、(3)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:7-9所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?idno:49-51所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

165、(4)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:7-9所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?idno:46-48所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

166、(5)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:10-12所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:46-48所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

167、(6)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:19-21所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:46-48所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

168、(7)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:7-9所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?idno:43-45所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

169、(8)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:10-12所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:43-45所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

170、(9)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:19-21所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:43-45所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

171、(10)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:13-15所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:49-51所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

172、(11)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:13-15所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:46-48所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

173、(12)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:13-15所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:43-45所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

174、(13)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:16-18所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:49-51所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

175、(14)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:16-18所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:46-48所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示；

176、(15)所選的vh1?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:16-18所示，所選的vl1cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示，所選的vh2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:43-45所示，并且所選的vl2?cdr1、2、3氨基酸序列分別如seq?id?no:1-3所示。

177、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:39具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:63具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

178、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:42具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:63具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

179、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:38具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:63具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

180、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:38具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:62具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

181、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:39具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:62具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

182、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:42具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:62具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

183、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:38具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:61具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

184、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:39具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:61具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

185、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:42具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:61具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％、95％或100％的同一性的序列。

186、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:40具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:63具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列。

187、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:41具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:63具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列。

188、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:40具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:62具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列。

189、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:41具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:62具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列。

190、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:40具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:61具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列。

191、在一些實(shí)施方案中，第一重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:41具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第一輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，第二重鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:61具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列，并且第二輕鏈可變區(qū)包括與seq?id?no:37具有至少80％、85％、90％或95％的同一性的序列。

192、在一些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體是雙特異性抗體。

193、在一些實(shí)施方案中，第一輕鏈可變區(qū)和第二輕鏈可變區(qū)相同。

194、在一方面，本公開涉及一種載體，該載體包括本文所述的核酸、或編碼本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段的核酸、或編碼本文所述的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體的核酸中的一者或多者。

195、在一方面，本公開涉及一種細(xì)胞，該細(xì)胞包括本文所述的載體。

196、在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞是cho細(xì)胞。

197、在一方面，本公開涉及一種細(xì)胞，該細(xì)胞包括本文所述的核酸、或編碼本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段的核酸、或編碼本文所述的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體的核酸中的一者或多者。

198、在一方面，本公開涉及一種產(chǎn)生抗體或其抗原結(jié)合片段或抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體的方法，該方法包括

199、(a)在足以使本文所述的細(xì)胞產(chǎn)生該抗體或其抗原結(jié)合片段或該抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體的條件下培養(yǎng)該細(xì)胞；以及

200、(b)收集由該細(xì)胞產(chǎn)生的該抗體或其抗原結(jié)合片段或該抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體。

201、在一方面，本公開涉及一種抗體藥物綴合物，該抗體藥物綴合物包括共價(jià)結(jié)合至以下各項(xiàng)的治療劑：

202、(a)本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段；或

203、(b)本文所述的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體。

204、在一些實(shí)施方案中，治療劑是細(xì)胞毒性劑或細(xì)胞生長抑制劑。

205、在一些實(shí)施方案中，治療劑是mmae或mmaf。

206、在一方面，本公開涉及一種治療患有癌癥的受試者的方法，該方法包括：向該受試者施用治療有效量的組合物，該組合物包含本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、本文所述的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體、或本文所述的抗體藥物綴合物。

207、在一些實(shí)施方案中，受試者患有實(shí)體瘤。

208、在一些實(shí)施方案中，癌癥是甲狀腺癌、尿路上皮癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、腎癌、宮頸癌、卵巢癌、肺癌、子宮內(nèi)膜癌、皮膚癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、肝癌、淋巴瘤或神經(jīng)膠質(zhì)瘤。

209、在一些實(shí)施方案中，癌癥是宮頸癌、前列腺癌、甲狀腺癌、尿路上皮癌、頭頸癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、類癌、皮膚癌、肝癌或睪丸癌。

210、在一些實(shí)施方案中，癌癥是多發(fā)性骨髓瘤或腎癌。

211、在一些實(shí)施方案中，受試者是人。

212、在一些實(shí)施方案中，受試者是非人動(dòng)物。

213、在一方面，本公開涉及一種降低腫瘤生長速率的方法，該方法包括

214、使腫瘤細(xì)胞與有效量的組合物接觸，該組合物包含本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、本文所述的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體、或本文所述的抗體藥物綴合物。

215、在一方面，本公開涉及一種殺死腫瘤細(xì)胞的方法，該方法包括使該腫瘤細(xì)胞與有效量的組合物接觸，該組合物包含本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、本文所述的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體、或本文所述的抗體藥物綴合物。

216、在一方面，本公開涉及一種藥物組合物，該藥物組合物包含藥學(xué)上可接受的載體和

217、(a)本文所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，

218、(b)本文所述的抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體，或

219、(c)本文所述的抗體藥物綴合物。

220、在一方面，本公開涉及一種抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體，該抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體包括特異性結(jié)合her2的第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域和特異性結(jié)合trop2的第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

221、如本文所用，術(shù)語“抗體”是指含有至少一個(gè)(例如，一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或六個(gè))互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)(例如，來自免疫球蛋白輕鏈的三個(gè)cdr中的任一者或來自免疫球蛋白重鏈的三個(gè)cdr中的任一者)，并且能夠特異性結(jié)合表位的任何抗原結(jié)合分子?？贵w的非限制性示例包括：單克隆抗體、多克隆抗體、多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)、單鏈抗體、嵌合抗體、人抗體和人源化抗體。在一些實(shí)施方案中，抗體可含有人抗體的fc區(qū)。術(shù)語抗體還包括衍生物，例如雙特異性抗體、單鏈抗體、雙抗體、直鏈抗體和由抗體片段形成的多特異性抗體。

222、如本文所用，術(shù)語“人抗體”是指由來源于人的內(nèi)源性核酸(例如，重排的人免疫球蛋白重鏈或輕鏈基因座)編碼的抗體。在一些實(shí)施方案中，人抗體從人中收集或在人細(xì)胞培養(yǎng)物(例如，人雜交瘤細(xì)胞)中產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，人抗體在非人細(xì)胞(例如，小鼠或倉鼠細(xì)胞系)中產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，人抗體在細(xì)菌或酵母細(xì)胞中產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，人抗體在含有未經(jīng)重排或重排的人免疫球蛋白基因座(例如，重鏈或輕鏈人免疫球蛋白基因座)的轉(zhuǎn)基因非人動(dòng)物(例如，牛)中產(chǎn)生。

223、如本文所用，術(shù)語“嵌合抗體”指含有存在于至少兩個(gè)不同物種中的序列的抗體(例如，來自兩個(gè)不同哺乳動(dòng)物物種的抗體，諸如人和小鼠抗體)。嵌合抗體的非限制性示例是含有非人(例如，小鼠)抗體的可變結(jié)構(gòu)域序列(例如，輕鏈和/或重鏈可變結(jié)構(gòu)域序列的全部或部分)和人抗體的恒定結(jié)構(gòu)域的抗體。嵌合抗體的其他示例在本文中描述并且是本領(lǐng)域已知的。

224、如本文所用，術(shù)語“人源化抗體”是指非人抗體，其含有最少的來源于非人(例如，小鼠)免疫球蛋白的序列，并含有來源于人免疫球蛋白的序列。在非限制性示例中，人源化抗體是人抗體(受體抗體)，其中該受體抗體的高變區(qū)(例如，cdr)殘基被具有期望的特異性、親和力和能力的來自非人抗體(例如，供體抗體)，例如小鼠、大鼠或兔抗體的高變區(qū)(例如，cdr)殘基替換。在一些實(shí)施方案中，人免疫球蛋白的fv框架殘基被相應(yīng)的非人(例如，小鼠)免疫球蛋白殘基替換。在一些實(shí)施方案中，人源化抗體可含有在受體抗體或供體抗體中未發(fā)現(xiàn)的殘基?？蛇M(jìn)行這些修飾以進(jìn)一步改進(jìn)抗體性能。在一些實(shí)施方案中，人源化抗體包含基本上全部的至少一個(gè)、通常兩個(gè)可變結(jié)構(gòu)域，其中全部或基本上全部的高變環(huán)(cdr)對(duì)應(yīng)于非人(例如，小鼠)免疫球蛋白的高變環(huán)，并且全部或基本上全部的框架區(qū)是人免疫球蛋白的框架區(qū)。人源化抗體還可包含免疫球蛋白恒定區(qū)(fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定區(qū)的至少一部分。人源化抗體可使用本領(lǐng)域已知的分子生物學(xué)方法來產(chǎn)生。本文描述了用于產(chǎn)生人源化抗體的方法的非限制性示例。

225、如本文所用，術(shù)語“抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體”是(i)包括至少一個(gè)抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的單一多肽或(ii)一起形成至少一個(gè)或多個(gè)不同抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的兩個(gè)或更多個(gè)多肽(例如，相同或不同的多肽)的復(fù)合物。本文描述了抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體的非限制性示例和方面。抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體的其他示例和方面是本領(lǐng)域已知的。在一些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合蛋白構(gòu)建體具有1、2、3、4、5、6、7、8或多于8個(gè)抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

226、如本文所用，術(shù)語“抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域”是指能夠特異性結(jié)合一個(gè)或多個(gè)不同抗原的一個(gè)或多個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域(例如，由來自單個(gè)多肽的氨基酸形成或由來自兩個(gè)或更多個(gè)多肽(例如，相同或不同的多肽)的氨基酸形成)。在一些實(shí)施例中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以與天然存在的抗體的特異性和親和力相似的特異性和親和力結(jié)合抗原或表位。在一些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以是抗體或其片段。抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的一個(gè)示例是由vh-vl二聚體形成的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域是vhh。本文描述了抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的非限制性示例。抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的其他示例是本領(lǐng)域已知的。在一些實(shí)施例中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以結(jié)合單一抗原。

227、如本文所用，術(shù)語“雙特異性抗體”是指結(jié)合兩個(gè)不同表位的抗體。表位可以在同一抗原上或在不同抗原上。

228、如本文所用，術(shù)語“多特異性抗體”是指結(jié)合兩個(gè)或更多個(gè)不同表位的抗體。表位可以在同一抗原上或在不同抗原上。

229、如本文所用，“vhh”指重鏈抗體的可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，vhh是人源化vhh。

230、如本文所用，術(shù)語“共同輕鏈”是指可與兩個(gè)或更多個(gè)不同的重鏈相互作用，形成不同的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的輕鏈，其中這些不同的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域可特異性結(jié)合不同的抗原或表位。類似地，術(shù)語“共同輕鏈可變區(qū)”是指可與兩個(gè)或更多個(gè)不同的重鏈可變區(qū)相互作用，形成不同的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的輕鏈可變區(qū)，其中這些不同的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域可特異性結(jié)合不同的抗原或表位。在一些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合構(gòu)建體可具有共同輕鏈。在一些實(shí)施方案中，抗原結(jié)合構(gòu)建體可具有共同輕鏈可變區(qū)。

231、如本文所用，當(dāng)提及抗體時(shí)，短語“特異性結(jié)合”是指相比于其他分子，抗體優(yōu)選地與其靶分子(例如，her2)相互作用，因?yàn)橄嗷プ饔萌Q于靶分子上特定結(jié)構(gòu)(即，抗原決定簇或表位)的存在；換句話說，試劑識(shí)別并結(jié)合包括特定結(jié)構(gòu)的分子，而非通常情況下的所有分子。特異性結(jié)合靶分子的抗體可被稱為靶特異性抗體。例如，特異性結(jié)合her2分子的抗體可被稱為her2特異性抗體或抗her2抗體。

232、除非另有說明，否則本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同的含義。本文描述了用于本發(fā)明的方法和材料；也可使用本領(lǐng)域已知的其他合適的方法和材料。材料、方法和實(shí)施例僅是說明性的，并不旨在進(jìn)行限制。本文提及的所有出版物、專利申請(qǐng)、專利、序列、數(shù)據(jù)庫條目和其他參考文獻(xiàn)全文均以引用方式并入本文。在有沖突的情況下，以本說明書(包括定義)為準(zhǔn)。

233、從下文的具體實(shí)施方式和附圖以及權(quán)利要求中可以清楚地了解本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)。