本發(fā)明涉及化妝品，具體涉及一種3-鄰-乙基抗壞血酸組合物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、在化妝品和護膚品領(lǐng)域，3-鄰-乙基抗壞血酸(結(jié)構(gòu)如式i)通常用作一種抗氧化劑和美白劑，可以幫助減少皮膚中的氧化損傷和色素沉著。當(dāng)這種成分添加到護膚品中時，護膚品需要經(jīng)過高溫的生產(chǎn)過程，例如混合、加熱、滅菌等。在這種情況下，熱穩(wěn)定性對于3-鄰-乙基抗壞血酸的有效性和保持其活性非常重要。如果3-鄰-乙基抗壞血酸在高溫條件下不穩(wěn)定，它可能會分解或失去其抗氧化性能，從而影響產(chǎn)品的功效。

2、

3、因此，在制造化妝品和護膚品時，需要選擇具有較好熱穩(wěn)定性的3-鄰-乙基抗壞血酸，以確保其在高溫條件下的穩(wěn)定性和活性。然而傳統(tǒng)純化方法純化的3-鄰-乙基抗壞血酸晶體熱穩(wěn)定性不高。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提出一種3-鄰-乙基抗壞血酸組合物及其制備方法和應(yīng)用，生物利用度高，具有較好的透皮吸收率，可作為還原劑、紫外線吸收劑和黑色素形成抑制劑，具有很高的耐熱性和抗氧化性，水解釋放出抗壞血酸，為體內(nèi)不斷的提供抗壞血酸，可促進膠原的合成，安全性好，是一種很好的化妝品原料，具有廣闊的應(yīng)用前景。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：

3、本發(fā)明提供一種3-鄰-乙基抗壞血酸組合物的制備方法，包括以下步驟：

4、s1.培養(yǎng)基的制備：將葡萄糖、甘蔗汁、抗壞血酸、氨基酸、無機鹽加入水中，滅菌，制得培養(yǎng)基；

5、s2.菌種的活化：將嗜熱脂肪枯草芽孢桿菌和黑曲霉分別接種于高氏培養(yǎng)基中，活化培養(yǎng)，制得菌種種子液；

6、s3.酶促發(fā)酵：將固定化酶加入培養(yǎng)基中，接種嗜熱脂肪枯草芽孢桿菌和黑曲霉菌種種子液，酶促發(fā)酵，磁鐵分離固定化酶，產(chǎn)物過濾，濾液透析，透析液冷凍干燥，制得抗壞血酸衍生物組合物；

7、s4.疏水改性：將抗壞血酸衍生物組合物、堿加入乙醇中，加入長鏈烷基鹵代烷，加熱攪拌反應(yīng)，過濾，洗滌，干燥，制得改性抗壞血酸衍生物組合物；

8、s5.3-鄰-乙基抗壞血酸組合物的制備：將改性抗壞血酸衍生物組合物和3-鄰-乙基抗壞血酸混合均勻，制得3-鄰-乙基抗壞血酸組合物。

9、作為本發(fā)明的進一步改進，步驟s1中所述葡萄糖、甘蔗汁、抗壞血酸、氨基酸、無機鹽、水的質(zhì)量比為5-7:15-20:8-12:3-5:2-3:100，所述甘蔗汁的糖度為15-17％，所述氨基酸選自蘇氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸中的至少一種，所述無機鹽為氯化鈉、氯化鎂、氯化鋅、氯化銅、氯化鐵，質(zhì)量比為10:1-2:1.5-2:0.7-1.2:1-2。

10、作為本發(fā)明的進一步改進，步驟s2中所述活化培養(yǎng)的條件為40-45℃，100-200r/min，活化培養(yǎng)24-30h，所述菌種種子液的含菌量為108-109cfu/ml。

11、作為本發(fā)明的進一步改進，步驟s3中所述固定化酶、培養(yǎng)基的質(zhì)量比為3-5:100，所述嗜熱脂肪枯草芽孢桿菌和黑曲霉菌種種子液的接種量分別為1-2v/v％和2-3v/v％，所述酶促發(fā)酵的條件為40-45℃，100-200r/min，酶促發(fā)酵培養(yǎng)36-48h，所述固定化酶的制備方法如下：

12、t1.多孔氧化硅球的制備：將正硅酸烷基酯加入乙醇中，加入氨水和致孔劑，攪拌反應(yīng)，離心，洗滌，干燥，煅燒，制得多孔氧化硅球；

13、t2.磁性改性：將多孔氧化硅球加入水中，加入硝酸鈷和硝酸鐵，調(diào)節(jié)溶液ph值，離心，洗滌，干燥，煅燒，制得磁性氧化硅球；

14、t3.單寧酸改性：將磁性氧化硅球加入水中，加入單寧酸和催化劑，加熱攪拌反應(yīng)，離心，洗滌，干燥，制得改性磁性氧化硅球；

15、t4.復(fù)合酶的吸附：將α-葡萄糖苷酶、環(huán)麥芽糊精葡聚糖轉(zhuǎn)移酶、α-淀粉酶溶于水中，加入改性磁性氧化硅球，攪拌混合均勻，揮干溶劑，制得固定化酶。

16、優(yōu)選地，所述正硅酸烷基酯為正硅酸甲酯或正硅酸乙酯。

17、優(yōu)選的，所述致孔劑選自十六烷基三甲基氯化銨、十六烷基三甲基溴化銨、十六烷基二甲基芐基氯化銨、十六烷基二甲基芐基溴化銨中的至少一種。

18、作為本發(fā)明的進一步改進，所述正硅酸烷基酯、乙醇、氨水和致孔劑的質(zhì)量比為10-15:80-100:7-10:1-2，所述攪拌反應(yīng)的時間為10-12h，所述多孔氧化硅球、硝酸鈷和硝酸鐵的質(zhì)量比為100：4.7-4.9:1.8-1.9，所述調(diào)節(jié)溶液ph值為8-9，所述磁性氧化硅球、單寧酸和催化劑的質(zhì)量比為10:2-3:0.1-0.2，所述催化劑為ph＝8.5-9.5的tris-hcl溶液，所述加熱攪拌反應(yīng)的溫度為40-50℃，時間為1-3h，所述α-葡萄糖苷酶、環(huán)麥芽糊精葡聚糖轉(zhuǎn)移酶、α-淀粉酶、改性磁性氧化硅球的質(zhì)量比為1-2:3-5:2-4:100。

19、作為本發(fā)明的進一步改進，步驟s4中所述抗壞血酸衍生物組合物、堿、長鏈脂肪胺的質(zhì)量比為10:3-5:2-3，所述長鏈脂肪胺選自1-氯十二烷、1-氯十四烷、1-氯十六烷、1-氯十八烷、1-溴十二烷、1-溴十四烷、1-溴十六烷、1-溴十八烷中的至少一種，所述加熱攪拌反應(yīng)的溫度為40-50℃，時間為2-4h。

20、作為本發(fā)明的進一步改進，步驟s5中所述改性抗壞血酸衍生物組合物和3-鄰-乙基抗壞血酸的質(zhì)量比為3-5:8。

21、作為本發(fā)明的進一步改進，具體包括以下步驟：

22、s1.培養(yǎng)基的制備：將5-7重量份葡萄糖、15-20重量份糖度為15-17％的甘蔗汁、8-12重量份抗壞血酸、3-5重量份氨基酸、2-3重量份無機鹽加入100重量份水中，滅菌，制得培養(yǎng)基；

23、所述無機鹽為氯化鈉、氯化鎂、氯化鋅、氯化銅、氯化鐵，質(zhì)量比為10:1-2:1.5-2:0.7-1.2:1-2；

24、s2.菌種的活化：將嗜熱脂肪枯草芽孢桿菌和黑曲霉分別接種于高氏培養(yǎng)基中，40-45℃，100-200r/min，活化培養(yǎng)24-30h，制得含菌量為108-109cfu/ml的菌種種子液；

25、s3.酶促發(fā)酵：將3-5重量份固定化酶加入100重量份培養(yǎng)基中，接種嗜熱脂肪枯草芽孢桿菌和黑曲霉菌種種子液，接種量分別為1-2v/v％和2-3v/v％，40-45℃，100-200r/min，酶促發(fā)酵培養(yǎng)36-48h，磁鐵分離固定化酶，產(chǎn)物過濾，濾液透析去除無機鹽，透析液冷凍干燥，制得抗壞血酸衍生物組合物；

26、s4.疏水改性：將10重量份抗壞血酸衍生物組合物、3-5重量份堿加入乙醇中，加入2-3重量份長鏈烷基鹵代烷，加熱至40-50℃，攪拌反應(yīng)2-4h，過濾，洗滌，干燥，制得改性抗壞血酸衍生物組合物；

27、s5.3-鄰-乙基抗壞血酸組合物的制備：將3-5重量份改性抗壞血酸衍生物組合物和8重量份3-鄰-乙基抗壞血酸混合均勻，制得3-鄰-乙基抗壞血酸組合物。

28、本發(fā)明進一步保護一種上述的制備方法制得的3-鄰-乙基抗壞血酸組合物。

29、本發(fā)明進一步保護一種上述3-鄰-乙基抗壞血酸組合物在化妝品制備中的應(yīng)用。

30、本發(fā)明具有如下有益效果：

31、3-鄰-乙基抗壞血酸是一種親油水溶性維生素c衍生物，其容易穿透角質(zhì)層進入真皮層，進入皮膚后容易被生物酶分解而發(fā)揮維c的作用，從而提高其生物利用度，具有極高的穩(wěn)定性，比普通的維生素c具有更好的生物利用度和穩(wěn)定性，從而能夠發(fā)揮出更好的作用。

32、本發(fā)明抗壞血酸衍生物組合物中，以抗壞血酸和甘蔗汁為原料，通過發(fā)酵菌嗜熱脂肪枯草芽孢桿菌和黑曲霉的發(fā)酵作用下，可將麥芽糖的d-吡喃型葡萄糖基部分轉(zhuǎn)移到抗壞血酸的2-碳位置的羥基基團上脫水生成2-氧-α-d-吡喃型葡萄糖基-l-抗壞血酸，或者反應(yīng)生成5-氧-α-d-吡喃型葡萄糖基-l-抗壞血酸，明顯提高了抗氧化性和抗紫外性能，具有較強的耐酸性，耐光性和熱穩(wěn)定性，還有很好的抗菌、增白的效果。在固定化酶的酶促發(fā)酵作用下，還容易產(chǎn)生6-氧-α-d-吡喃型葡萄糖基-l-抗壞血酸、6-氧-?；?2-o-α-d-吡喃型葡萄糖基-l-抗壞血酸等，熱穩(wěn)定性明顯增強，抗氧化性也提高，制得的抗壞血酸衍生物組合物能夠抑制酪氨酸酶活性，抑制黑色素形成；還原黑色素，淡斑美白，有效去除自由基，耐光、耐熱、耐酸堿、耐空氣氧化。生物利用度高，防止日光引起的皮膚炎癥，并且能促進膠原蛋白產(chǎn)生，增加皮膚彈性。

33、固定化酶以多孔氧化硅納米球為載體，表面沉積鐵酸鈷，添加量小但具有很高的磁性，不僅能夠協(xié)同酶進行酶解催化作用，還能夠有助于磁鐵分離固定化酶，使得酶能夠重復(fù)多次使用，提高經(jīng)濟價值，單寧酸的改性提高了對酶的負(fù)載量，從而提高了酶促反應(yīng)的催化效率。

34、但是，上述制得的抗壞血酸衍生物組合物的脂溶性不強，不易透過皮膚磷脂雙分子層進入真皮層，從而發(fā)揮出皮膚調(diào)節(jié)的作用，因此，本發(fā)明通過與長鏈烷基鹵代烷發(fā)生親核取代反應(yīng)，使得衍生物連上長鏈烷基，提高了其疏水性，從而使得其能夠更好具有親油性，提高其皮膚透過率，發(fā)揮出更好的調(diào)節(jié)皮膚的效果，能夠通過透過皮膚角質(zhì)層到達基底層，抑制酪氨酸酶活性，抑制黑色素的形成，還原黑色素為無色，高效美白和祛斑，進入真皮層后直接參與膠原蛋白的合成，使膠原蛋白增加，從而使皮膚變得充盈富有彈性。

35、本發(fā)明制得的3-鄰-乙基抗壞血酸組合物生物利用度高，具有較好的透皮吸收率，可作為還原劑、紫外線吸收劑和黑色素形成抑制劑，具有很高的耐熱性和抗氧化性，水解釋放出抗壞血酸，為體內(nèi)不斷的提供抗壞血酸，可促進膠原的合成，安全性好，是一種很好的化妝品原料，具有廣闊的應(yīng)用前景。