一種名為表兒茶素反式咖啡酸酯的兒茶素類衍生物及其制備方法和應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于化學技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種名為表兒茶素反式咖啡酸酯的兒茶素類 衍生物及其制備方法和應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 茶，屬山茶科，其葉部加工后的產(chǎn)品如綠茶、紅茶等中均含有具有良好生物活性的 兒茶素類化合物，例如從綠茶中分離出的表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、從紅茶中分 離出的茶黃素類成分，都具有良好的抗氧化、抗衰老等活性。而且，茶產(chǎn)品中還含有具有降 月旨、抗菌、消炎、抗癌的兒茶素類衍生物成分，這些均是農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥等領(lǐng)域的研究熱點。
[0003] 紫娟茶(Zi juan tea)屬于大葉茶變種(C. var .assamica)，是云南省農(nóng)業(yè)科學院茶 葉研究所采用單株選種法經(jīng)多代培育而成的新品種。該茶是以茶樹的葉為原料，經(jīng)過殺青、 揉捻、干燥后制得。紫娟茶主要產(chǎn)于我國云南省，具有紫莖、紫葉、紫芽的特征。這種茶除了 作為茶飲料使用外，還可用于降壓、抗氧化、抗衰老等用途。
[0004] 關(guān)于紫娟茶生物活性的化學基礎(chǔ)的報道比較少，如果能成功的從紫娟茶中研究開 發(fā)出具有生物活性的兒茶素類衍生物成分，將會對農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥等領(lǐng)域作出重要貢獻。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的之一是提供一種從紫娟茶中分離制備得到的名為表兒茶素反式咖 啡酸酯的兒茶素類衍生物，此名為表兒茶素反式咖啡酸酯的兒茶素類衍生物具有如下所示 結(jié)構(gòu)：
[0007] 本發(fā)明的目的之二是提供一種上述名為表兒茶素反式咖啡酸酯的兒茶素類衍生 物的制備方法，其包括以下步驟：
[0008] 1)、原料粉碎
[0009] 取紫娟茶，并將紫娟茶粉碎；
[0010] 2)、浸提
[0011]用甲醇提取粉碎后的紫娟茶，提取液經(jīng)過減壓濃縮制得膏狀提取物；
[0012] 3)分離純化
[0013]將甲醇提取后的膏狀提取物分離純化得到表兒茶素反式咖啡酸酯。
[0014] 作為優(yōu)選，所述步驟2)浸提中，粉碎后的紫娟茶先用石油醚浸提，再用乙酸乙酯浸 提、最后再將經(jīng)乙酸乙酯浸提的紫娟茶用甲醇提取。
[0015] 作為優(yōu)選，所述步驟3)中所述的分離純化是將所述甲醇提取制得的膏狀提取物溶 解后依次經(jīng)MCI柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析、聚酰胺柱層析，最后經(jīng)HPLC制備分離 純化得到表兒茶素反式咖啡酸酯。
[0016] 作為優(yōu)選，所述步驟2)浸提中，有機溶劑提取采用浸泡方式提取，即將粉碎后的紫 娟茶浸泡在有機溶劑中72小時;或者將粉碎后的紫娟茶用有機溶劑超聲波振蕩提取。
[0017] 作為優(yōu)選，步驟3)中所述的分離純化的具體步驟為：將甲醇提取物溶解后使用 Me0H-H20體積比0:100到100:0作為梯度洗脫，收集其中Me0H-H20體積比70:30到80:20的洗 脫組分;然后將所得的洗脫組分經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱層析，以Me0H-H20體積比50:50到 100:0作為梯度洗脫，收集其中Me0H-H 20體積比70:30的洗脫組分;所得洗脫組分再經(jīng)MCI柱 層析，以Me0H-H20體積比30:70到100:0作為梯度洗脫，收集其中Me0H-H 20體積比70:30到80: 20的洗脫組分;然后經(jīng)聚酰胺柱層析，以二氯甲烷-甲醇體積比1:1洗脫，收集相應洗脫組 分，最后經(jīng)HPLC制備純化，得到表兒茶素反式咖啡酸酯。
[0018] 本發(fā)明的目的之三是將如上所述的名為表兒茶素反式咖啡酸酯的兒茶素類衍生 物應用于抗血管炎癥藥物方面的制備。
[0019] 具體地說是將如上所述的表兒茶素反式咖啡酸酯的兒茶素類衍生物和藥學上所 通用的輔料制成一種抗血管炎癥藥物。該藥物劑型包括口服型、外用型和注射型等。所述口 服型包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑等;所述外用型包括栓劑、徐劑、洗劑、膏劑、透皮貼 劑等;所述注射型包括注射液、混旋液、凍干粉等。具體制備方法參照制藥領(lǐng)域的常規(guī)方法 制備。
[0020] 本發(fā)明的有益效果如下：
[0021] 1)通過試驗證實，本發(fā)明所述名為表兒茶素反式咖啡酸酯的兒茶素類衍生物在由 血管緊張素 II誘導的大鼠主動脈血管平滑肌細胞炎癥模型中有一定抗炎作用，可以應用于 制備抗血管炎癥藥物方面。因此本發(fā)明提供的具有醫(yī)學活性的兒茶素類衍生物，對農(nóng)業(yè)和 醫(yī)藥領(lǐng)域具有重要的意義;為有效開發(fā)利用紫娟茶提供了更為廣闊的前景。
[0022] 3)、本發(fā)明制備方法簡單，成本較低。
【附圖說明】
[0023] 圖1為表兒茶素反式咖啡酸酯(epicatechin 3-〇-caffeate)的化學結(jié)構(gòu)式。
[0024] 圖2為表兒茶素反式咖啡酸酯（epicatechin 3-〇-caffeate)對血管緊張素 II (Angll)誘導的大鼠主動脈血管平滑肌細胞(Rat VSMC)炎癥的抑制試驗示意圖。
【具體實施方式】
[0025] 下述實施例中的實驗方法，如無特別說明，均為常規(guī)方法。
[0026] 下述實施例中的百分含量，如無特別說明，均為質(zhì)量百分含量。
[0027] 下面結(jié)合具體實施例來對本發(fā)明做進一步詳細說明。
[0028] -、表兒茶素反式咖啡酸酯（epicatechin 3-〇-caffeate)的制備
[0029] (1)取4.5公斤紫娟茶，并將紫鵑茶粉碎；
[0030] (2)首先將4.5公斤粉碎后的紫娟茶先用15升石油醚常溫浸提72小時，然后在70Hz 下超聲浸提2小時;得石油醚提取液;按上述步驟浸提三次，合并提取液并將提取液濃縮至 膏狀，得石油醚提取浸膏18克；
[0031] 然后將經(jīng)石油醚浸提后的紫娟茶再用15升乙酸乙酯常溫浸提72小時，然后在70Hz 下超聲浸提2小時;得乙酸乙酯提取液，按上述步驟浸提三次;合并提取液并將提取液濃縮 至膏狀，得乙酸乙酯提取浸膏50克；
[0032]最后將經(jīng)過乙酸乙酯提取后的紫娟茶再用15升甲醇常溫浸提72小時，得甲醇提取 液，然后在70Hz下超聲浸提2小時；按上述步驟合并提取液并將提取液濃縮至膏狀，得甲醇 提取浸膏800克。
[0033] (3)取500克甲醇提取浸膏用500mL熱水溶解，再通過MCI柱層析，使用Me0H-H20體 積比0:100到100 :0梯度洗脫，收集其中Me0H-H20體積比70: 30到80: 20的洗脫組分;將得到 的洗脫組分再經(jīng)過Sephadex LH-20凝膠柱層析，使用Me0H-H20體積比50:50到100:0梯度洗 脫，收集其中Me0H-H 20體積比70 : 30的洗脫組分；將得到的洗脫組分經(jīng)過MCI柱層析，使用 Me0H-H20體積比30:70到100:0梯度洗脫，收集其中Me0H-H20體積比70:30到80:20的洗脫組 分;將得到的洗脫組分經(jīng)過聚酰胺柱層析，以二氯甲烷-甲醇體積比1:1洗脫，每20毫升一餾 分，將收集到的餾分點板合并、蒸干后再經(jīng)HPLC制備純化，可得到表兒茶素反式咖啡酸酯。 可得到表兒茶素反式咖啡酸酯(epicatechin 3-〇-caffeate，2.2毫克）。
[0034] 本發(fā)明表兒茶素反式咖啡酸酯(epicatechin 3-〇-caffeate)的特性如下：
[0035] 1)、可溶于甲醇和DMS0,白色固體，
[0036] 2)^UVA ffflnm(loge) ：204(2.9), 286(2.2), 32