重建的肺表面活性劑的制作方法
【專利說明】重建的肺表面活性劑
[0001] 本發(fā)明涉及用于治療或預(yù)防早產(chǎn)兒的呼吸窘迫綜合征（RDS)和其他呼吸疾病的 合成肺表面活性劑。
[0002] 特別地，本發(fā)明涉及包含天然表面活性劑蛋白SP-C的特定類似物與天然表面活 性劑蛋白SP-B的類似物的組合物以及磷脂混合物的重建表面活性劑。
[0003] 發(fā)明背景
[0004] 人的肺部由大量小的氣囊組成，這些小的氣囊稱為肺泡，其中氣體在血液和肺部 的氣隙之間交換。在健康的個(gè)體中，這種交換通過含蛋白的表面活性劑復(fù)合物的存在來介 導(dǎo)，所述含蛋白的表面活性劑復(fù)合物防止呼氣末肺部的塌陷。
[0005] 肺表面活性劑復(fù)合物主要由脂質(zhì)組成并且含有少量各種蛋白質(zhì)。缺少適當(dāng)水平的 這種復(fù)合物導(dǎo)致肺的功能障礙。這種癥狀被稱為呼吸窘迫綜合征（RDS)，并且其通常影響早 產(chǎn)兒。
[0006] 用從動(dòng)物肺部提取的改性天然表面活性劑制備物有效地治療了所述癥狀。
[0007] 商業(yè)購得的改性表面活性劑制備物例如是poractant a (Curosurf?)，源自豬肺， calfactant (Infasurf?)，從小牛肺灌洗物提取和beractant (Survanta?)，一種化學(xué)修飾 的天然牛肺提取物。
[0008] 這些表面活性劑制備物的主要組分是磷脂，如1，2-二棕櫚酰-sn-甘油-3-磷膽 堿（DPPC)、（PG)以及表面活性劑疏水性蛋白B和C(SP-B和SP-C)。
[0009] 由于來自動(dòng)物組織的表面活性劑制備物的缺陷，如生產(chǎn)和滅菌方法的復(fù)雜性以及 可能的免疫反應(yīng)的誘導(dǎo)，已經(jīng)研發(fā)了設(shè)法模仿改性的天然表面活性劑組成的合成表面活性 劑。
[0010] 然而，根據(jù)可獲得的文獻(xiàn)，沒有一篇顯示出迄今為止研發(fā)的合成表面活性劑與從 動(dòng)物提取的表面活性劑具有相同的功效。
[0011] 一種可能的解釋是迄今為止研發(fā)的可用重建表面活性劑沒有再現(xiàn)改性的天然表 面活性劑的完整蛋白質(zhì)譜，因?yàn)榍罢咧话艘环N蛋白質(zhì)（肽）組分。
[0012] 出于這些原因，現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)提出了包含天然表面活性劑蛋白SP-B和SP-C兩 種類似物的重建表面活性劑，例如，在W02008/044109、W02008/011559和W02010/139442 中。
[0013] 盡管如此，關(guān)于重建表面活性劑就肺部依從性而言可以獲得與從動(dòng)物提取的表面 活性劑相同的功效仍然持有懷疑態(tài)度，特別是就呼吸結(jié)束時(shí)肺氣體體積和肺泡開放等級(jí)而 言。
[0014] 在這一方面，本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，除了蛋白質(zhì)譜以外，磷脂組合物對(duì)于穩(wěn)定呼氣末的肺 泡也是十分重要的。
[0015] 特別地，申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)了包含W02008/044109中公開的蛋白B和C的代表性類似物 以及從poractant α提取的磷脂級(jí)分（其富含不飽和磷脂）的重建表面活性劑關(guān)于潮氣 量和肺氣體體積獲得了與poractant α那些可重疊（overlappable)的結(jié)果。
[0016] 因此，對(duì)于提供能夠幫助提高就肺部順從性而言的性能的包含磷脂混合物的重組 表面活性劑有很大優(yōu)勢(shì)。
[0017] 在W02004/105726中，已經(jīng)公開了為了降低合成表面活性劑粘度的目的而使用包 含多不飽和磷脂的脂質(zhì)混合物。
[0018] 現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了，并且是本發(fā)明的目的，天然衍生的富含不飽和磷脂的級(jí)分可以 有利地與天然SP-C蛋白的特定類似物以及天然蛋白SP-B的特定類似物組合，以提供就潮 氣量和肺氣體體積而言具有不低于改性天然表面活性劑（如，poractant α )特性的重建 表面活性劑制備物。
[0019] 發(fā)明概述
[0020] 本發(fā)明涉及一種重建表面活性劑，其包含脂質(zhì)載體，以及天然表面活性劑蛋白 SP-C的特定多肽類似物與天然表面活性劑蛋白SP-B的特定多肽類似物的組合。
[0021] 特別地，本發(fā)明涉及一種重建表面活性劑，其包含：
[0022] 磷脂混合物；
[0023] 天然表面活性劑蛋白SP-B的多肽類似物；和
[0024] 由通式：IPSSPVHLKRLKLLLLLLLLILLLILGALLQpGpLp(I)表示的天然表面活性劑蛋 白SP-C的多肽類似物，
[0025] 其中：
[0026] Ω是選自M或硫原子上氧化的M、I、L和nL的氨基酸；
[0027] p 是 0 或 1
[0028] 所述磷脂混合物由以下組成：
[0029] i)含量為50%重量的DPPC ;
[0030] ii)含量為10%重量的POPG ;和
[0031] iii)含量為40%重量的不飽和磷脂的天然衍生級(jí)分，其基本上由以下組成：
[0032] 30%至 50% P0PC，10%至 20% PLPC，4 至 10% P(:1)0PC，5 至 8% SLPC，5 至 8% D0PC，1 至 3% SAPC，5 至 15% S0PC，1 至 2% PAPC，1 至 3% PDPC，0 至 3. 5% S0PE，0 至 8% SAPE，0 至 4% SLPE，0 至 2. 5% PLPE，0 至 3. 5% POPE ;0 至 2. 0% LAPE，0 至 2. % LLPE，0 至 10% PSM ；
[0033] i)、ii)和iii)的全部含量基于磷脂混合物的總重來計(jì)算。
[0034] 本發(fā)明還提供了包含單獨(dú)的所述重建表面活性劑或結(jié)合一種或多種藥物學(xué)上可 接受載體的藥物組合物。
[0035] 本發(fā)明還提供了所述重建表面活性劑作為藥物的用途。
[0036] 在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明提供了所述重建表面活性劑用于預(yù)防和/或治療呼吸 窘迫綜合征（RDS)和其他呼吸道疾病的用途。
[0037] 此外，本發(fā)明提供了所述重建表面活性劑用于制造用于預(yù)防和/或治療呼吸窘迫 綜合征（RDS)和其他呼吸道疾病的藥物的用途。
[0038] 本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防和/或治療呼吸窘迫綜合征（RDS)和其他呼吸道疾 病的方法，所述方法包括將治療有效量的上述重建表面活性劑給藥于需要這樣的治療的病 人。
[0039] 本發(fā)明還涉及一種試劑盒，其包含：a)第一單位劑型的粉末形式的本發(fā)明的重建 表面活性劑；b)第二單位劑型的藥物學(xué)上可接受的載體；和c)用于包含所述第一和第二劑 型的容器裝置。
[0040] 附圖
[0041] 圖1顯示了作為由2%(?]\^11^(1^11)+2%5?-〇33(1^11)+50%0??〇+10% P0PG+40%肝-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的時(shí)間/壓力函數(shù)的潮氣量 (ml/kg)的結(jié)果。
[0042] 圖 2 顯示了由 2 % ox Mini-B (Leu) +2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 肝-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的肺氣體體積（ml/kg)的結(jié)果。
[0043] 圖3顯示了作為由2%(?]\^11^(1^11)+2%5?-〇33(1^11)+50%0??〇+10% P0PG+40%未純化蛋黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的時(shí)間/壓力函數(shù) 的潮氣量（ml/kg)的結(jié)果。
[0044] 圖 4 顯示了由 2 % ox Mini-B (Leu) +2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 未純化蛋黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的肺氣體體積（ml/kg)的結(jié) 果。
[0045] 圖5顯示了作為由2%(?]\^11^(1^11)+2%5?-〇33(1^11)+50%0??〇+10% P0PG+40%純蛋黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的時(shí)間/壓力函數(shù)的潮 氣量（ml/kg)的結(jié)果。
[0046] 圖 6 顯示了由 2 % ox Mini-B (Leu) +2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 純蛋黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的肺氣體體積（ml/kg)的結(jié)果。
[0047] 圖 7 顯示了作為由 2 % ox Mini-B27+2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 純蛋黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的時(shí)間/壓力函數(shù)的潮氣量（ml/ kg)的結(jié)果。
[0048] 圖 8 顯示了由 2 % ox Mini-B27+2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 純蛋 黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照的肺氣體體積（ml/kg)的結(jié)果。
[0049] 圖9顯示了由2%(?]\^11^(1^11)或（《]\^11^27+2%5?-〇33(1^11)+50% DPPC+10% P0PG+40%純蛋黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照在恒定潮氣 量下進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)中的潮氣量（ml/kg)的結(jié)果。
[0050] 圖10顯示了由2%〇叉]\^11^(1^11)或（《]\^11^27+2%5?-〇33(1^11)+50% DPPC+10% P0PG+40%純蛋黃-PC制得的重建表面活性劑vs. Curosurf?和對(duì)照在恒定潮氣 量下進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)中的肺氣體體積（ml/kg)的結(jié)果。
[0051] 定義
[0052] 在本申請(qǐng)中，術(shù)語"重建表面活性劑"意思是已經(jīng)加入了表面活性劑蛋白的多肽類 似物的脂質(zhì)載體，通過任何方式來制得，包