一種新的烯胺類(lèi)化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從淫羊藿的干燥地上部分中分離得到的一種 具有治療腎癌作用的烯胺類(lèi)化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 淫羊藿（EpimediiFolium)為小檗科（Berbridaceae)淫羊藿屬（Epimedium)植 物，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，干燥地上部分入藥。2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》收載的 品種有淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.，箭葉淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb. etZucc.)Maxim.，柔毛淫羊藿EpimediumpubescensMaxim.、巫山淫羊藿Epimedium wushanense和朝鮮淫羊藿EpimediumkoreanumNakai。此外，還有粗毛淫羊藿、寶興淫羊 藿、茂汶淫羊藿等品種。淫羊藿主要是分布在中國(guó)的江西、陜西、湖南、四川、浙江、廣西、安 徽、湖北、福建、甘肅、廣東等地以及朝鮮、日本、南非、意大利北部至黑海。淫羊藿是一種中 國(guó)常用中藥，具有很高的藥用價(jià)值，滋陰補(bǔ)陽(yáng)，壯陽(yáng)強(qiáng)身。味苦澀，適宜失眠者使用。
[0003] 淫羊藿含有黃酮、揮發(fā)油、木脂素、黃酮木脂素、黃酮糖苷、留體、生物堿等化合物。 黃酮類(lèi)化合物為主要的生物活性成分。木脂素類(lèi)化合物具有抗腫瘤等多種生物活性。黃酮 木脂素類(lèi)化合物是近幾年新發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)化合物，研究表明該化合物具有保肝、抗氧化等生 物活性。
[0004] 現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，淫羊藿具有抗衰老作用、降血壓、降血糖、降血脂、增強(qiáng)機(jī)體 免疫力、抗心律失常、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗病原微生物作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從淫羊藿的干燥地上部分中分離得到的一種具有治療 腎癌作用的烯胺類(lèi)化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將淫羊藿的干燥地上部 分粉碎，用80~90 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b) 步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹(shù)脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個(gè)柱體積，再用75%乙 醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟（b) 中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、55:1、30 :1、15:1和1:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次 用體積比為20:1、15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中 組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗 脫，收集8~10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進(jìn)一步地，所述大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔吸附樹(shù)脂。
[0011] 進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為85 %。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備治療腎癌的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療腎癌的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對(duì)人和動(dòng)物無(wú)毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過(guò)口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無(wú)菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I)理論E⑶值與實(shí)驗(yàn)E⑶值比較。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021] 實(shí)施例1 :化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來(lái)源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購(gòu)自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購(gòu)自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023] 經(jīng)鑒定所購(gòu)買(mǎi)的淫羊藿為植物淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.的干燥地上 部分。
[0024] 制備方法：（a)將淫羊藿的干燥地上部分（8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3 次）和水飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（355g) 和正丁醇萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹(shù)脂除雜，先用10%乙醇 洗脫6個(gè)柱體積，再用75 %乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75% 乙醇洗脫物浸膏（136g) ;(c)步驟（b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積 比為80:1 (8個(gè)柱體積）、55:1 (8個(gè)柱體積）、30:1 (6個(gè)柱體積）、15:1 (8個(gè)柱體積）和1:1 (5 個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（c)中組分4 (31g)用正相 硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1 (8個(gè)柱體積）、15:1 (10個(gè)柱體積）和10:U6個(gè)柱 體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分2 (llg)用十八烷基 硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個(gè)柱 體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)(228mg)。
[0025] 結(jié)構(gòu)確證：HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z264. 1008,結(jié)合核磁特征可得分子式 為C15H15N02，不飽和度為 9。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)SH(ppm，DMS0-d6,600MHZ) :H-1(3.37,S)， Η-4(5. 74,d，J= 0. 96)，H-7(l. 31，s)，Η-8(2. 18,d，J= 0. 96)，Η-9(7. 95,d，J= 12. 8)， H-10 (12. 04,d，J= 12. 8)，H-2'（7. 42,d，J= 8. 7)，H-3'（7. 34,dd，J= 8. 7, 7. 4)， H-4'（7.10,t，J= 7.4)，H-5'（7.32,dd，J= 8.7,7.4)，H-6'（7.41，d，J= 8.7);核磁 共振碳譜數(shù)據(jù)δc (ppm，DMS0-d6,150MHz) :55. 6 (CH，1-C)，76. 7 (C，2-C)，197. 6 (C，3-C)， 115. 1 (CH，4-C)，154. 2 (C，5-C)，124. 0 (C，6-C)，17. 1 (CH3, 7-C)，19. 5 (CH3,8-C)，145. 7 (CH， 9-C)，138. 6(C，Γ-C)，117. 2(CH，2' -C)，129. 1 (CH，3' -C)，124. 3(CH，4' -C)，129. 1 (CH， 5'-C)，117. 2(CH，6'-C);碳原子標(biāo)記參見(jiàn)圖1。IR光譜表明該化合物含有羰基（1688cm1) 和胺基（3250cm3基團(tuán)。蟲(chóng)NMR譜顯示兩個(gè)甲基[(δΗΙ. 31，s，H-7)和（δΗ2. 18,d，J= 0. 96Hz，H-8)]，一個(gè)含氧次甲基（δΗ3. 37,s，H-1)，兩個(gè)烯屬次甲基[(δΗ5. 74,d，J= 0· 96Hz，H-4)和（δΗ7· 95,d，J= 12. 8Hz，H-9)]，以及五個(gè)芳族質(zhì)子[(δΗ7· 42,d，J= 8· 7Hz，Η-2'），（7· 34,dd，J= 8· 7, 7· 4Hz，Η-3'），（7· 10,t，J= 7· 4Hz，Η-4'），（7· 32,dd， J= 8.7,7.4Hz，H-5'）和（7.41，d，J= 8.7Hz，H-6，）]。后者質(zhì)子的低場(chǎng)化學(xué)位移及其耦 合常數(shù)表明該化合物含有仲烯胺（δH12. 04,d，J= 12. 8Hz，H-10)。13CNMR和HSQC譜顯 示15個(gè)碳信號(hào)，包括兩個(gè)甲基，八個(gè)次甲基（一個(gè)含氧次甲基，七個(gè)烯屬次甲基），五個(gè)季碳 (一個(gè)含氧季碳，一個(gè)酮羰基，三個(gè)烯烴季碳）。根據(jù)核磁數(shù)據(jù)分析，再結(jié)合不飽和數(shù)，表明 該化合物為兩環(huán)結(jié)構(gòu)。 1H-iCOSY譜顯示了三個(gè)主要的結(jié)構(gòu)片段：?jiǎn)稳〈谋交h(huán)，烯胺結(jié) 構(gòu)（=CH-NH-)以及下部結(jié)構(gòu)[C(CH3) =CH]。兩個(gè)含氧碳