本技術(shù)涉及用于免疫療法的多特異性抗體的，更具體地涉及制備和使用針對免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的表面分子具有多種結(jié)合活性的制導(dǎo)和導(dǎo)航控制(gnc)抗體。

背景技術(shù)：

1、癌癥通過獲得突變而發(fā)展，這些突變使癌細(xì)胞能夠在逃避免疫監(jiān)視和應(yīng)答的同時(shí)轉(zhuǎn)化、增殖和轉(zhuǎn)移。用于治療癌癥的抗體療法具有多種不同的機(jī)制。例如，靶向腫瘤細(xì)胞上過度表達(dá)的生長受體(egfr、her2等)的單克隆抗體可用于阻斷腫瘤細(xì)胞增殖。使用抗體阻斷抑制性t細(xì)胞檢查點(diǎn)信號(抗pdl1、抗pd1、抗ctla4)是一種防止腫瘤細(xì)胞減弱免疫應(yīng)答的策略，否則免疫應(yīng)答將設(shè)法控制其生長。另一種治療策略是抑制血管生成(例如，抗vegf)，其中氧氣和營養(yǎng)物的減少會(huì)減緩腫瘤細(xì)胞的生長。單克隆抗體和抗體－藥物綴合物(adc)最初可有效控制腫瘤。然而，對抗體療法的癌癥抗性經(jīng)常通過逃避機(jī)制發(fā)生，如胞外結(jié)構(gòu)域脫落、受體下調(diào)和受體突變(miller等人，clin?cancer?res.(臨床癌癥研究)2017；reslan等人，mabs.(單克隆抗體)2009；loganzo等人，mol?cancer?ther.(分子癌癥治療)2016)。例如，對抗her2?mab曲妥珠單抗的抗性可通過her2的胞外結(jié)構(gòu)域脫落或通過her2上的曲妥珠單抗表位的封閉而發(fā)生(fiszman和jasnis，international?journal?of?breast?cancer(國際乳腺癌雜志)，2011)。

2、組合多種治療機(jī)制(包括化學(xué)療法、放射療法和抗體療法)的組合療法已成為主流治療策略。在本文中，多特異性抗體將不同的抗體療法和機(jī)制組合成單一藥劑(boumahdi和de?sauvage.nat?rev?drug?discov.(自然藥物發(fā)現(xiàn))2020)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、以下概述僅是說明性的，并不旨在以任何方式進(jìn)行限制。除了上述說明性方面、實(shí)施例和特征之外，通過參考附圖和以下詳細(xì)描述，其他方面、實(shí)施例和特征將變得顯而易見。

2、一方面，本技術(shù)提供了可同時(shí)結(jié)合效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞的制導(dǎo)和導(dǎo)航控制(gnc)蛋白。gnc蛋白可以是單體或單體的二聚體。gnc蛋白可以是抗體或抗體樣蛋白。gnc蛋白可具有至少5個(gè)或至少6個(gè)結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

3、在一個(gè)實(shí)施方案中，本技術(shù)提供了具有n-末端和c-末端的多特異性抗體樣蛋白，其從n-末端到c-末端依次包含n-末端的第一結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d1)、包含輕鏈部分的第二結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d2)、fc區(qū)、第三結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d3)和c-末端的第四結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d4)。輕鏈部分包括共價(jià)連接到c-末端的第五結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d5)、共價(jià)連接到n-末端的第六結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d6)、或兩者。d1、d2、d3、d4、d5和d6各自針對腫瘤抗原、免疫信號抗原或其組合具有結(jié)合特異性。

4、腫瘤抗原可以是組織抗原、新抗原、腫瘤特異性抗原(tsa)、腫瘤相關(guān)抗原(taa)或其組合。

5、d2可以包括ch1。在一個(gè)實(shí)施方案中，d2中的輕鏈部分可以包括cl。在一個(gè)實(shí)施方案中，輕鏈部分可以包括cκ/cλ。

6、d2可以包括二聚體。

7、在一個(gè)實(shí)施方案中，d2可以包括fab區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，fab區(qū)可在vl和vh之間具有二硫鍵。在一個(gè)實(shí)施方案中，d2可以包括vl和vh。

8、在一個(gè)實(shí)施方案中，d2可以包括受體。在一個(gè)實(shí)施方案中，受體可以為nkg2d。在一個(gè)實(shí)施方案中，d2可以包括連接到ch1和cl的nkg2d。在一個(gè)實(shí)施方案中，d2可具有與seq?idno.155-116具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

9、d2可以通過鉸鏈與fc區(qū)連接。

10、fc區(qū)可包括無效突變，其可具有減少或消除效應(yīng)子功能的作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，fc區(qū)可以是野生型fc。在一個(gè)實(shí)施方案中，fc區(qū)可包括無效fc的lalaka突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，無效fc的lalaka突變可包括l234a/l235a/k322a(eu編號)突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，fc區(qū)可包含g237a(eu編號)突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，fc區(qū)可包含n297a(eu編號)突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，fc區(qū)可以包括糖基化的fc。在一個(gè)實(shí)施方案中，fc區(qū)可以是非糖基化fc以降低效應(yīng)子功能。

11、在一個(gè)實(shí)施方案中，本技術(shù)可提供具有n-末端和c-末端的多特異性抗體樣蛋白，其從n-末端到c-末端的依次包含n-末端的第一結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d1)、包含連接到cl和ch1的二聚體的第二結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d2)、包含ch2和ch3的fc區(qū)(其中ch2通過鉸鏈連接到ch1)、第三結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d3)和c-末端的第四結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d4)。輕鏈部分可具有共價(jià)連接到c-末端的第五結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d5)、共價(jià)連接到n-末端的第六結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d6)、或兩者。d1、d2、d3、d4、d5和d6各自針對腫瘤抗原、免疫信號抗原或其組合可具有結(jié)合特異性。

12、d2中的二聚體可以包括分別與cl和ch連接的vl和vh對，在這種情況下，d2結(jié)構(gòu)域可以是fab區(qū)，gnc蛋白可以是多特異性抗體單體或多特異性抗體。

13、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可以是五特異性或六特異性的。

14、在一個(gè)實(shí)施方案中，d2中的輕鏈部分可以具有共價(jià)連接到c-末端的第五結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d5)，并且多特異性抗體樣蛋白是五特異性的。在一個(gè)實(shí)施方案中，輕鏈部分可以具有共價(jià)連接到n-末端的第六結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d6)，并且多特異性抗體樣蛋白是五特異性的。在一個(gè)實(shí)施方案中，輕鏈部分可以具有共價(jià)連接到c-末端的第五結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d5)和同時(shí)共價(jià)連接到n-末端的第六結(jié)合結(jié)構(gòu)域(d6)，這使得多特異性抗體樣蛋白成為六特異性的。

15、d1、d2、d3、d4、d5和d6可以獨(dú)立地為scfv結(jié)構(gòu)域、受體或配體。

16、scfv結(jié)構(gòu)域可以具有從n-末端到c-末端的vlvh或vhvl構(gòu)型。在一個(gè)實(shí)施方案中，scfv結(jié)構(gòu)域可包含r19s(kabat)突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，scfv結(jié)構(gòu)域可以包括vl和vh之間的二硫鍵。在一個(gè)實(shí)施方案中，二硫鍵可以在scfv結(jié)構(gòu)域的vl100和vh44(kabat)之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，scfv結(jié)構(gòu)域可具有與seq?id?no.72-112具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

17、在一個(gè)實(shí)施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6均可以為scfv結(jié)構(gòu)域。

18、在一個(gè)實(shí)施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6各自可以獨(dú)立地為受體或配體。在一個(gè)實(shí)施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6中的至少一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或五個(gè)可以為受體或配體。在一個(gè)實(shí)施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6均可以為受體或配體。在一個(gè)實(shí)施方案中，d4、d5或d6可以為受體或配體。在一個(gè)實(shí)施方案中，受體或配體可具有與seq?id?no.113-116具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

19、在一個(gè)實(shí)施方案中，d2針對cd3或腫瘤相關(guān)抗原(taa)具有結(jié)合特異性。

20、在一個(gè)實(shí)施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6獨(dú)立地針對選自t細(xì)胞上的受體、免疫檢查點(diǎn)受體、共刺激受體、淋巴細(xì)胞或骨髓細(xì)胞的受體、腫瘤相關(guān)抗原(taa)、組織抗原、新抗原、腫瘤特異性抗原(tsa)、糖蛋白或其組合的抗原具有結(jié)合特異性。

21、在一個(gè)實(shí)施方案中，t細(xì)胞上受體的結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以與腫瘤相關(guān)抗原(taa)的結(jié)合結(jié)構(gòu)域相鄰。在一個(gè)實(shí)施方案中，t細(xì)胞上受體的結(jié)合結(jié)構(gòu)域與淋巴細(xì)胞或骨髓細(xì)胞的受體的結(jié)合結(jié)構(gòu)域相鄰。

22、在一個(gè)實(shí)施方案中，t細(xì)胞上的受體可以為cd3、t細(xì)胞受體或其復(fù)合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，免疫檢查點(diǎn)受體可以為pd-l1、pd-1、tigit、tim-3、lag-3、ctla4、btla、vista、pdl2、cd160、lox-1、siglec-15、cd47、sirpα或其組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，共刺激受體可以為4-1bb、cd28、ox40、gitr、cd40、icos、cd27、cd30、cd226或其組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，腫瘤相關(guān)抗原(taa)可以為egfr、her2、her3、her4、egrfviii、cd19、claudin?18.2、bcma、cd20、cd33、cd123、cd22、cd30、ror1、cea、cmet、lmp1、lmp2a、間皮素、psma、epcam、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、gpa33、gd2、taci、trop2、nkg2d配體、pd-l1或其組合。

23、在一個(gè)實(shí)施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6各自獨(dú)立地針對選自egfr、her2、her3、egfrviii、ror1、cd3、cd28、cea、lmp1、lmp2a、間皮素、psma、epcam、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、gpa33、gd2、trop2、nkg2d配體、bcma、cd19、cd20、cd33、cd123、cd22、cd30、pd-l1、pd1、ox40、4-1bb、gitr、tigit、tim-3、lag-3、ctla4、cd40、vista、icos、btla、light、hvem、csf1r、cd73、以及cd39、cldn18.2、csf1r的抗原可具有結(jié)合特異性，并且其中fc區(qū)包含人igg?fc區(qū)。

24、在一個(gè)實(shí)施方案中，d2和d5各自獨(dú)立地針對腫瘤相關(guān)抗原、新抗原或腫瘤特異性抗原(tsa)具有結(jié)合特異性。

25、在一個(gè)實(shí)施方案中，d1針對cd3、cd20、egfr或其衍生物具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，d2針對egfr、cd3、her2、msln、nkg2d配體或其衍生物具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，d4可包括4-1bbl三聚體或針對4-1bb或其衍生物具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，d5針對her3、cd19、nkg2d配體或其衍生物具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，d6針對cd19具有結(jié)合特異性。

26、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2針對egfr具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d5針對her3具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.1-8具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

27、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd20具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.9-12具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

28、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd20具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d5針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.13-16具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

29、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2針對msln具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d5針對nkg2d配體具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.17-20具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

30、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2針對her2具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d5針對nkg2d配體具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.21-24具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

31、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對egfr具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.25-28具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

32、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對egfr具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4包含4-1bb配體三聚體，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.29-32具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

33、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對egfr具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.33-36具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

34、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對egfr具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4包含4-1bb配體三聚體，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.37-40具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

35、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2針對egfr具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.41-44具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

36、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對egfr具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.45-48具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

37、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對egfr具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4包含4-1bb配體三聚體，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.49-52具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

38、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2包含nkg2d，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d6針對egfr具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?idno.117-120具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

39、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2包含nkg2d，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?idno.123-126具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

40、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是五特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2包含nkg2d，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4包含4-1bb配體三聚體，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?idno.127-130具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

41、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是六特異性的，并且其中d1針對egfr具有結(jié)合特異性，d2針對cd3具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，d5針對her3具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.53-60具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

42、在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白是六特異性的，并且其中d1針對cd3具有結(jié)合特異性，d2針對egfr具有結(jié)合特異性，d3針對pd-l1具有結(jié)合特異性，d4針對4-1bb具有結(jié)合特異性，d5針對her3具有結(jié)合特異性，以及d6針對cd19具有結(jié)合特異性。在一個(gè)實(shí)施方案中，多特異性抗體樣蛋白可具有與seq?id?no.61-68具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。

43、在一個(gè)實(shí)施方案中，d1、d3、d4、d5或d6可以包含(gxsy)n接頭。n可以為1到10的整數(shù)。x可以為1到10的整數(shù)。y可以為1到10的整數(shù)。

44、在一個(gè)實(shí)施方案中，本技術(shù)可提供包括如其所述的多特異性抗體樣蛋白的制導(dǎo)和導(dǎo)航控制(gnc)蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，這種gnc蛋白可以是本文所述的多特異性抗體樣蛋白的二聚體。

45、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了編碼本文公開的多特異性抗體樣蛋白或其片段或衍生物的氨基酸序列的分離的核酸序列。

46、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了包含本文所述的分離的核酸序列的表達(dá)載體。

47、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了包含如其公開的分離的核酸序列的宿主細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中，宿主細(xì)胞可以是原核細(xì)胞或真核細(xì)胞。

48、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了產(chǎn)生本文公開的gnc蛋白的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，產(chǎn)生本文公開的多特異性抗體或單體的方法可包括以下步驟：培養(yǎng)包含分離的核酸序列的宿主細(xì)胞，使得編碼多特異性抗體或單體的dna序列被表達(dá)，以及純化所述多特異性抗體，其中分離的核酸序列編碼本文公開的多特異性抗體樣蛋白的氨基酸。

49、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了免疫綴合物，其包含通過接頭與gnc蛋白(例如本文公開的多特異性抗體樣蛋白或多特異性抗體)連接的細(xì)胞毒性劑或顯像劑。接頭可以包括共價(jià)鍵，例如酯鍵、醚鍵、酰胺鍵、二硫鍵、酰亞胺鍵、砜鍵、磷酸酯鍵、磷酯鍵、肽鍵、疏水性聚(乙二醇)接頭或其組合。

50、在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒性劑或顯像劑可以是化學(xué)治療劑、生長抑制劑、來自卡奇霉素(calicheamicin)類的細(xì)胞毒性劑、抗有絲分裂劑、毒素、放射性同位素、毒素、治療劑或其組合。

51、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供用于治療、預(yù)防或控制病癥如癌癥、自身免疫疾病或感染性疾病的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合物可以包括藥學(xué)上可接受的載體和gnc蛋白如多特異性抗體或多特異性抗體樣蛋白、其免疫綴合物或其片段。

52、在一個(gè)實(shí)施方案中，藥物組合物還可包括選自放射性同位素、放射性核素、毒素、化療劑或其組合的治療劑。

53、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了用于治療、預(yù)防或控制病癥如癌癥、自身免疫性疾病或感染性疾病的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法包括施用藥物組合物的步驟，該藥物組合物包含本文公開的純化的多特異性抗體、多特異性抗體樣蛋白或其片段。

54、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了治療患有癌癥、自身免疫性疾病或感染的人類受試者的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法包括向受試者施用有效量的gnc蛋白如本文公開的純化的多特異性抗體或多特異性抗體樣蛋白或其片段的步驟。

55、在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法還可包括共施用有效量的治療劑的步驟，其中治療劑包括抗體、化療劑、酶、抗雌激素劑、受體酪氨酸激酶抑制劑、激酶抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、檢查點(diǎn)抑制劑、dna、rna或蛋白質(zhì)合成抑制劑、ras抑制劑、pd1、pd-l1、ctla4、4-1bb、ox40、gitr、icos、light、tim3、lag3、tigit、cd40、cd27、hvem、btla、vista、b7h4、csf1r、nkg2d、cd73的抑制劑或其組合。

56、在一個(gè)方面，本技術(shù)提供了包含有效濃度的gnc蛋白如多特異性抗體或多特異性抗體樣蛋白或其片段的溶液。在一個(gè)實(shí)施方案中，該溶液可以是人受試者的血漿。