靶向her2陽性腫瘤的化合物和組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及用于靶向免疫療法的化合物以及含有該化合物的組合物。本發(fā)明還涉 及所述化合物在治療諸如癌癥之類的疾病中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 治療性抗體已用于臨床應(yīng)用二十多年。目前已有十五種抗腫瘤抗體藥物用于 臨床，這些藥物包括：Rituxan (1997)，Herceptin (1998)，Mylotarg (2000)，Campath (20 01), Zeval in(2002), Bexxer(2003), Avastin (2004),Erbitux (2004),Vectibix (2006); Arzerra(2009);Benlysta(2011);Yervoy(2011);Adcetris(2011) ;Perjeta(2012);和 Kadcyla(2013)。這些抗體主要靶定四種分子：EGFR、Her2、CD20和VEGF。
[0003] 總體而言，治療性抗體通過三種機制（Scott AM, Wolchok JD, Old LJ. Antibody therapy of cancer.Nat Rev Cancer. (2012), 12:278-87)殺傷腫瘤細(xì)胞：（1)抗體直接 作用，也就是阻斷或激動配體/受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)活性，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并遞送藥物或細(xì)胞毒素 劑?？贵w受體活化活性可產(chǎn)生直接殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。例如，一些抗體可與腫瘤細(xì)胞 表面的受體結(jié)合，活化受體，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡(例如，在線粒體中）?？贵w還可通過受體拮抗 活性介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞殺傷。例如，一些抗體可與細(xì)胞表面受體結(jié)合并阻斷二聚化作用、激酶 活化以及下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而抑制增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。抗體與酶的結(jié)合可導(dǎo)致中和作 用、信號阻斷以及細(xì)胞死亡。（2)免疫介導(dǎo)的細(xì)胞殺傷機制，該機制包括補體依賴性細(xì)胞 毒性（CDC)、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)、T細(xì)胞功能調(diào)節(jié)，等等。免疫介導(dǎo)的 腫瘤細(xì)胞殺傷可通過如下方式完成：誘導(dǎo)吞噬作用、活化補體、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì) 胞毒性、通過單鏈可變片段（scFv)使基因修飾的T細(xì)胞祀定腫瘤，通過樹突細(xì)胞的抗體介 導(dǎo)的抗原交叉呈遞活化T細(xì)胞、抑制T細(xì)胞抑制性受體(例如，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān) 抗原4 (CTLA4))。其中，抗體的Fc部分的特性對于CDC和ADCC介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞殺傷作 用特別重要。（3)抗體對腫瘤脈管系統(tǒng)和基質(zhì)的特異性效應(yīng)，通過捕獲血管受體拮抗劑或 配體誘導(dǎo)血管和基質(zhì)細(xì)胞消融，包括：抑制基質(zhì)細(xì)胞、將毒素遞送至基質(zhì)細(xì)胞以及將毒素 遞送至脈管系統(tǒng)（Scott AM, Wolchok JD, Old LJ. Antibody therapy of cancer.Nat Rev Cancer. 2012, 12(4):278-87)〇
[0004] 治療性單克隆抗體藥物推進(jìn)了抗癌藥物的研宄和開發(fā)。然而，仍然存在一些問題 需要進(jìn)一步研宄解決，例如，抗體的免疫原性、長期使用腫瘤靶標(biāo)的耐受性以及單純地單一 阻斷信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的長期作用。簡言之，大多數(shù)抗體難以實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞長期有效的抑制 和殺傷作用。
[0005] 1964年，"自然（Nature)"雜志發(fā)表了抗體-藥物偶聯(lián)（ADC)技術(shù)這一新觀點，該 觀點近年來得到突破性發(fā)展。ADC使抗體與高毒性藥物(毒素)通過化學(xué)連接體(連接體)共 價連接。抗體識別癌細(xì)胞表面抗原分子，內(nèi)吞作用將ADC帶入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，具體而言，連接體 水解之后釋放的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境毒素殺傷細(xì)胞。
[0006] Seattle Genetics 已研發(fā)了 Brentuximab Vedotin (商品名為 Adcetris)這種藥 物，其已被FDA批準(zhǔn)上市。其為單甲基auristatin E(MMAE)，一種合成的毒性抗癌藥物，其 與靶向淋巴瘤細(xì)胞特異性CD30分子的抗體連接，具有改進(jìn)的殺傷腫瘤細(xì)胞的效用。
[0007] 目前，已對幾十種這樣的ADC藥物開展了臨床試驗。其中，Genentech和Immunogen 聯(lián)合開發(fā)了用于治療乳腺癌的與美登素（maytansine)偶聯(lián)的曲妥珠單抗，一種名為 ado-曲安珠單抗emtansine的藥物（Kadcyla)，其也被稱為T-DM1。2013年2月，F(xiàn)DA已批 準(zhǔn)T-DMl用于人表皮生長因子受體2 (Her2)-陽性轉(zhuǎn)移性乳腺癌。美登素是一種小分子 毒素，其可與微管蛋白結(jié)合并可通過形成非還原性雙-馬來酰亞胺-丙二醇復(fù)合物防止微 管形成。曲妥珠單抗通過靶向人Her2對乳腺癌和胃癌起作用。曲妥珠單抗已被批準(zhǔn)用于 Her2-陽性癌癥。然而，曲妥珠單抗無法促進(jìn)所有的Her2-陽性細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。T-DMl使 選擇性靶向Her2受體的曲妥珠單抗與有效的細(xì)胞毒性劑美登素結(jié)合，從而殺傷腫瘤細(xì)胞。 T-DMl抗體結(jié)合Her2受體，導(dǎo)致從偶聯(lián)物中釋放的美登素產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)在化作用，從而殺傷 腫瘤細(xì)胞。T-DMl具有更好的整體療效、藥代動力學(xué)性質(zhì)以及較低的毒性。
[0008] 傳統(tǒng)的小分子化療藥物具有很強的毒性和藥代動力學(xué)優(yōu)勢，但是在治療腫瘤的 過程中傳統(tǒng)的小分子化療藥物可影響其他生理靶標(biāo)，產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。抗體-藥物偶聯(lián) 物使靶向作用和具有特定的藥代動力學(xué)的小分子藥物結(jié)合?？贵w-藥物偶聯(lián)物的結(jié)構(gòu)為具 有靶向功能的單克隆抗體與具有特定的藥理學(xué)性質(zhì)的化合物的連接。這種技術(shù)需要治療性 抗體與靶標(biāo)特異性結(jié)合，與諸如細(xì)胞毒素之類的具有治療作用或其他功能的分子偶聯(lián)。諸 如偶聯(lián)的抗體的內(nèi)吞作用、偶聯(lián)的穩(wěn)定性以及毒素的釋放和殺傷活性之類的許多因素影響 這種類型的抗體的作用。
[0009] 目前正在使用的毒素分子包括微管蛋白抑制劑Auristatin類似物單甲基 auristatin E、單甲基auristatin F和美登素。單甲基auristatin E為合成的微管聚 合物抑制劑，其可抑制微管聚集，干擾腫瘤細(xì)胞有絲分裂并且可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡（Naumovski L and Junutula JR. Glembatumumab vedotin, a conjugate of an anti-glycoprotein non-metastatic melanoma protein B mAb and monomethyl auristatin E for treatment of melanoma and breast cancer. Curr Opin Mol Ther2003;12(2):248-57. Francisco JA, Cerveny CG 等人，cAClO-vcMMAE, an anti-CD30_monomethyl auristatin E conjugate with potent and selective antitumor activity. Bloodl02 (4):1458-65)。單甲基 auristatin F為抗有絲分裂Auristatin衍生物，在C末端具有帶電荷的苯丙氨酸殘基。 與不帶電荷的MMAE相比，單甲基auristatin F最小化對細(xì)胞信號通路的破壞并且最小化 細(xì)胞毒性。大量CD30細(xì)胞測試發(fā)現(xiàn)mAb-馬來酰亞胺己?；?纈氨酸-瓜氨酸-P-氨基 芐氧基羰基-MMAF (mAb-Ll-MMAF)的毒性比單獨的MMAF的毒性強2, 200倍（Doronina SO 等人，Enhanced activity of monomethyl auristatin F through monoclonal antibody delivery: effects of I inker technology on efficacy and toxicity. Bioconjug Chem，2006; 17(1) :pll4-24)。美登素是一種抗有絲分裂劑，其充當(dāng)微管蛋白聚合的抑制劑， 干擾細(xì)胞核內(nèi)的微管的形成。美登素還抑制DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)美登素對于 DNA合成的影響最大。
[0010] 抗體-藥物偶聯(lián)物具有直接和間接抗癌作用。抗體阻斷或活化配體/受體信號轉(zhuǎn) 導(dǎo)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并且同時抗體可直接或間接地向腫瘤細(xì)胞呈遞或遞送有效載荷藥物(例 如，藥物、毒素、小干擾RNA或放射性同位素)。治療性抗體藥物偶聯(lián)物使用抗體和偶聯(lián)的藥 物的雙重特性，第一為與靶標(biāo)分子特異性結(jié)合的結(jié)合功能，第二為抗體自身的腫瘤細(xì)胞殺 傷功能，以及第三為偶聯(lián)的藥物的特定作用。目前使用的抗體-藥物偶聯(lián)藥物限于如何直 接殺傷腫瘤細(xì)胞。然而，由于在抗體、連接體分子、毒素分子、偶聯(lián)方面的嚴(yán)格的技術(shù)要求以 及能夠?qū)⒍舅貛肽[瘤微環(huán)境內(nèi)的分子有限，在實際的臨床研宄中仍然存在一些難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] -方面，本發(fā)明提供一種具有通式（Ia)的結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或 其溶劑化物：
[0012] TM-L-AM (Ia)，
[0013] 其中，TM是與Her2/Neu特異性結(jié)合的抗體或其功能片段(例如，抗-Her2的抗體)， AM為由下述通式（I)的結(jié)構(gòu)表示的活化部分：
[0014]
【主權(quán)項】
1. 一種具有下述通式（Ia)的結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物： TM-L-AM (Ia)， 其中，TM是與Her2/Neu特異性結(jié)合的抗體或其功能片段，AM為由下述通式（I)的結(jié)構(gòu) 表示的活化部分：
其中，虛線表示存在化學(xué)鍵或不存在化學(xué)鍵，~為待與連接體連接的點； X 是 S 或-NR1, 1^是-W。一 W1 一W2一W3一W4; Wtl是化學(xué)鍵，烷基，烯基，炔基，烷氧基或-烷基-S-烷基--， W1是化學(xué)鍵，一O -，或-NR 2-，其中，R2是氛，烷基或條基， W2是化學(xué)鍵，一〇-，一C (O) ―，一C (S)-或-S (O) 2-， W3是化學(xué)鍵，一NR3--,其中，R3是氫，烷基或烯基， W4是氣，烷基，條基，炔基，烷氧基，環(huán)烷基，芳基，芳氧基，雜芳基或雜環(huán)基，它們中的 每一個被一個或一個以上選自下列基團(tuán)的取代基任選地取代：羥基，烷氧基，烷基，烯基， 炔基，環(huán)烷基，芳基，雜芳基，雜環(huán)基，一NH 2，硝基，一烷基-羥基，一烷基-芳基，一燒 基-雜芳基，一烷基 -雜環(huán)基，一O-R4^ 一〇_烷基-I，一烷基-O-R4，一C(