本發(fā)明涉及生物，具體涉及一株短發(fā)酵劑乳桿菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、腦-腸軸是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central?nervous?system,?cns)，神經(jīng)內(nèi)分泌(neuroendocrine）和神經(jīng)免疫(neuroimmune）系統(tǒng)，自主神經(jīng)系統(tǒng)?(autonomic?nervoussystem,?ans)的交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)，腸道神經(jīng)系統(tǒng)?（entericnervous?system,?ens)，以及腸道微生物群（gut?microbiota）組成的復(fù)雜反射網(wǎng)絡(luò)。通過雙向調(diào)節(jié)的聯(lián)系網(wǎng)絡(luò)，腦部的信號可以影響腸道動力、感知、及分泌，而腸道菌群同樣可以影響腦功能。己有研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者的腸道微生物組成發(fā)生改變以及腸道微生物群與生活質(zhì)量和抑郁癥之間存在相互關(guān)系，無菌小鼠相對于spf小鼠出現(xiàn)了抑郁樣表型，越來越多的研究己證實腸道微生物與抑郁癥及應(yīng)激相關(guān)障得?(stress-?related?disorders?)具有密切的聯(lián)系，腸道菌為抑郁癥的治療提供了新靶點。

2、目前，最常見的抗抑郁藥物主要為作用于單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，通過提高突觸間隙具有改善情緒、提高動力改善抑郁癥狀。包括單胺氧化酶抑制劑?(maois)，去甲腎上腺素和多巴胺再攝取抑制劑?(ndri)，選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（ssris），血清素和去甲腎上腺素再攝取抑制劑?(snri)，血清素拮抗劑和再攝取抑制劑?(sari)以及三環(huán)類抗抑郁藥(tcas)?和四環(huán)類抗抑郁藥等，除了有頭痛頭暈、腸胃不適、性功能障礙、成癮性等明顯的副作用外，病人的臨床緩解情況有很大差異，約30%?患者得不到緩解，甚至是對同一患者不同時期也無法維持穩(wěn)定的藥效。

3、目前已經(jīng)有少數(shù)專利和文獻對益生菌改善抑郁做出了報道，專利cn110157647b的短乳桿菌（短發(fā)酵劑乳桿菌曾用名）具有優(yōu)良的gaba產(chǎn)生能力，從而緩解小鼠的焦慮，改善睡眠，在礦場試驗、高架十字，戊巴比妥鈉延長睡眠等實驗中表現(xiàn)突出，但對緩解抑郁的情況并不清楚。專利tw1750788b公開了一種短乳桿菌gkjoy以及組合物，同樣產(chǎn)生能gaba，通過提高腦組織中的多巴胺及/或血清素含量，促進神經(jīng)功能，并未披露在小鼠和人體的生理功能性數(shù)據(jù)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明涉及一株短發(fā)酵劑乳桿菌( levilactobacillus?brevis)ibiome003，該株菌在中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，地址為湖北省武漢市武昌區(qū)八一路武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏日期2023年3月21日，保藏號為cctcc?no：m?2023387。本發(fā)明進一步提供了上述短發(fā)酵劑乳桿菌的按任意比例混合的混合物。

2、本發(fā)明還涉及一種藥物，包括前述的短發(fā)酵劑乳桿菌和藥學(xué)上可接受的賦型劑、載體、輔料、媒介物。

3、賦型劑、載體、輔料、媒介物的實例包括但不限于抗粘劑、粘合劑、包衣、壓縮助劑、崩解劑、染料、滑潤劑、乳化劑、填充劑(稀釋劑)、成膜劑或包衣、調(diào)味劑、芳香劑、助流劑(流動增強劑)、潤滑劑、吸附劑、懸浮或分散劑或甜味劑。例示性賦型劑、載體、輔料、媒介物包括但不限于：丁基化羥基甲苯(bht)、碳酸鈣、磷酸鈣(一氫)、硬脂酸鈣、交聯(lián)羧甲纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、檸檬酸、交聯(lián)聚維酮、半胱氨酸、乙基纖維素、明膠、羥基丙基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、乳糖、硬脂酸鎂、麥芽糖醇、甘露糖醇、蛋氨酸、甲基纖維素、對羥基苯甲酸甲酯、微晶纖維素、聚乙二醇、聚維酮、預(yù)膠化淀粉、對羥基苯甲酸丙酯、視黃醇棕櫚酸酯、蟲膠、二氧化硅、羧基甲基纖維素鈉、檸檬酸鈉、乙醇酸淀粉鈉、山梨糖醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、硬脂酸、蔗糖、滑石、二氧化鈦、維生素a、維生素e、維生素c及木糖醇。

4、所述藥物可呈注射制劑的形式或口服制劑形式經(jīng)制備。所述的注射制劑依據(jù)物態(tài)分類包括液體注射劑、注射用粉劑、注射用片劑；依據(jù)注射部分分類包括皮內(nèi)注射劑、皮下注射劑、肌肉注射劑、靜脈注射劑、脊椎腔注射劑；優(yōu)選的所述注射制劑的溶劑包括注射用水或生理鹽水。

5、用于口服使用的制劑包括含有與無毒的藥學(xué)上可接受的賦形劑混合的活性成分的片劑。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑或填充劑(例如，蔗糖、山梨糖醇、糖、甘露糖醇、微晶纖維素、包括馬鈴薯淀粉的淀粉、碳酸鈣、氯化鈉、乳糖、磷酸鈣、硫酸鈣或磷酸鈉)；制粒劑及崩解劑(例如，包括微晶纖維素的纖維素衍生物、包括馬鈴薯淀粉的淀粉、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、藻酸鹽或藻酸)；粘合劑(例如，蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、阿拉伯膠、藻酸、藻酸鈉、明膠、淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、硅酸鎂鋁、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇)；以及潤滑劑、助流劑及抗粘劑(例如，硬脂酸鎂、硬脂酸鋅、硬脂酸、二氧化硅、氫化植物油或滑石)。用于口服使用的制劑也可呈可咀嚼片劑形式，或呈硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑(例如，馬鈴薯淀粉、乳糖、微晶纖維素、碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合，或呈軟明膠膠囊形式，其中活性成分與水或油介質(zhì)(例如，花生油、液體石蠟或橄欖油)混合。粉劑、顆粒劑及丸劑可以使用上文在片劑或膠囊下提到的成分以常規(guī)方式使用例如混合器、流化床設(shè)備或噴霧干燥設(shè)備來制備。

6、用于口服制劑的其他藥學(xué)上可接受的賦形劑包括但不限于著色劑、調(diào)味劑、增塑劑、保濕劑及緩沖劑。用于口服使用的制劑也可呈可咀嚼片劑形式，或呈硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑(例如，馬鈴薯淀粉、乳糖、微晶纖維素、碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合，或呈軟明膠膠囊形式，其中活性成分與水或油介質(zhì)(例如，花生油、液體石蠟或橄欖油)混合。粉劑、顆粒劑及丸劑可以使用上文在片劑或膠囊下提到的成分以常規(guī)方式使用例如混合器、流化床設(shè)備或噴霧干燥設(shè)備來制備。

7、在一些實施方案中，施用包括經(jīng)肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)(例如，呈無菌溶液形式且在適用于靜脈內(nèi)使用的溶劑系統(tǒng)中)、皮內(nèi)、動脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、病變內(nèi)、顱內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、前列腺內(nèi)、胸膜內(nèi)、氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、玻璃體內(nèi)、陰道內(nèi)、直腸內(nèi)、經(jīng)表面、腫瘤內(nèi)、經(jīng)腹膜、皮下、結(jié)膜下、囊內(nèi)、經(jīng)粘膜、心包內(nèi)、臍內(nèi)、眼內(nèi)、經(jīng)口(例如，片劑、膠囊、囊片、囊形片或糖漿)、經(jīng)表面(例如，呈乳膏、凝膠、洗劑或軟膏形式)、經(jīng)局部、通過吸入、通過注射或通過輸注(例如，以乳膏或脂質(zhì)組合物形式連續(xù)輸注、直接地浸泡靶標細胞的局部灌注、置管、灌洗)施用本文所述的藥物。

8、本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，包括前述的短發(fā)酵劑乳桿菌和聯(lián)用藥物，所述聯(lián)用藥物為其他與短發(fā)酵劑乳桿菌起到協(xié)同作用的物質(zhì)，包括但不限于其他種菌，如：干酪乳桿菌（l.?casei）、嗜酸乳桿菌（l.?acidophilus）、植物乳桿菌（l.?plantarum）、瑞士乳桿菌（l.?helveticus）、發(fā)酵乳桿菌（l.?fermentum）、彎曲乳桿菌（l.?curvatus）、米酒乳桿菌(l.?sake)?、保加利亞乳桿菌（l.?bulgaricus）、嗜熱鏈球菌、乳鏈球菌、乳脂鏈球菌、長雙歧桿菌、短雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌等；或者其他藥物活性成分，如5-羥色胺再攝取抑制劑（ssri）、5-羥色胺和去甲腎上腺素再攝取抑制劑（snri）、三環(huán)類抗抑郁藥（tac）、單胺氧化酶抑制劑（maoi）、四環(huán)類抗抑郁藥（teca）、去甲腎上腺素和特異性5-羥色胺能抗抑郁藥（nassa）等。

9、用藥劑量

10、所述藥物/藥物組合物的用藥劑量為107~1012cfu。

11、用藥周期以能夠?qū)崿F(xiàn)效果為準，包括但不限于每日1-3次，每周3-7天服用等，還和具體制劑的作用濃度有關(guān)。

12、發(fā)酵劑、功能性菌劑

13、一種包含前述短發(fā)酵劑乳桿菌的發(fā)酵組合物或發(fā)酵劑或功能性菌劑，包括前述短發(fā)酵劑乳桿菌菌液制備得到的菌液、或進一步處理得到的粉劑、或顆粒劑；所述發(fā)酵劑中還可以進一步含有一種以上互不拮抗的微生物菌劑，選自耐酸乳桿菌、植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌中的一種以上制備得到復(fù)合菌劑。

14、有效菌劑濃度、活菌數(shù)為107~1012cfu。

15、發(fā)酵劑或功能性菌劑亦可用作功能性食品、營養(yǎng)品。

16、營養(yǎng)組合物

17、一種包含前述短發(fā)酵劑乳桿菌的營養(yǎng)組合物，包括上述短發(fā)酵劑乳桿菌以及食品、營養(yǎng)品、補充物、益生菌或共生菌。

18、所述食品，包括上述短發(fā)酵劑乳桿菌以及實現(xiàn)食品功能的輔助物質(zhì)，呈現(xiàn)的形式包括但不限于?“膳食補充劑”“發(fā)酵食品”等。

19、所述膳食補充劑包括前述短發(fā)酵劑乳桿菌菌液制備得到的菌液或進一步處理得到的粉劑，并進一步加入纖維素、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)處理得到。

20、所述發(fā)酵食品包括乳制品、豆制品或者果蔬制品等。所述的乳制品是牛奶、酸奶油或干酪等。所述的豆制品是豆奶、豆豉或豆醬等。所述的果蔬制品是黃瓜、胡蘿卜、甜菜、芹菜或圓白菜制品等。

21、所述益生菌是指活的微生物，當它以合適的量提供時，對于宿主有機體的健康會有益。

22、所述共生菌是指那些含有益生素和益生菌的混合物的食品。它們通常包含利于生長和/或代謝活性的益生組分，以及總的來說與諸如但不限于短發(fā)酵劑乳桿菌與低聚果糖或低聚半乳糖相組合的益生菌效果。

23、制藥、治療用途

24、本發(fā)明涉及的短發(fā)酵劑乳桿菌或組合物在制備用于治療、緩解、預(yù)防、抑郁癥和/或焦慮的藥物或發(fā)酵菌劑中的用途。所述抑郁癥的表現(xiàn)包括但不限于：a）放棄逃脫的希望；b）行為絕望；c）無法逃逸惡環(huán)境；d）愉悅感缺失；e）對獎勵刺激缺乏興趣；f）長期的情緒低落，感到悲傷、空虛、無望；g）思維遲緩、反應(yīng)遲鈍、記憶力和注意力減退；h）自我評價降低，產(chǎn)生無用感、無望感和無價值感；i）感覺自己有罪，感覺自己有??；j）出現(xiàn)幻覺、幻聽、幻視；k）對幾乎所有活動都沒什么興趣，或覺得不好玩；l）意識活動減退，表現(xiàn)為行為緩慢，生活被動、疏懶，不想做事，不愿和周圍人接觸交往，常獨坐一旁，或整日臥床，閉門獨居、疏遠親友、回避社交；m）出現(xiàn)惡心、嘔吐、心慌、胸悶、出汗等癥狀；n）在未節(jié)食的情況下體重明顯減輕或增加，食欲一直在減退或增加；o）失眠或睡眠過多；p）經(jīng)常坐立不安，經(jīng)常感到疲勞或精力，包括物理誘發(fā)的環(huán)境因素導(dǎo)致的、化學(xué)物質(zhì)因素導(dǎo)致的、特殊食物導(dǎo)致的等。具體地，因慢性束縛應(yīng)激（cums）導(dǎo)致的，或慢性不可預(yù)見性動物應(yīng)激模型（cums）導(dǎo)致的，或習(xí)得性無助（lh）模型導(dǎo)致的，或社會挫?。╯d）模型導(dǎo)致的，或氨基酸食物（aad）導(dǎo)致的，或皮質(zhì)酮（cort）所導(dǎo)致的，或遺傳（家族病史或基因關(guān)聯(lián)，患者的一級親屬（父母兒女親兄弟姐妹）罹患抑郁癥的風險大約是一般人的2-10倍，遺傳度是31%-42%）、醫(yī)學(xué)（患有其他生理疾病、創(chuàng)傷或是服用某些藥物，例如：帕金森綜合征、癲癇、消化系統(tǒng)疾病、甲狀腺功能減退等疾病都可能會導(dǎo)致抑郁癥）、心理（包括患者如何看待他人和自己，如何與外界建立聯(lián)系；幾種可能誘發(fā)抑郁癥的心理特質(zhì)包括：抗壓能力弱、無助感、憤怒、絕望感、自信心弱等）、環(huán)境（指外界可能導(dǎo)致抑郁癥的事件或現(xiàn)象，其中比較常見的幾種社會因素包括：家庭問題，比如夫妻矛盾；生活壓力，比如失業(yè)；創(chuàng)傷性事件，比如交通事故、親人去世；童年時期的心理創(chuàng)傷，比如被忽視、虐待、父母早逝等；此外文化背景因素在一定程度上也會導(dǎo)致抑郁癥）因素導(dǎo)致的，但并不限于這些原因所導(dǎo)致。

25、該株短發(fā)酵劑乳桿菌有望在其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如：抑郁癥、焦慮癥、孤獨癥、精神分裂癥、強迫癥、恐怖癥、雙向情感障礙、人格障礙比、躁狂癥、妄想癥、疑病癥、神經(jīng)衰弱、精神發(fā)育遲滯、癡呆癥、失眠癥、心理生理精神障礙、情感性精神障礙、偏執(zhí)性精神障礙、酒依賴精神障礙、物質(zhì)依賴精神障礙、反應(yīng)性精神障礙（急性應(yīng)激反應(yīng)、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙、適應(yīng)障礙、性生理障礙（性變態(tài)、易性癖、戀童癖等）、人格障礙反社會型人格障礙、沖動型人格障礙、認知障礙、阿爾茲海默癥、癲癇、帕金森病等中具有同樣的預(yù)防或緩解作用。

26、有益效果

27、本發(fā)明公開了減緩小鼠抑郁樣癥狀的短發(fā)酵劑乳桿菌的制備方法及應(yīng)用。該株短發(fā)酵劑乳桿菌從健康人腸道分離獲得，來源安全可控，易于在體外培養(yǎng)，在腸道定植效率較高，并在不同的抑郁模型中均能顯著改善抑郁樣行為，可用于制備具有抗抑郁功能的食品、保健品和藥品，為臨床干預(yù)和控制抑郁癥等相關(guān)的精神類疾病提供新的思路，具有良好和廣泛的應(yīng)用前景。同時短發(fā)酵劑乳桿菌廣泛存在發(fā)酵食品和人體腸道中，本發(fā)明也證明該菌株對體重、內(nèi)臟器官、肝臟和腸道組織均沒有副作用，具備較高的安全性；在ph3.0的模擬胃液和0.3%膽鹽的模擬腸液中也均具有較好的耐受性，說明其具有良好的耐酸耐膽鹽能力，更有利于成藥后的藥效發(fā)揮。

28、生物保藏說明

29、短發(fā)酵劑乳桿菌( levilactobacillus?brevis)?ibiome003，保藏日期2023年3月21日，保藏地點為中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址為湖北省武漢市武昌區(qū)八一路武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號為cctcc?no：m?2023387。