本發(fā)明屬于糖化學(xué)與藥物，具體涉及一種脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物及其制備與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、癌癥是全世界最嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題之一。根據(jù)美國癌癥協(xié)會(huì)的報(bào)告(ca?cancerj?clin,2015,65(2):87-108)，癌癥已經(jīng)對發(fā)達(dá)國家和發(fā)展中國家的構(gòu)成了一定的威脅。在過去的幾十年中，傳統(tǒng)的癌癥治療方法(包括化學(xué)療法，放射療法和外科手術(shù))已經(jīng)取得了重大進(jìn)展。但是，癌癥仍然面臨著非常難以治愈或預(yù)防的問題。因此，必須開發(fā)對抗癌癥的新方法。通過在抗傳染病疫苗上取得的巨大成功，癌癥疫苗和免疫療法已成為預(yù)防和治療癌癥的、具有吸引力的替代方法(acs?chemical?biology,2016,11(4):850-863)。

2、目前，腫瘤疫苗主要有蛋白疫苗、核酸疫苗和糖疫苗，其中糖蛋白疫苗最為突出，已成為國內(nèi)外研究抗腫瘤疫苗的趨勢，其原因是腫瘤相關(guān)糖抗原(tumor-associatedcarbohydrate?antigens,tacas)，通常在腫瘤細(xì)胞表面有異常過量的表達(dá)，并且在腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面起關(guān)鍵作用。而且糖腫瘤疫苗具有特異性高、副作用小、療效較好等優(yōu)點(diǎn)，是治療性抗腫瘤疫苗的理想靶點(diǎn)(nature?reviews?clinical?oncology,2014,11(9):509-524)。

3、與蛋白抗原不同的是，tacas屬于非t細(xì)胞依賴性抗原，無法引起免疫原性以及誘導(dǎo)t細(xì)胞依賴性免疫應(yīng)答；僅tacas的存在，只能活化b細(xì)胞，產(chǎn)生一種低親和力igm抗體，不能產(chǎn)生高親和力的igg抗體。為了使糖抗原能夠在體內(nèi)產(chǎn)生t細(xì)胞免疫應(yīng)答，目前有以下策略：1、將taca與適當(dāng)?shù)妮d體共價(jià)偶聯(lián)以提高免疫原性，包括簇狀或多價(jià)結(jié)合疫苗；2、將taca與t細(xì)胞肽表位或內(nèi)置佐劑偶聯(lián)形成多組分糖綴合物疫苗；3、基于化學(xué)修飾的taca與疫苗的代謝工程結(jié)合開發(fā)疫苗(acs?chemical?biology,2016,11(4):850-863)。

4、thomsen-friedenreich抗原(tf-ag)是一種糖類全癌抗原，在約80％的人類癌癥中表達(dá)，包括乳腺癌，肺癌，結(jié)腸癌，膀胱癌，卵巢癌，前列腺癌和胃癌(science,1984,224(4654):1198-1206)(human?pathology,1996,27(12):1341-1347)，但在正常組織中是隱性的。tf-ag還存在于白血病和淋巴瘤細(xì)胞上(int?j?cancer,2008,123(1):89-99)。tf-ag在腫瘤組織上表達(dá)是通過在腫瘤細(xì)胞中糖基化的變化，增加核心糖結(jié)構(gòu)的表達(dá)，從而沒有進(jìn)一步的糖基化(breast?cancer?research,2010,12(3))，(glycoconjugate?journal,2007,24(8):411-420)。這種抗原在腫瘤中的存在使其成為癌癥免疫療法有希望的靶標(biāo)。此外，tf-ag在轉(zhuǎn)移中起著關(guān)鍵作用，腫瘤細(xì)胞表面tf-ag的結(jié)合導(dǎo)致galectin-3(gal-3)表達(dá)的上調(diào)和在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的動(dòng)員。tf-ag和gal-3的結(jié)合并且相互作用導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞在血管上的停滯，隨后是內(nèi)皮整合素α3β1的穩(wěn)定/鎖定事件，這是建立轉(zhuǎn)移所需的所有步驟(cancer?investigation,2009,12(6):671-675)。進(jìn)一步的證據(jù)支持tf-ag在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用是來自臨床研究，該研究表明發(fā)現(xiàn)具有更高轉(zhuǎn)移活性的腫瘤可以過表達(dá)tf-ag。因此，我們假設(shè)抗tf抗體療法可以通過直接殺傷，抗體相關(guān)藥物偶聯(lián)物殺傷或阻斷腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散，為表達(dá)tf-ag的腫瘤患者創(chuàng)造生存優(yōu)勢。

5、類脂a(lipid?a)是一種tlr4激動(dòng)劑，它是細(xì)菌脂多糖(lps)的兩親性膜結(jié)合部分，代表主要的病原體相關(guān)分子模式，通過與共受體蛋白md-2結(jié)合并觸發(fā)兩個(gè)tlr4·md-2·lps的二聚作用來驅(qū)動(dòng)tlr4的激活(nature?reviews?microbiology,2009,8(1):8-14)。通常，tlr4·md-2復(fù)合物與六?；p磷酸化脂質(zhì)a的結(jié)合可有效激活先天免疫應(yīng)答，而未?；闹|(zhì)a變體既無活性也無活性(science,2007,316(5831):1632-1634)(cell,2007,130(5):906-917)。

6、目前將類脂a衍生物作為糖疫苗載體與糖抗原偶聯(lián)成糖疫苗成為了新的熱點(diǎn)方向，現(xiàn)有技術(shù)中未有報(bào)道以α葡萄糖胺(1←→1)α甘露糖為骨架的類脂a衍生物與糖抗原tf綴合成二組分糖的化合物及其活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的首要目的是提供一種脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物。

2、本發(fā)明的第二目的是提供一種脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物的制備方法。

3、本發(fā)明的第三目的是提供一種抗腫瘤疫苗。

4、一種脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物或其異構(gòu)體、可藥用鹽、水合物或溶劑化合物，所述脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物具有式(ⅰ)結(jié)構(gòu)：

5、y-l-x；

6、(ⅰ)

7、其中，y選自具有以下式(ⅱ)結(jié)構(gòu)的基團(tuán)：

8、

9、r1選自-po(oh)2或-h；

10、r2選自-ch2-ch(-or5)(ch2)mch3，r5是-c(o)-(ch2)nch3，m、n是6-18的整數(shù)；

11、r3選自-ch2-ch(-or6)(ch2)pch3，r6是-c(o)-(ch2)qch3，p、q是6-18的整數(shù)；

12、r4選自-co(ch2)2chohch3或-h；

13、l選自式-(ch2)2-nhc(o)-(ch2)a-c(o)nh-(ch2)b-或具有式(ⅲ)結(jié)構(gòu)的連接臂；

14、

15、其中a、b、c是選自2-6的整數(shù)；

16、x選自具有以下式(ⅳ)結(jié)構(gòu)的基團(tuán)：

17、

18、優(yōu)選地，脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物或其異構(gòu)體、可藥用鹽、水合物或溶劑化合物，y選自具有以下式(ⅱ)結(jié)構(gòu)的基團(tuán)：

19、

20、r1選自-po(oh)2或-h；

21、r2是-ch2-ch(-or5)(ch2)10ch3，r5是-c(o)-(ch2)12ch3或-c(o)-(ch2)10ch3；

22、r3是-ch2-ch(-or6)(ch2)10ch3，r6是-c(o)-(ch2)12ch3或-c(o)-(ch2)10ch3；

23、r4選自-co(ch2)2chohch3或-h；

24、其中l(wèi)選自式(ⅲ)的連接臂:

25、

26、x選自具有以下式(ⅳ)結(jié)構(gòu)的基團(tuán)：

27、

28、更優(yōu)選地，脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物或其異構(gòu)體、可藥用鹽、水合物或溶劑，所述脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物的結(jié)構(gòu)為如下化合物1～5：

29、

30、

31、一種脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

32、s1.制備得到αglcn單糖受體，其結(jié)構(gòu)如式16所示；

33、

34、s2.制備得到αman單糖受體，其結(jié)構(gòu)如式26所示；

35、

36、s3.通過步驟s1制備所得αglcn單糖受體與步驟s2中制備所得αman單糖受體制備得到α，α-gm-lam佐劑，將α，α-gm-lam佐劑與tf糖原通過共價(jià)鍵三氮唑相連后，在氫氣條件下進(jìn)行還原反應(yīng)，即得到脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物，所述脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物具有式(ⅰ)結(jié)構(gòu)：

37、y-l-x；

38、(ⅰ)

39、其中，y選自具有以下式(ⅱ)結(jié)構(gòu)的基團(tuán)：

40、

41、r1選自-po(oh)2或-h；

42、r2選自-ch2-ch(-or5)(ch2)mch3，r5是-c(o)-(ch2)nch3，m、n是6-18的整數(shù)；

43、r3選自-ch2-ch(-or6)(ch2)pch3，r6是-c(o)-(ch2)qch3，p、q是6-18的整數(shù)；

44、r4選自-co(ch2)2chohch3或-h；

45、l選自式-(ch2)2-nhc(o)-(ch2)a-c(o)nh-(ch2)b-或具有式(ⅲ)結(jié)構(gòu)的連接臂；

46、

47、其中a、b、c是選自2-6的整數(shù)；

48、x選自具有以下式(ⅳ)結(jié)構(gòu)的基團(tuán)：

49、

50、上述的脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物或其異構(gòu)體、可藥用鹽、水合物或溶劑化合物在制備治療或預(yù)防癌癥藥物中的應(yīng)用。

51、優(yōu)選地，上述應(yīng)用中所述癌癥選自乳腺癌、前列腺癌、腸癌、黑素瘤、肝癌、肺癌、腎細(xì)胞癌、子宮癌、卵巢癌、細(xì)胞性淋巴癌、腦癌、胃癌、胰腺癌、甲腺癌或白血病。

52、一種抗腫瘤疫苗，所述抗腫瘤疫苗包括上述的脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物或其異構(gòu)體、可藥用鹽、水合物或溶劑化合物。

53、優(yōu)選地，所述抗腫瘤疫苗為注射劑型。

54、一種治療癌癥的方法，包括給患者施用治療或預(yù)防有效劑量的上述脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物或其異構(gòu)體、可藥用鹽、水合物或溶劑化合物。

55、優(yōu)選地，所述的癌癥選自乳腺癌、前列腺癌、腸癌、黑素瘤、肝癌、肺癌、腎細(xì)胞癌、子宮癌、卵巢癌、細(xì)胞性淋巴癌、腦癌、胃癌、胰腺癌、甲腺癌或白血病。

56、本發(fā)明的上述目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

57、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

58、本發(fā)明提供了一種以α葡萄糖胺(1←→1)α甘露糖為骨架的類脂a衍生物與糖抗原tf綴合成的化合物，本發(fā)明的脂質(zhì)體a衍生物綴合tf化合物制備得得抗腫瘤疫苗，經(jīng)小鼠免疫活性實(shí)驗(yàn)測定，其結(jié)果表明可以誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)產(chǎn)生有效的igg抗體滴度水平，具有良好的抗腫瘤應(yīng)用前景。