制備用于治療心血管疾病的藥物及其中使用的中間體的方法
【專利說明】制備用于治療心血管疾病的藥物及其中使用的中間體的方法
[0001] 本發(fā)明設(shè)及制備可用于合成多己胺-β-徑化酶的周圍選擇性抑制劑的中間體的改 進(jìn)方法。本發(fā)明還設(shè)及在該方法中使用的新化合物。
[0002] (R)-5-(2-氨乙基)-1-(6,8-二氣色滿-3-基)-1,3-二氨咪挫-2-硫酬鹽酸鹽(下面 式1化合物）是DW1的有效的、非毒性的和周圍選擇性抑制劑，其可用于治療某些屯、血管疾 病。W02004/033447公開了化合物1及其制備方法。
[0003]
[0004] W02004/033447中公開的方法設(shè)及(R) -6，8-二氣色滿-3-基胺鹽酸鹽（（R) -6，8-二 氣色滿-3-基胺的結(jié)構(gòu)如下面化合物QA所示）、[4-(叔下基二甲基娃烷基氧基）-3-氧代下 基]氨基甲酸叔下基醋和硫氯酸鐘的反應(yīng)。
[0005]
[0006] (R)-6,8-二氣色滿-3-基胺(化合物QA)是合成化合物1的關(guān)鍵中間體。附接胺的碳 原子處的立體化學(xué)引起化合物1的立體化學(xué)，所W有利的是化合物QA盡可能W純對映體的 形式存在。換言之，化合物QA的(R)-對映體應(yīng)是主要的，很少或不存在(S)-對映體。因此，用 于制備化合物QA的方法將有利地生產(chǎn)盡可能高對映體過量值(enantiomeric excess,ee) 的化合物QA。
[0007] 現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)制備例如式QA化合物的有利方法。在一方面，運(yùn)些方法設(shè)及生物轉(zhuǎn) 化步驟。在另一方面，運(yùn)些方法設(shè)及化學(xué)轉(zhuǎn)化。運(yùn)些方法也可用在可用于多己胺-β-徑化酶 的其它周圍選擇性抑制劑的生產(chǎn)中的相似前體的制備中。
[000引 W02008/136695公開了式ΥΑ化合物、其（R)-對映體或（S)-對映體、（R)-對映體和 (S)-對映體的混合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0009]
[0010] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)式ΥΑ化合物的(R)-對映體是高效能且顯著降低大腦進(jìn)入的有效多己胺- β-徑化酶抑制劑。
[0011] 如在W02008/136695中公開，式Y(jié)A化合物可在還原性烷基化條件下通過式1化合物 和苯甲醒反應(yīng)來制備。具體地，（R)-5-(2-氨乙基）-1-(6,8-二氣色滿-3-基)-1,3-二氨咪 挫-2-硫酬和苯甲醒可在溶劑或溶劑的混合物和還原劑例如氯基棚氨化鋼或Ξ乙酷氧基棚 氨化鋼的存在下進(jìn)行反應(yīng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了式N化合物的（R)-對映體或（S)-對映體或者(R)- 對映體和(S)-對映體的混合物，
[0013]
[0014] 其中：X是C出、氧或硫;Ri、R2和R3相同或不同并且表示氨、面素、烷基、烷氧基、徑 基、硝基、烷基幾基氨基、烷基氨基或二烷基氨基，其中：術(shù)語烷基是指含有一個至六個碳原 子的直鏈或支鏈的控鏈，可選地被芳基、烷氧基、面素、燒氧幾基或徑基幾基取代;術(shù)語芳基 是指苯基或糞基，可選地被烷氧基、面素或硝基取代;術(shù)語面素是指氣、氯、漠或艦。
[0015] X可W是氧。可選地，Ri、R2和R3中的一個為氨，其它是面素；適合地為氣、氯、漠或 艦。優(yōu)選地，在芳香環(huán)的5-位和7-位的部分均為氨并且在6-位和8-位的基團(tuán)均為面素;適合 地均為氣、氯、漠或艦。優(yōu)選地，面素是氣或漠；最優(yōu)選地是氣（其是本文公開的式NA化合 物）。優(yōu)選地，化合物的形式是(R)-對映體。
[0016]優(yōu)選地:X是0;在芳香環(huán)的5-位和7-位的部分為氨并且在6-位和8-位的基團(tuán)均為 氣、氯、漠或艦;化合物的形式是(R)-對映體。
[0017]優(yōu)選地，式N化合物的形式是(R)-對映體且具有式R-NA:
[001 引
[0019] 式N化合物可由相應(yīng)的式Μ化合物制備：
[0020]
[0021 ]其中，X、Ri、化和R3具有如上給出的相同含義。
[0022] X可W是氧?？蛇x地，Ri、R2和R3中的一個為氨，其它是面素；適合地為氣、氯、漠或 艦。優(yōu)選地，在芳香環(huán)的5-位和7-位的部分均為氨并且在6-位和8-位的基團(tuán)均為面素;適合 地為氣、氯、漠或艦。優(yōu)選地，面素是氣或漠;最優(yōu)選地是氣(其是本文公開的式MA化合物）。
[0023] 優(yōu)選地:X是0;在芳香環(huán)的5-位和7-位的部分為氨并且在6-位和8-位的基團(tuán)均為 氣、漠或艦;最優(yōu)選地在6-位和8-位的基團(tuán)均為氣(運(yùn)是本文公開的化合物M)。
[0024] 在上述方法中使用的式Μ的優(yōu)選化合物是式MA化合物，其構(gòu)成本發(fā)明的另一個方 面：
[0025]
[0026] 有利地，化合物Μ和Ν是可在各種方法中用作起始材料或中間體的通用產(chǎn)品。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了如上所述的化合物Μ在制備式Q化合物、化合物Q的 單獨(dú)的（R)-對映體或單獨(dú)的（S)-對映體或者化合物Q的（R)-對映體和（S)-對映體的混合 物、或其鹽的方法中的用途。
[002引
[0029] 其中，X、Ri、R2和R3如上定義。X可W是氧?？蛇x地，Ri、R2和R3中的一個為氨，其它是 面素;適合地為氣、氯、漠或艦。優(yōu)選地，在芳香環(huán)的5-位和7-位的部分均為氨并且在6-位和 8-位的基團(tuán)均為面素;適合地均為氣、氯、漠或艦。優(yōu)選地，面素是氣或漠;最優(yōu)選地是氣。
[0030] 優(yōu)選地，化合物Μ可用于制備化合物Q的（R)-對映體。優(yōu)選地，化合物MA可用于制備 化合物QA或其鹽：
[0031]
[0032] 式Q化合物可用于使用本文公開的任何方法或現(xiàn)有技術(shù)中已知的任何方法例如使 用W02004/033447或W02008/136695中公開的方法來制備式1和式ΥΑ化合物。
[0033] 化合物Q的適合的鹽包括レ酒石酸鹽、鹽酸鹽、甲橫酸鹽、甲苯橫酸鹽、Ξ氣乙酸 鹽、巧樣酸鹽、乙醇酸鹽、草酸鹽和乙酸鹽。優(yōu)選的鹽是心酒石酸鹽。適合地，化合物QA可W W游離堿形式或作為其心酒石酸鹽來制備。優(yōu)選地，化合物QA作為其心酒石酸鹽制備。
[0034] 根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了制備化合物MB的方法，該方法包括將式R化合物與 2-硝基乙醇或硝基乙締反應(yīng)W獲得化合物MB。
[0035]
[0036] 化合物MB是其中X為氧的式Μ化合物。Ri、R2和化如上所定義。可選地，Ri、R2和化中的 一個為氨，其它是面素;適合地為氣、氯、漠或艦。優(yōu)選地，在芳香環(huán)的5-位和7-位的部分均 為氨并且在6-位和8-位的基團(tuán)均為面素;適合地均為氣、氯、漠或艦。優(yōu)選地，面素是氣或 漠;最優(yōu)選地是氣。
[0037] 適合地在溶劑、堿和鄰苯二甲酸酢的存在下實(shí)施所述方法。適合的堿為二下胺，適 合的溶劑為甲苯。
[003引式R化合物可通過任何已知的方法來制備。運(yùn)些方法公開于W02009/064210和 Beliaev et al，0巧.Process Res.Dev.(有機(jī)工藝研究開發(fā)），2012，16(4)，第704-709頁。 例如，化合物R可通過將式IV化合物和甲酯化劑例如六亞甲基四胺和酸例如乙酸反應(yīng)來制 備。
[0039]
[0040] 優(yōu)選地，化合物RA(3，5-二氣-2-徑基苯甲醒)是通過將2，4-二氣苯酪和六亞甲基 四胺及Ξ氣乙酸反應(yīng)來制備。
[0041] 如本文描述的并且通過本文描述的方法制備的式Μ和式N化合物可用于下述方法 中的任何一種中，所有的方法均構(gòu)成本發(fā)明的方面。
[0042]
[0043] 其中，X、Ri、化和R3如上所定義。
[0044] 根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了制備式W的前手性酬色滿酬化合物的方法，該方法 包括將式Μ化合物轉(zhuǎn)化成式W化合物。
[0045]
[0046] 其中，X、Ri、R2和R3如上定義。適合地，轉(zhuǎn)化包括將化合物Μ與鐵和乙酸反應(yīng)。優(yōu)選 地，式WA化合物適合地在鐵和乙酸的存在下通過式ΜΑ化合物的反應(yīng)來制備。
[0047]
[0048] 本發(fā)明也提供了使用生物轉(zhuǎn)化方法來獲得式Q化合物的(R)-對映體或(S)-對映體 或其鹽。適合的鹽如上所述。
[0049] 因此，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了制備式Q化合物的（R)-對映體(R-Q)或(S)- 對映體(S-Q)的方法，該方法包括使用轉(zhuǎn)氨酶和胺基供體通過轉(zhuǎn)氨作用對式W化合物進(jìn)行生 物轉(zhuǎn)化。
[0050]
[0051] 酶是轉(zhuǎn)氨酶，其也可被稱為氨基轉(zhuǎn)移酶。適合的酶是具有轉(zhuǎn)氨酶活性的多膚。適合 地，所述酶是工程酶。
[0052] 胺基供體可選自異丙胺、丙氨酸、3-氨基下酸和甲基節(jié)胺。優(yōu)選地，胺基供體是異 丙胺。胺基供體適合地W其鹽的形式提供。優(yōu)選地，氨基供體W異丙胺鹽酸鹽提供。
[0053] 優(yōu)選地，轉(zhuǎn)氨作用是對映體選擇性的，一種對映體相對于其它對映體W對映體過 量值提供。對映體過量值按照[主要對映體-次要對映體]/[主要對映體+次要對映體]來計 算，W百分比表示。優(yōu)選地，一種對映體W至少50%的對映體過量值生產(chǎn)。更優(yōu)選地，對映體 W至少70 %的對映體過量值生產(chǎn)。更優(yōu)選地，對映體W至少80 %的對映體過量值生產(chǎn)。最優(yōu) 選地，對映體W至少90 %的對映體過量值生產(chǎn)。優(yōu)選的轉(zhuǎn)氨酶是引起至少50 %的對映體過 量值的轉(zhuǎn)氨酶。更優(yōu)選的轉(zhuǎn)氨酶是引起化合物Q的R-對映體至少50%的對映體過量值的轉(zhuǎn) 氨酶。
[0054] 優(yōu)選地，反應(yīng)在適于生產(chǎn)與次要對映體相比對映體過量值的所需對映體（即主要 對映體)的條件下進(jìn)行。
[005引酶可選自US 8,293,507中公開的酶中的任何一種。
[0056] 下列酶可用作上述方法中的轉(zhuǎn)氨酶：
[0057] 供應(yīng)商：Johnson Matthey(莊信萬豐）
[005引試劑盒名稱:X-zyme
[0059] 供應(yīng)商代碼:未提供
[0060] 試劑盒內(nèi)容物:36種轉(zhuǎn)氨酶和輔因子PLP
[0061] 供應(yīng)商 Jrozomix
[0062] 試劑盒名稱:轉(zhuǎn)氨酶面板(200種酶的試劑盒）
[0063] 供應(yīng)商代碼:PR0-TRANSP
[0064] 試劑盒內(nèi)容物:200種酶 [00巧]供應(yīng)商：Codexis
[0066] 試劑盒名稱::c〇dex?ATA篩選試劑盒
[0067] 供應(yīng)商代碼:ATASK-200250
[0068] 試劑盒內(nèi)容物:24種轉(zhuǎn)氨酶和輔因子PLP
[0069 ]酵代碼:4了4-007^了4-013^了4-025^了4-113^了4-117^了4-200、4了4-217、八了八- 234、ATA-237、ATA-238、ATA-251、ATA 254、ATA-256、ATA-260、ATA-301、ATA-303、ATA-412、 ATA-415、ATA-P1-B04、ATA-P1-F03、ATA-P1-G05、ATA-P2-A01、ATA-P2-A07和ATA-P2-B01。
[0070] ATA-025和ATA-P2-A07生成對映體過量值的化合物QA的（s)-對映體。ATA-251生成 對映體過量值的化合物QA的(R)-對映體。
[0071] 轉(zhuǎn)氨作用適合地在酶的輔因子的存在下進(jìn)行。輔因子優(yōu)選化唉醒-5'-憐酸(PLP)。
[0072] 轉(zhuǎn)氨作用反應(yīng)可在選自二甲亞諷(DMS0)、乙臘、庚燒、四氨巧喃（THF)、乙酸乙醋、 2-丙醇和甲基叔下基酸(mtBE)的溶劑中進(jìn)行。
[0073] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)轉(zhuǎn)氨酶是ATA-251并且底物是式WA化合物時使用DMS0是特別有利的。 轉(zhuǎn)氨作用反應(yīng)產(chǎn)生式QA化合物的R-對映體并且R-對映體的對映體過量值為90%。
[0074] 轉(zhuǎn)氨作用反應(yīng)可在緩沖液中進(jìn)行。緩沖液可W是Ξ乙醇胺鹽酸鹽水溶液。Ξ乙醇 胺鹽酸鹽在緩沖液中的濃度為約200mM?？捎名}酸將溶液的pH值范圍從約7調(diào)節(jié)至約8,優(yōu)選 約 7.5。
[0075] 轉(zhuǎn)氨酶反應(yīng)的抑值通常保持在約7 W上，優(yōu)選約7和約9之間，更優(yōu)選約7和約8.5之 間。
[0076] 轉(zhuǎn)氨作用反應(yīng)的溫度范圍可為約25°C至約50°C。優(yōu)選地，溫度范圍為約25°C至約 40°C。通常地，溫度為約30°C。
[OOW]優(yōu)選的轉(zhuǎn)氨作用反應(yīng)可表示為：
[007 引
[0079] 上述WA的轉(zhuǎn)氨作用的優(yōu)選試劑/條件是：
[0080] ?酶:ATA-251
[0081 ] ?輔因子:PLP
[0082] ?氨基供體:異丙胺鹽酸鹽
[008引 ?緩沖液:Ξ乙醇胺鹽酸鹽水溶液
[0084] ?溶劑:DMS0
[0085] 通常地，轉(zhuǎn)氨作用方法通常包括W下步驟：
[0086] (a)制備緩沖液(溶液1)
[0087] (b)制備胺基供體溶液(溶液2)
[0088] (C)制備輔因子/緩沖液(溶液3)
[0089] (d)將溶液巧日入至酶(溶液4)
[0090] (e)將溶液巧日入至溶液4 (溶液5)
[0091] (f)將底物加入至溶液5(溶液6)
[0092 ] (g)將溶液1加入至溶液6 (溶液7)
[0093] 化)將溶劑加入至溶液7
[0094] (i)當(dāng)反應(yīng)完成時，加入有機(jī)溶劑例如乙酸乙醋 [009引（j)分離產(chǎn)物。
[0096] 可使用如本文公開的方法由硝基色締化合物Μ制